南方人工養(yǎng)殖史氏鱘大量死亡的病理學(xué)研究.pdf

1、我國鱘魚養(yǎng)殖已經(jīng)有近10 余年的歷史，鱘魚最初引進(jìn)我國進(jìn)行人工養(yǎng)殖時(shí)，疾病比較單一。由于鱘魚腸道結(jié)構(gòu)比較簡單，比較常見的疾病主要為腸炎，發(fā)病率也較低。經(jīng)過長時(shí)間養(yǎng)殖后，由于養(yǎng)殖環(huán)境的惡化，相比之下，現(xiàn)在我國鱘魚從發(fā)眼卵孵化、苗種培育到商品魚養(yǎng)殖，所發(fā)生的疾病有病毒、細(xì)菌和寄生蟲等疾病。并易爆發(fā)具有致命性、傳染性、難于治療的綜合性疾病，因此，疾病的防治成為養(yǎng)殖的瓶頸問題。本研究材料取自廈門某人工養(yǎng)殖史氏鱘發(fā)生大量死亡的患病魚體。
　

2、　 本研究通過對患病魚的表觀癥狀和組織細(xì)胞的觀察，患病魚的主要癥狀有腹部體表出血和解剖后嚴(yán)重腹水；脾臟腫大、肝臟呈花肝或灰肝、腎臟嚴(yán)重腫大、出現(xiàn)很多白色點(diǎn)狀結(jié)節(jié)。組織病理變化：脾臟出現(xiàn)大量的嗜酸性血細(xì)胞；肝臟出現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)疏松和致密的肝細(xì)胞、肝細(xì)胞壞死；腎臟的尿細(xì)管上皮細(xì)胞核萎縮、變形、壞死和脫落、腎間質(zhì)出現(xiàn)大量的嗜酸性白血球和腎小球體膨脹等組織病理現(xiàn)象。
　　 在無菌條件下，從患病魚的肝、腎、脾等組織的病灶部位，進(jìn)行普通固體營養(yǎng)

3、培養(yǎng)基平板的劃線接種，置37℃恒溫培養(yǎng)20～24h，取其優(yōu)勢菌的單個(gè)菌落進(jìn)行重復(fù)劃線分離，純化培養(yǎng)至純種，保存于斜面培養(yǎng)基。將培養(yǎng)20h的分離菌株用無菌生理鹽水洗下，制成濃度為3.0×108 菌懸液，對健康的史氏鱘背鰭基部肌肉注射0.3mL 菌液，對照組注射無菌生理鹽水0.2mL，觀察發(fā)病癥狀和死亡情況。取經(jīng)人工感染中出現(xiàn)典型癥狀的病魚，再次分離純化培養(yǎng)后的菌液進(jìn)行復(fù)感染實(shí)驗(yàn)。
　　 取經(jīng)確認(rèn)致病性的菌株，進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢、

4、氧化酶等定向試驗(yàn)。通過基本的生理生化測定和細(xì)菌形態(tài)菌落觀察，結(jié)合VITEK-AMS-32 自動微生物分析系統(tǒng)和GNI 鑒定卡（法國生物梅里埃公司生產(chǎn)），對病原菌進(jìn)行自動鑒定，最終確定為嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）。利用藥敏紙片（杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)）在營養(yǎng)瓊脂平板上（37℃恒溫培養(yǎng)24h），進(jìn)行病原菌對藥物敏感性的標(biāo)準(zhǔn)判定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明紅霉素、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、慶大霉素、鏈霉素、妥布霉素等抗菌素具