Tip60蛋白多克隆抗體制備與鑒定.pdf

1、Tip60(Tat interactive protein，60kD)是重要的乙酰轉(zhuǎn)移酶，在細(xì)胞周期阻滯、細(xì)胞凋亡、DNA損傷修復(fù)過程中都不可或缺，在腫瘤發(fā)生中起到關(guān)鍵作用。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生DNA損傷時，Tip60參與DNA損傷的感受、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和修復(fù)的過程。
　　 DNA損傷對細(xì)胞及機(jī)體會造成程度不同的破壞和損害。因而細(xì)胞內(nèi)存在一個復(fù)雜的信號網(wǎng)絡(luò)來感知DNA損傷，以便進(jìn)行修復(fù)，在損傷無法修復(fù)時使細(xì)胞發(fā)生周期阻滯，細(xì)胞凋亡或細(xì)胞衰老等生

2、物學(xué)反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)P53蛋白居于這個網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵位置，它被DNA損傷信號通路中的一系列激酶磷酸化而活化，轉(zhuǎn)錄下游靶基因，從而決定細(xì)胞的存亡。
　　 P53是一個轉(zhuǎn)錄因子，是細(xì)胞生長過程中主要的調(diào)控因子，在保持細(xì)胞基因組的完整性，抑制惡性腫瘤增殖中起到至關(guān)重要的作用。當(dāng)細(xì)胞遭受不同程度的損傷時，P53選擇性地轉(zhuǎn)錄激活調(diào)控細(xì)胞周期的基因或促凋亡基因，使細(xì)胞周期暫停，允許細(xì)胞進(jìn)行自我修復(fù)；或當(dāng)損傷無法被修復(fù)時啟動細(xì)胞程序性死亡，從而阻

3、止有惡性腫瘤傾向的突變細(xì)胞的生成。
　　 P53可被磷酸化、泛素化和乙?；揎?，以影響其穩(wěn)定性。而Tip60就可以通過對P53進(jìn)行乙?；揎棧蛘擢?dú)立于P53，參與細(xì)胞DNA損傷網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控。為了更好的研究Tip60的生物學(xué)功能，我表達(dá)了GST-Tip60融合蛋白，并用其免疫新西蘭家兔，收集血清。然后我將抗血清進(jìn)行了純化和濃縮，最終獲得了較高純度與濃度的Tip60多克隆抗體。這將幫助我們實(shí)驗室對Tip60蛋白在DNA損傷中的功能進(jìn)