中國(guó)人乳β-酪蛋白的分離和鑒定研究.pdf

1、人乳是最安全和最經(jīng)濟(jì)的嬰兒食品，含有嬰兒生長(zhǎng)發(fā)育所必須的全部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在增強(qiáng)嬰兒抵抗力、促進(jìn)組織生長(zhǎng)發(fā)育等多方面發(fā)揮著重要的生物學(xué)功能。目前，我國(guó)6個(gè)月以下嬰兒母乳喂養(yǎng)率不足40％，有60％以上的嬰兒需要配方食品來(lái)為他們提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，再加上幼兒的需求，致使嬰幼兒配方乳的市場(chǎng)需求巨大。因此，開(kāi)展人乳蛋白組分的研究，對(duì)于嬰幼兒配方乳品的研制具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。相關(guān)產(chǎn)品的問(wèn)世也將有效解決我國(guó)母乳喂養(yǎng)不足的問(wèn)題。
　　 本研究以新鮮的中

2、國(guó)人乳為研究對(duì)象，通過(guò)離心脫脂，調(diào)節(jié)等電點(diǎn)沉淀蛋白，使得酪蛋白解離出來(lái)，對(duì)所得酪蛋白進(jìn)行陰離子交換層析，分離出β-酪蛋白，并且β-酪蛋白被完全純化出來(lái)。通過(guò)Western-Blot和基質(zhì)輔助激光解吸附電離子串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜法(MALDI-TOF/TOF MS)分別對(duì)分離洗脫液進(jìn)行鑒定，證明β-酪蛋白能被成功的分離出來(lái)。主要研究工作和結(jié)論如下:
　　 1.在酸性條件下添加氯化鈣進(jìn)行分離，從pH值、離心力、CaCl2溶液濃度，三個(gè)方

3、面對(duì)分離效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，經(jīng)過(guò)十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)法測(cè)定分離效果。結(jié)果表明:當(dāng)pH=4.3，離心力為40000 g，CaCl2溶液濃度60 mmol/L時(shí)，分離得到的酪蛋白組分純度最高。
　　 2.人乳酪蛋白沉淀通過(guò)DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換層析分離，對(duì)洗脫液進(jìn)行SDS-PAGE電泳鑒定，初步判定，峰Ⅲ是人乳β-酪蛋白，其純度高于90％。
　　 3.對(duì)分離出的