二甲雙胍在3T3-L1前脂肪細胞誘導(dǎo)過程中對v-SNAREs蛋白家族mRNA表達的影響.pdf

1、目的：
　　通過觀察3T3-L1前脂肪細胞誘導(dǎo)分化過程中二甲雙胍對v-SNAREs mRNA表達變化，探討二甲雙胍在GLUT4轉(zhuǎn)運中的作用機制。
　　方法：
　　購買3T3-L1前脂肪細胞進行培養(yǎng)，當(dāng)細胞生長至融合度達到100％或過融合時開始誘導(dǎo)，予以誘導(dǎo)液誘導(dǎo)分化，A液3天、B液1天，交替3次，共12天，在誘導(dǎo)過程中，分別給予不同濃度二甲雙胍（0、0.5、1、2mmol/L)持續(xù)干預(yù)，第12天收集標本。誘導(dǎo)成脂通過油

2、紅O染色鑒定。運用RT-PCR技術(shù)檢測脂肪細胞中AMPK、GLUT4、VAMP2、3、4、5、7、8的mRNA水平。實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析，組間差異采用單因素方差分析，組間多重比較用LSD檢驗，檢驗水準取?=0.05。
　　結(jié)果：
　　AMPK、VAMP4、VAMP7 mRNA結(jié)果以單因素方差分析無統(tǒng)計學(xué)意義。GLUT4、VAMP2、3、5、8 mRNA結(jié)果以單因素方差分析達統(tǒng)計學(xué)意義，再行LSD檢驗結(jié)

3、果：1）與0mmol/L組相比，0.5mmol/L組GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA水平無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）；2）與0mmol/L組相比，1mmol/L組GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA水平上調(diào)，差異達統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；3）與1mmol/L組相比，2mmol/L組GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA水平下調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　二甲雙胍可以作用于前脂肪細胞

4、誘導(dǎo)分化過程中，在1mmol/L濃度范圍內(nèi)，隨著二甲雙胍濃度增加，可以上調(diào)脂肪細胞中GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA的表達，且具有一定的劑量依賴效應(yīng)。1mmol/L可能是二甲雙胍在3T3-L1前脂肪細胞作用的最大濃度。二甲雙胍可能通過調(diào)節(jié)v-SNAREs蛋白家族發(fā)揮對脂肪細胞GLUT4的轉(zhuǎn)運的調(diào)控。當(dāng)二甲雙胍濃度達到2mmol/L，則下調(diào)脂肪細胞中GLUT4、VAMP2、3、8 mRNA的表達。本實驗為進一步探索二甲雙胍在GLU