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簡(jiǎn)介:目的皮膚是人體最大的器官,具有高度復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和功能,有重要的屏障和保護(hù)作用,不僅能防止外界刺激損傷體內(nèi)的組織、阻擋異物和病原體侵入,而且可以阻止體液外滲和對(duì)外界物質(zhì)的吸收,還具有調(diào)節(jié)體溫、參與免疫應(yīng)答等作用。燒傷、創(chuàng)傷、糖尿病潰瘍、褥瘡等原因都會(huì)導(dǎo)致皮膚缺損或功能缺失,不僅造成患者肉體痛苦,也給患者造成心靈的創(chuàng)傷。各種原因造成的皮膚缺損,尤其是大面積燒傷患者常常因不能及時(shí)植皮、有效的修復(fù)創(chuàng)面而導(dǎo)致創(chuàng)面感染、體液丟失、臟器功能不全等與皮膚缺損相關(guān)的并發(fā)癥,甚至死亡。因此,臨床上需要盡快修復(fù)創(chuàng)面以減少機(jī)體損耗、維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定、防止微生物入侵,以預(yù)防并發(fā)癥的發(fā)生都非常重要。盡管大面積燒傷病人的治療已取得很大進(jìn)展,但如何早期覆蓋創(chuàng)面、迅速恢復(fù)皮膚的屏障功能一直因?yàn)槿狈线m的創(chuàng)面覆蓋物而成為治療中必須解決的最迫切的問題。因此,皮膚創(chuàng)面覆蓋物或組織工程皮膚受到了越來越多的重視。我們本研究的目的是構(gòu)建組織工程皮并對(duì)其生物安全性進(jìn)行初步的研究評(píng)價(jià)。方法1、組織工程皮的構(gòu)建無菌條件下取正常人體包皮或耳后皮膚,經(jīng)分離培養(yǎng)得到皮膚表皮角質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,將成纖維細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞同時(shí)接種在生物支架材料上,37℃,5%CO2培養(yǎng)10~14天經(jīng)活性檢測(cè)合格后即可使用。2、組織工程皮的生物安全性研究主要進(jìn)行了組織工程皮的皮膚刺激試驗(yàn)、致敏性試驗(yàn)、急性毒性試驗(yàn)、細(xì)胞毒性試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、植入試驗(yàn)以及熱原、支原體的檢查。其評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)進(jìn)行評(píng)定。結(jié)果1、組織工程皮的構(gòu)建角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)3~5天后并向四周擴(kuò)展,可增殖形成集落,成纖維細(xì)胞分散培養(yǎng)24H后,部分細(xì)胞鋪展成梭形,匯合成片后細(xì)胞呈梭形、束狀排列,也有部分呈不規(guī)則形,細(xì)胞間以細(xì)長(zhǎng)突起相互交聯(lián)。組織工程皮在培養(yǎng)10~14天后,具有表皮、真皮雙層結(jié)構(gòu),且具有細(xì)胞活性。2、組織工程皮的生物安全性研究組織工程皮的皮膚刺激試驗(yàn)原發(fā)刺激指數(shù)為025結(jié)論1、角質(zhì)形成細(xì)胞與成纖維細(xì)胞混合接種在生物載體膜上,經(jīng)培養(yǎng)后增殖分化,可以擴(kuò)大皮源,為大面積深度燒傷患者提供了皮源。利用組織工程技術(shù)構(gòu)建人工復(fù)合皮膚,可用于皮膚缺損者的治療,解決了自體供皮不足。2、構(gòu)建好的組織工程皮無毒性,無刺激性,生物安全性能良好,符合國(guó)家制定的醫(yī)療器械生物安全性標(biāo)準(zhǔn)。
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簡(jiǎn)介:第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文骨組織工程中一種轉(zhuǎn)基因生物緩釋體系的構(gòu)建RHBMP2和RHVEGF基因修飾ADSCS的可行性研究姓名楊在亮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)野戰(zhàn)外科學(xué)指導(dǎo)教師周繼紅20070501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文三個(gè)實(shí)驗(yàn)組A組轉(zhuǎn)染R11BMP一2和RHVEGF基因的ADSCS與脫細(xì)胞骨基質(zhì)材料ACBM復(fù)合而成的新型組織工程骨植入治療組;B組正常的ADSCS復(fù)合ACBM植入治療組;C組單純骨缺損未處理組。手術(shù)后第1、2、4、12周以X線以及第4周、12周取病理標(biāo)本進(jìn)行脫鈣骨組織切片染色觀察評(píng)價(jià)其成骨修復(fù)效果。結(jié)果脂肪組織通過改良酶消化法消化后獲得的細(xì)胞,經(jīng)過體外成骨和成脂誘導(dǎo)14天后,GOMORI改良鈣鈷染色、V0NKOSSA染色和油紅O染色結(jié)果均為陽性;波形蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果表明其為中胚層來源;且該細(xì)胞能在體外進(jìn)行大量的擴(kuò)增。由此可證明分離培養(yǎng)的細(xì)胞為ADSCS。傳代培養(yǎng)的ADSCS于第4~6代時(shí)生長(zhǎng)狀態(tài)趨于穩(wěn)定。細(xì)胞形態(tài)由多角形、圓形和不規(guī)則形,逐漸向成纖維細(xì)胞樣和梭形過渡。RHBMP2和RHVEGF轉(zhuǎn)染后ADSCS的群體倍增時(shí)間有所增加,但統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染對(duì)ADSCS的生長(zhǎng)增殖無明顯影響PO05。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞仍可具有擴(kuò)增能力。轉(zhuǎn)染后連續(xù)傳代三代的細(xì)胞中未有明顯的異常表型和增生。DLBMP2和RH、廠EGF轉(zhuǎn)染ADSCS后的RTPCR和SABC免疫細(xì)胞化學(xué)法結(jié)果均為陽性。顯示出D1BMP2和RHVEGF在轉(zhuǎn)染ADSCS后48小時(shí)和四周時(shí)在轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平都可表達(dá)BMP2和VEGF。動(dòng)物骨缺損修復(fù)實(shí)驗(yàn)中,前兩周內(nèi)三組動(dòng)物均未出現(xiàn)明顯的感染;連續(xù)X線觀察和骨切片顯示A組在術(shù)后第三月已完全修復(fù),且修復(fù)效果和進(jìn)程明顯優(yōu)于B組,C組缺損則主要由纖維結(jié)締充填,而僅在斷端兩側(cè)附近有少量成骨修復(fù)。結(jié)論改良酶消化法可有效地從脂肪組織獲得具有定向誘導(dǎo)分化的ADSCS。這些ADSCS在體外培養(yǎng)至4~6代時(shí)可獲得較穩(wěn)定狀態(tài)。ADSCS作為宿主細(xì)胞被轉(zhuǎn)染外源性D1BMP2和RHVEGF基因后未發(fā)生畸變及生長(zhǎng)增殖的明顯改變,轉(zhuǎn)染ADSCS后RLLBMP一2及RHVEGF基因可獲得四周內(nèi)穩(wěn)定的表達(dá)。說明RHBMP2和RHVEGF基因修飾的ADSCS可以作為攜帶了目的基因的種子細(xì)胞應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)研究,并且該緩釋體系構(gòu)建的新型組織工程骨是一種具有顯著成骨能力的骨缺損修復(fù)材料。關(guān)鍵詞ADSCS;DLBMP一2;RHVEGF;轉(zhuǎn)染;生物緩釋體系;組織工程骨;骨缺損;修復(fù)
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簡(jiǎn)介:1,3丙二醇1,3PD是一種重要的化工原料,它可作為化學(xué)和醫(yī)藥工業(yè)中多種潤(rùn)滑劑、有機(jī)溶劑和前體的合成原料。它最主要的用途是作為新型聚酯如PTT、聚醚和聚亞氨酯的單體。13PD的生產(chǎn)方法有化學(xué)法和生物轉(zhuǎn)化法。近年來,生物轉(zhuǎn)化法以其利用可再生資源、對(duì)環(huán)境友好等特點(diǎn)日益受到人們的重視。本論文以來源于克雷伯桿菌的甘油脫氫酶GDH和1,3丙二醇氧化還原酶PD催化合成13PD為目的,對(duì)酶的制備、酶促合成過程及無電荷超濾膜反應(yīng)器設(shè)計(jì)進(jìn)行了深入的研究,以期開辟一條生物法高效生產(chǎn)13PD的新途徑。有氧條件下,建立了細(xì)胞破碎和13PD代謝途徑中關(guān)鍵酶酶活力測(cè)定方法。通過應(yīng)用均勻設(shè)計(jì)、人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)和遺傳算法優(yōu)化培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件優(yōu)化,GDH、PD酶活力最終達(dá)到3700、3840UL,為后續(xù)催化合成反應(yīng)創(chuàng)造條件。在有氧條件下,采用離子交換層析和親和層析兩步法同時(shí)分離純化了GDH和PD,為酶法合成13PD提供酶源。克雷伯桿菌在含有鹽酸氨基脲和甘油的磷酸鹽緩沖液培養(yǎng)基中有氧發(fā)酵,可實(shí)現(xiàn)3羥基丙醛3HPA的轉(zhuǎn)化,為酶法合成13PD提供關(guān)鍵底物。建立同時(shí)測(cè)量甘油、3HPA和13PD、二羥基丙酮DHA的高效液相色譜分析方法。分別確定了GDH、PD酶促反應(yīng)機(jī)制為DEREDBIBI,建立其分批條件下動(dòng)力學(xué)模型。有氧分批條件下,伴隨輔酶Ⅰ再生,實(shí)現(xiàn)酶法合成13PD和DHA。構(gòu)建無電荷超濾膜反應(yīng)器,優(yōu)化輔酶截留條件,提高輔酶截留率。研究克雷伯桿菌NACSPDMDAAC微膠囊生產(chǎn)13PD。微膠囊細(xì)胞連續(xù)發(fā)酵10批,其生產(chǎn)能力為060GLH,是游離細(xì)胞的256倍。
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簡(jiǎn)介:組織工程是利用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法,研究和開發(fā)具有修復(fù)或改善人體組織或器官功能的新一代臨床應(yīng)用替代物,以用于替代組織或器官的一部分或全部功能。組織工程的典型方法是從組織中分離出種子細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)擴(kuò)增,然后,將擴(kuò)增的細(xì)胞種植于生物支架材料中,通過在體外培養(yǎng)擴(kuò)增形成新組織后植入患者的組織或器官病損部位,從而達(dá)到修復(fù)創(chuàng)傷和重建功能的目的。其中種子細(xì)胞和支架材料是組織工程最基本的要素,細(xì)胞種植于支架材料上構(gòu)建組織是組織工程技術(shù)的核心,也是形成組織工程化生物活性組織的關(guān)鍵所在。本研究應(yīng)用組織工程學(xué)的原理和方法,從大鼠皮膚中分離出具有穩(wěn)定生物學(xué)性狀的真皮成纖維細(xì)胞FIBROBLASTS,F(xiàn)BS;用本實(shí)驗(yàn)室提取的Ⅰ型膠原及殼聚糖制備出適于組織工程皮膚構(gòu)建的膠原殼聚糖海綿支架,并將FBS種植在該支架中進(jìn)行聯(lián)合培養(yǎng)來研究組織構(gòu)建過程中種子細(xì)胞與支架材料的相互作用,為組織工程皮膚制備技術(shù)的改進(jìn)和完善提供理論依據(jù)。本文主要研究結(jié)果如下1用DISPASEⅡ膠原酶聯(lián)合消化法進(jìn)行SD大鼠皮膚FBS的分離和培養(yǎng)。該方法獲得的FBS生長(zhǎng)迅速、增殖能力強(qiáng)、生物學(xué)性狀穩(wěn)定,適于構(gòu)建組織工程皮膚。2以膠原和殼聚糖為原料,戊二醛為交聯(lián)劑,采用冷凍干燥法制備出的膠原殼聚糖組織工程支架,孔隙率大于90%、平均孔徑大小為1165ΜM,具備一定的柔韌性和力學(xué)強(qiáng)度。細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)表明,該支架無細(xì)胞毒性,具有良好的細(xì)胞粘附性能。3將FBS種植于膠原殼聚糖組織工程支架中進(jìn)行聯(lián)合培養(yǎng),并對(duì)支架中細(xì)胞的生長(zhǎng)特性和生物學(xué)活性進(jìn)行檢測(cè)。用MTT實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡情況結(jié)果表明,F(xiàn)BS在支架中能夠緩慢而穩(wěn)定地增殖。用EILISA法檢測(cè)IL6的分泌情況發(fā)現(xiàn),該支架能促進(jìn)FBS細(xì)胞因子的分泌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,組織工程皮膚構(gòu)建過程中種子細(xì)胞與三維多孔支架間的相互作用類似于體內(nèi)正常組織中細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)間的動(dòng)態(tài)相互作用。以上各實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)對(duì)于人工細(xì)胞外基質(zhì)支架材料的改進(jìn)和體外人工組織器官構(gòu)建的改進(jìn)和完善具有重要的參考意義。
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簡(jiǎn)介:【目的】評(píng)價(jià)體外構(gòu)建組織工程化生物活性骨膜為骨移植替代物應(yīng)用與兔腰椎橫突間融合的效果。【方法】體外構(gòu)建組織工程化生物活性骨膜植入24只健康成年新西蘭大白兔腰椎橫突間,每只兔子取三個(gè)橫突間隙LEFTL456、RIGHTL456植入3種材料RIGHTL45植入誘導(dǎo)后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合豬小腸黏膜下層SISA組、RIGHTL56B組植入無細(xì)胞支架即單純SIS、LEFTL56植入自體髂骨C組。術(shù)后12W處死動(dòng)物進(jìn)行大體標(biāo)本、影像學(xué)、組織學(xué)觀察。【結(jié)果】大體標(biāo)本比較A、C兩組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均與B組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,影像學(xué)觀察A、C兩組上下橫突間可見明顯有骨小梁通過,B組未見骨密度影。A組Ⅰ型膠原、骨鈣素免疫組織化學(xué)染色強(qiáng)陽性,與C組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,B組未見陽性表達(dá)?!窘Y(jié)論】利用豬小腸黏膜下層SIS復(fù)合經(jīng)誘導(dǎo)后向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMSC體外構(gòu)建組織工程化生物活性骨膜是橫突間融合骨移植的良好替代物。【
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簡(jiǎn)介:細(xì)菌纖維素(BC)是由葡糖醋桿菌屬分泌的纖維素納米纖維,其內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)精細(xì)發(fā)達(dá)。因其具有獨(dú)特的多層次精細(xì)微納結(jié)構(gòu),故它對(duì)液體和氣體的透過率高,并且具有高結(jié)晶度、聚合度的特性以及良好的機(jī)械性能,同時(shí)吸水性和保水性能優(yōu)異,在濕態(tài)下可進(jìn)行原位加工成型。以上優(yōu)異的綜合性能使細(xì)菌纖維素應(yīng)用于特殊領(lǐng)域,尤其作為醫(yī)用支架材料。本文旨在描述利用細(xì)菌纖維素生成過程中葡糖醋桿菌運(yùn)動(dòng)的可控性,生物合成了平面、管式及圖案化的的細(xì)菌纖維素組織工程支架,并分析其理化性質(zhì),同時(shí)還通過細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了其生物相容性及生物安全性。綜上結(jié)果表明細(xì)菌纖維素作為生物醫(yī)用材料在組織工程領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。首先,使用葡糖醋桿菌作為細(xì)菌纖維素合成的功能菌種。利用葡糖醋桿菌好氧性的特性,采用錐形瓶、PDMS管式模具和圖案化瓊脂糖三種模具,通過對(duì)氧氣供應(yīng)、宏觀表觀外形和有序微觀結(jié)構(gòu)的控制,成功獲得了平面、管式及圖案化的納米纖維素材料。結(jié)果表明模板可有效調(diào)控葡糖醋桿菌分泌納米纖維素的方向和織態(tài)結(jié)構(gòu),并可原位合成復(fù)雜形狀的細(xì)菌纖維素材料。然后,我們進(jìn)一步分析了三種培養(yǎng)方式獲得的細(xì)菌纖維素的理化性質(zhì)。傅立葉紅外檢測(cè)的結(jié)果表明,合成的平面細(xì)菌纖維素有著CO、CH、OH等特征峰;X衍射結(jié)果得到16O和2275O的衍射特征峰,它們也代表了平面細(xì)菌纖維素的I型晶型結(jié)構(gòu);通過熱失重分析表明平面細(xì)菌纖維素在體內(nèi)37℃的環(huán)境中能保持足夠穩(wěn)定;力學(xué)測(cè)試證實(shí)管式細(xì)菌纖維素的彈性模量可達(dá)394±012MPA,與實(shí)體血管相當(dāng);此外,通過原子力顯微鏡(AFM)和掃描電鏡(SEM)得到的結(jié)果表明圖案化細(xì)菌纖維素纖維的取向具有誘導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)的趨向。最后,我們對(duì)以上三種培養(yǎng)方式的到的細(xì)菌纖維素進(jìn)行生物相容性分析。通過血液相容性測(cè)試,平面細(xì)菌纖維素的體外動(dòng)態(tài)凝血時(shí)間大于60分鐘,溶血率小于1%,可以初步判斷材料具有較佳的血液相容性;通過骨、血管、神經(jīng)和腸組織工程的種子細(xì)胞,在平面細(xì)菌纖維素(種植人脂肪干細(xì)胞)、管式細(xì)菌纖維素(種植人血管內(nèi)皮細(xì)胞、人血管平滑肌細(xì)胞和人血管成纖維細(xì)胞)和圖案化細(xì)菌纖維素(種植鼠腸道神經(jīng)元細(xì)胞和鼠腸道平滑肌細(xì)胞、鼠大腦神經(jīng)元細(xì)胞)上貼壁粘附生長(zhǎng)情況的CCK8增殖測(cè)試發(fā)現(xiàn)各類細(xì)胞可以在細(xì)菌纖維素表面完成完整的生長(zhǎng)周期。在對(duì)各類細(xì)胞的特異性染色觀察中,各類細(xì)胞標(biāo)志物均在細(xì)菌纖維素表面有陽性表現(xiàn),表明細(xì)菌纖維素對(duì)細(xì)胞的粘附、增殖和遷移有著一定的引導(dǎo)作用;另外,通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)細(xì)菌纖維素在動(dòng)物體內(nèi)不會(huì)引起動(dòng)物的免疫反應(yīng),且表現(xiàn)出對(duì)缺損器官良好的修復(fù)輔助性能?;诩?xì)菌纖維素的組織工程支架材料,通過模具可設(shè)計(jì)和制備不同形狀的材料,并可調(diào)控纖維素纖維的織態(tài)結(jié)構(gòu)。同時(shí)材料具有高結(jié)晶度,良好的熱穩(wěn)定性和機(jī)械性能,尤其是在細(xì)胞和個(gè)體的評(píng)價(jià)上,細(xì)菌纖維素展現(xiàn)出良好的生物相容性,作為一種新型生物醫(yī)用材料在組織工程領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。
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簡(jiǎn)介:本實(shí)驗(yàn)以犬大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞為種子細(xì)胞,對(duì)比研究膠原透明質(zhì)酸鈉復(fù)合膜、膠原殼聚糖復(fù)合膜的生物力學(xué)特性、微觀結(jié)構(gòu)、降解吸收時(shí)間和組織血液細(xì)胞相容性,并和本實(shí)驗(yàn)室前期實(shí)驗(yàn)篩選出的單純膠原膜、去細(xì)胞豬主動(dòng)脈瓣進(jìn)行了對(duì)比。希望篩選出新的具有良好生物相容性、足夠的生物力學(xué)特性、適合的降解時(shí)間、沒有毒性和或炎癥反應(yīng)的組織工程心臟瓣膜支架材料。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明膠原透明質(zhì)酸鈉復(fù)合膜、膠原膜和去細(xì)胞豬瓣在生物相容性方面適合組織工程心臟瓣膜支架材料的要求,但前二者的力學(xué)特性仍需進(jìn)一步加強(qiáng);膠原殼聚糖復(fù)合膜需要改進(jìn)或用于非血液內(nèi)植入的支架材料;大隱靜脈來源的細(xì)胞可以作為種子細(xì)胞。
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簡(jiǎn)介:ZS33S0RESTEARCHOFTOTALBIOLLZATLONOFTISSUEENGINEERINGVESSEL研究生學(xué)號(hào)103172研究生姓名馬良龍指導(dǎo)教師黃惠民教授指導(dǎo)小組成員朱德明教授張海波教授學(xué)科、專業(yè)小兒心胸外科關(guān)鍵詞內(nèi)皮祖細(xì)胞,脫細(xì)胞基質(zhì),組織工程血管資助基金項(xiàng)目上海市自然科學(xué)基金研究方向組織工程血管的構(gòu)建申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士培養(yǎng)單位上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院論文提交日期200604本學(xué)位論文屬于不保密口。請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”學(xué)日簽名㈨7日指導(dǎo)教師簽名童分氏日期‘年廣月‘夕日2
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簡(jiǎn)介:目的聚乙二醇/聚對(duì)苯二甲酸丁二醇酯PEG/PBT嵌段共聚物具有良好的機(jī)械性能和生物可降解性,具備作為組織工程支架材料的基本特征。本研究對(duì)某新型PEG/PBT膜進(jìn)行系列生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究,參照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織ISO頒布的生物材料評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)要求,評(píng)價(jià)其生物毒性、組織相容性和生物可降解性,為其在皮膚組織工程研究中的應(yīng)用提供生物學(xué)依據(jù)。方法1通過小鼠尾靜脈注射PEG/PBT膜的浸提液,進(jìn)行全身急性毒性實(shí)驗(yàn);2通過兔正常和損傷皮膚表面貼敷PEG/PBT膜,進(jìn)行皮膚原發(fā)刺激實(shí)驗(yàn);3將L929細(xì)胞接種于不同濃度的PEG/PBT膜浸提液,通過MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖率;4將PEG/PBT膜埋植于大鼠背部皮下,于術(shù)后3D、7D、14D、28D和2M取材,進(jìn)行宏觀觀察、光鏡觀察、透射電鏡及掃描電鏡觀察;5體外分離培養(yǎng)皮膚成纖維細(xì)胞,免疫組化鑒定,將第3代培養(yǎng)細(xì)胞與PEG/PBT膜共培養(yǎng)。結(jié)果1PEG/PBT膜的全身急性毒性實(shí)驗(yàn)、皮膚原發(fā)刺激實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果均為陰性;2PEG/PBT膜植入大鼠皮下對(duì)創(chuàng)口愈合過程未見影響;組織學(xué)觀察顯示,植入膜被纖維組組織包裹,無炎性排斥反應(yīng),愈合期間成纖維細(xì)胞活躍,偶見膜表面有成纖維細(xì)胞附著;動(dòng)態(tài)觀察顯示,術(shù)后3D植入膜的形態(tài)和結(jié)構(gòu)基本無變化,7D出現(xiàn)膜碎片,14D碎片邊緣見降解顆粒和多核巨細(xì)胞,至術(shù)后2M,支架呈碎屑狀,降解顆粒增多;3皮膚成纖維細(xì)胞與PEG/PBT膜共培養(yǎng),膜表面有細(xì)胞生長(zhǎng)。結(jié)論P(yáng)EG/PBT膜無生物毒性,作為生物材料應(yīng)用是安全的;PEG/PBT膜具有良好的生物相容性,在體內(nèi)可緩慢降解,具有成為皮膚組織工程支架材料的潛在應(yīng)用價(jià)值和前景。
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簡(jiǎn)介:該文以聚乳酸為基材分別以明膠和或殼聚糖對(duì)其表面修飾利用接觸角測(cè)試及光電子能譜分析了修飾膜表面親水性、表面結(jié)構(gòu)與元素組成的變化以牛關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)對(duì)修飾聚乳酸膜的細(xì)胞相容性進(jìn)行評(píng)價(jià)同時(shí)比較了偶聯(lián)法和截留法兩種修飾方法用基于生物材料的細(xì)胞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)CELLELISA定量測(cè)定軟骨細(xì)胞DNA合成過程中溴代尿苷的摻入和Ⅱ型膠原分泌量結(jié)果表明用明膠和殼聚糖以偶聯(lián)法或截留法對(duì)聚乳酸膜表面修飾均能提高軟骨細(xì)胞的貼附率促進(jìn)軟骨細(xì)胞的增殖增強(qiáng)細(xì)胞功能表達(dá)考察了粉防己堿對(duì)體外培養(yǎng)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明低濃度的粉防己堿可以促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖提高軟骨細(xì)胞活性和細(xì)胞功能表達(dá)制備了含有粉防己堿的聚乳酸膜和篩網(wǎng)支架在載藥聚乳酸材料上種植培養(yǎng)軟骨細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)、活性和組織學(xué)觀察結(jié)果表明載藥支架利于軟骨細(xì)胞的貼附、生長(zhǎng)和功能表達(dá)適合軟骨組織的修復(fù)重建依據(jù)GBT16886標(biāo)準(zhǔn)采用皮下埋置法對(duì)明膠修飾聚乳酸支架和含有防粉己堿的聚乳酸膜進(jìn)行生物相容性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明兩種材料都有很好的生物相容性
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簡(jiǎn)介:近年來,隨著脈沖功率技術(shù)的發(fā)展,亞納秒級(jí)甚至是皮秒級(jí)電場(chǎng)脈沖的產(chǎn)生得以實(shí)現(xiàn),使得超寬帶技術(shù)在國(guó)防軍事和國(guó)民經(jīng)濟(jì)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。在超寬帶技術(shù)的應(yīng)用中,超寬帶電場(chǎng)脈沖的輻射涉及到超寬帶脈沖輻射天線技術(shù),因?yàn)槌瑢拵щ妶?chǎng)脈沖具有極寬的帶寬,傳統(tǒng)天線不能夠滿足無失真輻射的要求,因此,用于超寬帶電場(chǎng)脈沖輻射和接收的超寬帶脈沖天線需要滿足在數(shù)十個(gè)倍頻程內(nèi)具有平坦的頻率響應(yīng)、較好的方向性、承受高峰值脈沖功率不被擊穿的能力和具有較小的時(shí)域旁瓣和后瓣等性能參數(shù)要求等。作為超寬帶系統(tǒng)的核心組成部分,超寬帶脈沖天線的性能決定了整個(gè)超寬帶系統(tǒng)的性能,因此,超寬帶脈沖天線的研究具有非常重要的意義。脈沖功率技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域的應(yīng)用主要分為生物醫(yī)療和生物成像,是電氣工程與生物醫(yī)學(xué)交叉學(xué)科領(lǐng)域的研究前沿和熱點(diǎn)。在生物醫(yī)療方面,已有的研究表明高強(qiáng)度皮秒電場(chǎng)脈沖靶向聚焦于腫瘤組織,可以在皮秒電場(chǎng)脈沖的作用下誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,從而實(shí)現(xiàn)腫瘤的無創(chuàng)治療。該方法與傳統(tǒng)的癌癥治療方法相比具有選擇性、靶向性且能夠有效處理腫瘤細(xì)胞等優(yōu)點(diǎn),而無創(chuàng)治療技術(shù)實(shí)現(xiàn)的關(guān)鍵就在于沖激脈沖輻射天線的合理設(shè)計(jì)和實(shí)現(xiàn),本文設(shè)計(jì)了一種可以用于無創(chuàng)治療的橢球型沖激脈沖輻射天線,尺寸大小約為120MM120MM105MM,根據(jù)數(shù)值仿真結(jié)果可知,該天線具有穩(wěn)定的方向圖特性,匹配阻抗為50歐姆,電壓駐波比在31106GHZ頻帶內(nèi)都小于2,增益穩(wěn)定。在此基礎(chǔ)上對(duì)該天線在生物工程中無創(chuàng)治療的實(shí)際情況進(jìn)行了進(jìn)一步分析,得出如果利用該天線將脈沖信號(hào)聚焦于生物體組織內(nèi)時(shí),由于電磁場(chǎng)折反射的存在,無法形成有效的聚焦;為了解決這一問題,本文提出了在橢球型沖激脈沖輻射天線內(nèi)部填充與生物組織相對(duì)介電常數(shù)相近的耦合介質(zhì)和使用分層介質(zhì)透鏡兩種方法以實(shí)現(xiàn)脈沖在生物組織內(nèi)的有效聚焦,并通過仿真進(jìn)行了驗(yàn)證;而生物成像技術(shù)也是目前超寬帶技術(shù)發(fā)展和研究的熱點(diǎn)之一,該技術(shù)能夠以非常直觀的方式向人們展示人體內(nèi)部結(jié)構(gòu)形態(tài)或功能,已經(jīng)成為疾病預(yù)防、臨床診斷和醫(yī)學(xué)研究中不可或缺的有效工具,具有非常廣闊的研究前景。與傳統(tǒng)的成像技術(shù)相比,微波成像技術(shù)具有成像精度高、使用費(fèi)用低、可重復(fù)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn),而微波成像技術(shù)的性能在一定程度上取決于用于收發(fā)窄電場(chǎng)脈沖的輻射天線和接收天線的性能。因此,本文設(shè)計(jì)了一種用于生物成像的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、工作原理簡(jiǎn)單、成本低且性能優(yōu)秀的新型超寬帶脈沖天線VALENTINE天線,這是一種行波天線,工作于300MHZ3GHZ,在數(shù)值分析軟件中的VALENTINE天線的時(shí)域特性進(jìn)行了仿真分析;同時(shí)根據(jù)該天線在實(shí)際應(yīng)用中的饋電需要,設(shè)計(jì)了一種能夠使其滿足TEM同軸電纜饋電需要的轉(zhuǎn)接頭結(jié)構(gòu),并在轉(zhuǎn)接頭與VALENTINE天線匹配的情況下對(duì)該結(jié)構(gòu)進(jìn)行了仿真分析,驗(yàn)證了其匹配后的性能方向圖、增益和VSWR能夠滿足設(shè)計(jì)需要。
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