中國(guó)北方漢族人群MME基因rs6665與遲發(fā)型阿爾茨海默病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：本研究旨在探索與β淀粉樣蛋白（Aβ）降解密切相關(guān)的腦啡肽酶(NEP)基因(MME)的 miRNAs-187特異性靶向關(guān)聯(lián)序列中的一個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)（SNPs） rs6665與遲發(fā)型阿爾茨海默?。↙OAD）在中國(guó)北方漢族人群發(fā)病的具體關(guān)聯(lián)。
　　方法：通過(guò)大樣本病例對(duì)照研究，從包括青島大學(xué)附屬青島市立醫(yī)院在內(nèi)的山東省內(nèi)多家三級(jí)公立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科選取992例LOAD患者作為病例組，其中檢測(cè)信息缺失8例，共納入合格樣本984例，

2、從青島大學(xué)附屬青島市立醫(yī)院查體中心選取1358健康正常人作為對(duì)照組，其中信息缺失4例，實(shí)際納入了1354例，提取所有受試者外周血 DNA。通過(guò)生物信息學(xué)方法從多個(gè)公開(kāi)的生物學(xué)信息庫(kù)中在目前已報(bào)道的所有在AD腦內(nèi)差異表達(dá)的3’UTR miRNAs的靶基因中篩選出在中國(guó)北方漢族人群中常見(jiàn)的AD易感基因MME，并最終確定了3’UTR miRNAs-187的特異性靶向序列中的一個(gè)常見(jiàn)的單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)rs6665。并利用SNP scanTM多重

3、SNP分型技術(shù)獲取各個(gè) SNP位點(diǎn)的基因型。此外，我們還應(yīng)用等位基因特異性多重 PCR（Multi-ARMS）技術(shù)進(jìn)行了APOE基因分型。最后應(yīng)用SPSS19.0軟件，采取t檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)及Logistic回歸分析等方法對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，得到相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)值：P值，OR值及其95%可信區(qū)間等，進(jìn)而判斷此SNP位點(diǎn)與漢族人群LOAD發(fā)病的可能關(guān)系。
　　結(jié)果： MME基因的SNP位點(diǎn)rs6665基因型分析結(jié)果顯示等位基因“C

4、”為其最小頻率等位基因。通過(guò)卡方檢驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)LOAD組和對(duì)照組之間的rs6665基因型（P=0.003）和等位基因A/C（P=0.001）的分布差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中等位基因頻率分布的比值比OR=1.255,95％置信區(qū)間95％CI=1.102-1.429。此外，通過(guò)對(duì)兩組人群進(jìn)行APOEε4攜帶狀態(tài)分層以及卡方檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)：在兩種狀態(tài)APOEε4（+）和APOEε4（-）中，兩組間MME SNP rs6665的基因型分布均依然

5、存在較顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異：APOEε4（+）P＝0.014； APOEε4（-） P＝0.013。而兩組等位基因分布差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義：APOEε4（+） P＝0.597, APOEε4（-） P＝0.549。通過(guò)進(jìn)一步調(diào)整年齡，性別和APOEε4狀態(tài)等因素后的Logistic回歸分析，我們最終在三種基因型模型中均證實(shí)了兩組間MME基因的SNP rs6665的最小頻率等位基因“C”分布存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。并且均呈現(xiàn)除了增加LOAD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)

6、的結(jié)論屬性：顯性模型：P=0.003，OR=1.291,95％CI=1.092-1.526；隱性模型：P=0.030，OR=1.425,95％CI=1.035-1.961；疊加模型：P=0.001，OR=1.249,95％CI=1.093-1.427。此外,通過(guò)經(jīng)年齡、性別、基因型等因素調(diào)整后的Logistic回歸分析，我們還在顯性模型中發(fā)現(xiàn)了MME基因的SNP位點(diǎn) rs6665的最小頻率等位基因“C”與APOEε4等位基因在 LOAD

7、發(fā)病影響中存在顯著交互作用：P=0.035, OR=1.569,95%CI=1.031-2.386。通過(guò)對(duì)顯性模型進(jìn)行APOEε4狀態(tài)（APOEε4+/ APOEε4-）分層后，我們?cè)贏POEε4+組中發(fā)現(xiàn)了SNP位點(diǎn)rs6665的最小頻率等位基因“C”依然與LOAD的發(fā)病的存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)：P=0.002，OR=1.846,95％CI=1.264-2.697。
　　結(jié)論：我們的研究首次在中國(guó)北方漢族人群中證實(shí)了 MME基因中3