第一部分6-α乙基鵝去氧膽酸及其衍生物的設(shè)計(jì)與合成第二部分氯硝柳胺衍生物的設(shè)計(jì)與合成.pdf

1、第一部分：6-α乙基鵝去氧膽酸及其衍生物的設(shè)計(jì)與合成
　　6-α乙基鵝去氧膽酸(6-alpha ethyl chenodeoxycholic acid，6ECDCA)，又稱(chēng)奧貝膽酸，為鵝去氧膽酸6-α乙基取代衍生物，是第一個(gè)進(jìn)入臨床研究的法尼酯X受體（Farnesoid X receptor，F(xiàn)XR）選擇性激動(dòng)劑，通過(guò)激活肝、腸、腎等組織的FXR,抑制膽汁酸的合成,增加胰島素的敏感性,調(diào)節(jié)脂肪代謝和血糖平衡。法尼酯X受體（FXR）

2、屬于核受體超家族成員，主要表達(dá)于肝臟、胃腸道及腎臟。作為一種膽汁酸受體，F(xiàn)XR通過(guò)調(diào)控一系列基因的表達(dá)，調(diào)節(jié)膽汁酸的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝，在膽汁酸及膽固醇的代謝過(guò)程中具有重要作用,成為重要的藥物靶點(diǎn)。作為FXR的特異性激動(dòng)劑，6-α乙基鵝去氧膽酸胞外EC50為99nmol/L,胞內(nèi)EC50為85nmol/L，具有比FXR天然激動(dòng)劑鵝去氧膽酸高約100倍的活性。臨床研究結(jié)果表明，奧貝膽酸對(duì)原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）和非酒精性脂肪性肝炎（NA

3、SH）均具有良好的治療作用。已獲得美國(guó)FDA治療伴隨肝纖維化的非酒精性脂肪性肝炎突破性療法和治療原發(fā)性膽汁性肝硬化患者的快速通道資格，同時(shí)在美國(guó)和歐洲獲得了治療PBC患者孤兒藥資格，用于治療那些對(duì)舊標(biāo)準(zhǔn)治療藥物熊去氧膽酸沒(méi)有充分應(yīng)答或不能耐受的患者，有望取代熊去氧膽酸的治療地位，成為治療NASH和PBC的特效藥物，在肝病治療領(lǐng)域顯示出巨大的應(yīng)用前景。
　　構(gòu)效關(guān)系分析表明，6-α乙基鵝去氧膽酸分子6位乙基和24位羧基是其活性的特異

4、性官能團(tuán)。本課題在保持6位乙基和24位羧基的基礎(chǔ)上，對(duì)6-α乙基鵝去氧膽酸分子3位羥基進(jìn)行衍生化改造，引入極性的氨基酸基團(tuán)，以氨基甲酸酯鍵作為連接子，利于肝酶的選擇性水解，提高藥物的肝靶向性，同時(shí)利用氨基酸的極性基團(tuán)提高水溶性，改善藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。在此基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)合成了6個(gè)氨基酸衍生物，利用1H-NMR及ESI-MS確證了化合物結(jié)構(gòu)。
　　首先，對(duì)陽(yáng)性對(duì)照藥6-α乙基鵝去氧膽酸的合成工藝進(jìn)行了優(yōu)化。文獻(xiàn)報(bào)道的6-α乙基鵝去氧膽酸合

5、成路線長(zhǎng)，反應(yīng)條件苛刻，需要低溫及無(wú)水無(wú)氧條件，總收率低，不易放大量合成制備。本文選擇鵝去氧膽酸為起始原料，經(jīng)過(guò)氧化、酯化、硅醚化、亞乙基化、還原、氫化，得到目標(biāo)化合物。通過(guò)改進(jìn)氧化劑類(lèi)型及配比，改變24位羧基保護(hù)策略，摒棄苛刻的無(wú)水無(wú)氧條件，以及改善氫化條件等，對(duì)合成路線進(jìn)行了優(yōu)化，提高了各步中間體收率，總產(chǎn)率達(dá)42％?？勺鳛橹性嚪糯罅亢铣陕肪€的基礎(chǔ)。接著，以合成的6-α乙基鵝去氧膽酸為原料，對(duì)設(shè)計(jì)的氨基酸衍生物進(jìn)行了合成及結(jié)構(gòu)確證，

6、相關(guān)化合物的活性正在測(cè)試中。
　　本論文以鵝去氧膽酸為原料，經(jīng)過(guò)一系列反應(yīng)得到6-α乙基鵝去氧膽酸，然后以其為先導(dǎo)化合物，設(shè)計(jì)合成了6個(gè)氨基酸類(lèi)衍生物，相關(guān)化合物的活性正在測(cè)試中。所有化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)均通過(guò)MS和1H-NMR鑒定。
　　第二部分：氯硝柳胺衍生物的設(shè)計(jì)、合成與生物活性評(píng)價(jià)
　　氯硝柳胺又稱(chēng)又名育米生、滅絳靈、百螺殺等，臨床上用于治療腸道寄生蟲(chóng)感染，對(duì)多種絳蟲(chóng)有效。近年來(lái)通過(guò)多種高通量篩選研究表明氯硝柳胺是一

7、種具有潛在抗腫瘤作用的藥物。氯硝柳胺通過(guò)抑制Wnt/β-catenin,mTORC1，STAT3，NF-kB,ROS和Notch等信號(hào)通路，靶向腫瘤細(xì)胞中的線粒體細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯、生長(zhǎng)抑制，細(xì)胞凋亡。許多體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究都表明了氯硝柳胺的抗腫瘤活性，對(duì)腫瘤干細(xì)胞的抑制作用讓氯硝柳胺成為治療腫瘤的潛在藥物。
　　體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)都證明了氯硝柳胺可以抑制不同腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲浸潤(rùn)能力，并且促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡等，

8、從而發(fā)揮出抗腫瘤細(xì)胞的活性。這些特性使氯硝柳胺很有可能會(huì)成為有效的抗腫瘤物運(yùn)用于臨床實(shí)踐中。
　　由氯硝柳胺水溶性較差，于其過(guò)低的水溶性導(dǎo)致其體內(nèi)生物利用度偏低，在SD大鼠中口服生物利用度只有10%左右，成藥性差，比較低的口服生物利用度和比較差的水溶性降低了氯硝柳胺在臨床應(yīng)用中的抗腫瘤效果。但是對(duì)其進(jìn)行適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)修飾，可顯著改善其水溶性，提高其在體內(nèi)的生物利用度。因此，氯硝柳胺具有成為新的天然來(lái)源藥物活性先導(dǎo)物研究潛力。
　

9、　本課題主要對(duì)氯硝柳胺2位羥基進(jìn)行衍生化改造，引入特異性而且能夠提高其水溶性的極性基團(tuán)，來(lái)提高其特異性的生物利用度，同時(shí)提高其在水中的溶解性，改善氯硝柳胺在人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。引入各種不同的脂肪鏈羧基基團(tuán)以或脂肪鏈氨基基團(tuán)或肟基基團(tuán)，通過(guò)醚鍵與氯硝柳胺的2位羥基偶聯(lián)，來(lái)改善其水溶性和體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)特性。
　　本論文以氯硝柳胺為原料，共設(shè)計(jì)合成了三大類(lèi)15個(gè)衍生物，其中羧酸類(lèi)衍生物7個(gè)，氨基類(lèi)衍生物4個(gè)，肟類(lèi)衍生物4個(gè)，有關(guān)化合