鄰苯二甲酸酯類對3T3-L1前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響.pdf

1、研究目的：脂肪細(xì)胞的增殖和分化異常可引起脂肪細(xì)胞數(shù)目增多、體積變大、脂肪顆粒過多堆積，從而導(dǎo)致能量代謝平衡失調(diào)，引起肥胖及相關(guān)疾病，給社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。環(huán)境因素是肥胖疾病的影響因素之一：鄰苯二甲酸酯類(PAEs)是一類持久性有機(jī)污染物，具有環(huán)境類雌激素樣作用，在人體內(nèi)已有較高暴露量。目前關(guān)于其毒性危害研究均集中在生殖毒性方面。文獻(xiàn)報道和前期研究提示PAEs與腹部肥胖以及兒童肥胖相關(guān)，但目前未見其影響機(jī)制的研究。
　　研

2、究方法：本課題以PAEs是過氧化物酶體增殖劑為切入點，可以激活過氧化物酶體增殖劑受體PPARs。以兩種我國工業(yè)使用最多的、人體暴露量最高的兩種PAEs(DBP、DEHP)為研究目標(biāo)。采用體外培養(yǎng)小鼠來源的3T3-L1前體脂肪細(xì)胞建立實驗?zāi)Ｐ?，?jīng)典激素雞尾酒法誘導(dǎo)3T3-L1前體脂肪細(xì)胞分化成成熟的脂肪細(xì)胞，設(shè)計兩種標(biāo)志性PAEs染毒參與3T3-L1前體脂肪細(xì)胞的誘導(dǎo)分化，采用油紅O染色法在倒置熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化、脂滴的形成過程

3、和脂滴數(shù)量變化；采用油紅O提取法定量分析脂肪細(xì)胞脂滴含量變化；采用實時熒光定量PCR技術(shù)分析分化基因PPARγ和脂聯(lián)素的表達(dá)變化。
　　研究結(jié)果：在誘導(dǎo)分化第二天后，染毒組劑量組率先出現(xiàn)脂滴。誘導(dǎo)分化結(jié)束后染毒劑量組脂滴含量大于空白對照組，同時不同染毒劑量組脂滴含量隨染毒劑量遞增。脂肪細(xì)胞分化基因PPARγ、脂聯(lián)素均隨著染毒劑量的增加而表達(dá)上調(diào)(P<0.01)。
　　研究結(jié)論：PAEs是脂肪細(xì)胞分化基因PPARγ的有效配體可