擬南芥中兩個tmm等位基因突變體的篩選、新表型鑒定及分子遺傳學初步分析.pdf

1、本文以擬南芥為實驗材料，使用甲基磺酸乙酯(EMS)誘變處理法致使擬南芥突變，并通過對M2代擬南芥氣孔表型觀察，篩選到兩個氣孔表型異常的突變體。通過遺傳分析鑒定，證明所得到的突變體均為單基因隱性突變；互補實驗證明，這兩個突變體均為tmm等位基因突變體。基因克隆和序列分析結果表明，所得到的突變體突變位點和突變類型與tmm-1及tmm-2各不相同，將這兩種新的tmm等位基因突變體分別命名為tmm-4和tmm-5。本文對這些tmm等位基因突變體

2、新的表型及特性作了較為深入的研究。 在氣孔表型方面，和tmm-1一樣，tmm-4及tmm-5中最少一個細胞間隔的氣孔分布模式也被打破，突變體中氣孔成簇，氣孔密度明顯增大。但在tmm-4葉片發(fā)育初期，氣孔密度及氣孔簇密度高于其它等位基因突變體，這說明在TMM基因上，tmm-4突變位點所處的區(qū)域對葉片發(fā)育初期下表皮的氣孔發(fā)育起到了更為關鍵的調控作用。而在子葉發(fā)育的過程中，tmm-5成簇氣孔的比例始終要高于其它兩種等位基因突變體，說明

3、在tmm-5中氣孔分布調控的缺陷更為明顯，與其它兩種突變體相比，tmm-5中有更多的氣孔分布打破了正常模式，從而形成氣孔簇。 對ABA響應的生理實驗中，tmm-5對外源ABA抑制生長及種子萌發(fā)作用是超敏的；tmm-4則在ABA參與控制的種子休眠過程有缺陷；在高濃度ABA處理下，tmm-4及tmm-5均表現(xiàn)出對ABA誘導的氣孔閉合不敏感；在ABA參與調控的壓力響應實驗中，3種tmm突變體離體葉片的失水率均高于野生型。以上結果一方面

4、說明tmm等位基因突變位點不同，從而導致對生理過程產生不同影響；另一方面說明，TMM參與了介導ABA對擬南芥生長的調控。 各tmm突變體中TMM基因在轉錄水平上都沒有受到突變的影響，均能正常反轉錄出全長TMM。而在野生型中超表達TMM，雖然沒有改變氣孔的分布模式，但卻導致轉基因植株葉表皮毛和表皮毛分支明顯減少。這表明TMM參與調控了葉表皮毛的形成及分支數(shù)的決定。同時，tmm突變體中葉表皮毛正常的現(xiàn)象表明，TMM可能與其它蛋白協(xié)同