srGAP2 F-BAR結構域的結構生物學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、BAR結構域超家族蛋白通過誘導膜的內陷和突起在細胞經歷的多種多樣的過程中都發(fā)揮著重要的作用這些過程包括細胞器生物發(fā)生,細胞分裂,細胞迀移,分泌和內吞。BAR結構域超家族可以分為三個不同的亞家族:“classical”BARs/N-BARs, F-BARs(Fes/CIP4 homology-BAR)和 I-BARs(Inverse-BAR)。經典(Classical) BAR和F-BAR亞家族蛋白在網格蛋白介導的內吞作用中誘導膜的內陷,

2、而I-BAR亞家族蛋白Missing-in-metastasis(MIM)和IRSp53可以在體外和活細胞中誘導膜的突起,形成絲狀偽足(filopodia)。雖然srGAP2(slit-robo GTPase activating protein2)含有一個N端F-BAR結構域,卻能通過引起膜的突起來調控神經元的生長和迀移,這與I-BAR蛋白的功能存在相似之處。在本研究中,過表達srGAP2蛋白的F-BAR結構域,并進行純化和結晶。sr

3、GAP2 F-B A R結構域蛋白晶體X射線衍射得到的分辨率為3.50 A,所屬空間群為P21,這些結果有利于srGAP2 F-BAR結構域最終的結構解析并最終解釋其誘導膜突起而不是膜內陷的原因。本研究中還通過轉染HEK293T細胞獲得真核表達的Rab4,5,7,8,11;與原核表達的F-BAR-1-357和F-BAR-1-480蛋白(帶6xHisT a g)做N i柱pulldown,來探索R a b與F-B A R不同區(qū)段的結合性質

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