簡介：生物化學(xué)名詞解釋比賽,比賽規(guī)則,共三輪每輪每個班派一個組參加每個組回答三個名詞解釋回答期間不得看書，其他同學(xué)可以提示，務(wù)必回答完整為止最后累積回答正確且花時間最多的班級獲勝,練習(xí),人體必需氨基酸（ESSENTIALAMINOACID）指人自己不能合成，需要從食物中獲得的八種氨基酸甲硫氨酸，色氨酸，賴氨酸，纈氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸,第一輪,,第一組,PI蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)變性,,PI等電點(diǎn)（,ISOELECTRICPOINT）使兩性分子如氨基酸，蛋白質(zhì)，核酸所帶靜電為零，在電場中不遷移的PH值,,蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)指蛋白質(zhì)中共價連接的氨基酸殘基的排列順序蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)決定了其空間結(jié)構(gòu)。,,蛋白質(zhì)變性（DENATURATION）蛋白質(zhì)在受到理化因素作用（光照，熱，有機(jī)溶濟(jì)以及一些變性劑），次級鍵受到破壞，導(dǎo)致天然構(gòu)象的破壞，使蛋白質(zhì)的生物活性喪失。,第二組,茚三酮反應(yīng)蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)肽平面,,茚三酮反應(yīng)在加熱和弱酸條件下，氨基酸，肽或蛋白質(zhì)與茚三酮反應(yīng)生成紫色（與脯氨酸反應(yīng)生成黃色）化合物的反應(yīng)。,,蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)在蛋白質(zhì)分子中主鏈上氨基酸殘基空間排布關(guān)系。二級結(jié)構(gòu)是通過骨架上的羰基和酰胺基團(tuán)之間形成的氫鍵維持的常見的有二級結(jié)構(gòu)有Α螺旋和Β折疊,,肽平面肽鍵相關(guān)的六個原子組成一個平面單位參于肽鍵羰基上的碳和氧原子，酰胺上的氮和氫原子和兩個相鄰Α碳原子組成是二級結(jié)構(gòu)的組成單位,第三組,Α螺旋蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)人體非必需氨基酸,,Α螺旋蛋白質(zhì)中常見的二級結(jié)構(gòu)，肽鏈主鏈繞假想的中心軸盤繞成螺旋狀，一般都是右手螺旋結(jié)構(gòu)，螺旋是靠鏈內(nèi)氫鍵維持的每個氨基酸殘基（第N個）的羰基與多肽鏈C端方向的第4個殘基（第4N個）的酰胺氮形成氫鍵多為右手螺旋，Α螺旋結(jié)構(gòu)中，螺距為054NM，每一圈含有36個氨基酸殘基，每個殘基沿著螺旋的長軸上升015NM,,蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)（PROTEINTERTIARYSTRUCTURE）三級結(jié)構(gòu)是在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步盤繞，折疊形成的球狀空間構(gòu)象三級結(jié)構(gòu)靠氨基酸側(cè)鏈之間的疏水相互作用，氫鍵，范德華力，鹽鍵和二硫鍵維持,第二輪,,第一組,蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)波爾效應(yīng)酶的比活,,蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)（PROTEINQUATERNARYSTRUCTURE）組成寡聚蛋白的亞基種類，數(shù)目和空間排列關(guān)系三級結(jié)構(gòu)靠氨基酸側(cè)鏈之間的疏水相互作用，氫鍵，范德華力，鹽鍵和二硫鍵維持,,波爾效應(yīng)（BOHREFFECT）CO2濃度的增加降低細(xì)胞內(nèi)的PH，引起紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白氧親和力下降的現(xiàn)象酶的比活每毫克蛋白質(zhì)具有的酶活力，可以表示酶的純度。,第二組,酶酶的活性中心KM,,酶是高效率、高度專一性、活性可調(diào)節(jié)的高分子生物催化劑。酶的活性中心指酶分子中少數(shù)特異氨基酸殘基構(gòu)成的底物結(jié)合，催化直接有關(guān)的部位,,KM又稱米氏常數(shù)，是酶特征性常數(shù)對于一個給定的反應(yīng)，達(dá)到酶促反應(yīng)的達(dá)到最大反應(yīng)速度（VMAX）一半時所對應(yīng)的底物濃度。,第三組,酶活酶的IU酶的競爭性抑制劑,,酶活酶催化化學(xué)反應(yīng)的能力，指單位時間秒、分、小時內(nèi)反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量酶的IU酶的國際單位，是指測量的最適條件（指最適PH、溫度等）下，1分鐘內(nèi)能引起1微摩爾底物轉(zhuǎn)化的酶量1?MOL/MIN1IU即反應(yīng)速度為1?MOL/MIN時，酶催化能力就是1IU,,酶的競爭性抑制劑競爭性抑制劑與底物結(jié)構(gòu)相似，通常與正常的底物或配體競爭酶的活性中心使KM增大而VMAX不變通過增加底物濃度可以消除這種抑制作用,第三輪,,第一組,DNA的變性TRNA核小體,,DNA的變性在物理、化學(xué)因素影響下，DNA堿基對間的氫鍵斷裂，雙螺旋解開，分離成兩條互補(bǔ)的單鏈，伴有A260增加（增色效應(yīng)）,DNA的功能喪失TRNA轉(zhuǎn)移核糖核酸一類攜帶激活氨基酸，將它帶到蛋白質(zhì)合成部位并將氨基酸整合到生長著的肽鏈上RNA。TRNA含有能識別模板MRNA上互補(bǔ)密碼的反密碼子環(huán)和攜帶活化氨基酸的氨基酸臂,,核小體是染色質(zhì)或染色體的基本單位核心H2A，H2B，H3和H4各兩分子構(gòu)成核小體的核心，稱為組蛋白八聚體DNA雙螺旋分子纏繞在八聚體上構(gòu)成核小體的核心顆粒連接區(qū)核小體的核心顆粒之間再由DNA和組蛋白H1構(gòu)成的連接區(qū)連接起來形成串珠狀結(jié)構(gòu)。,第二組,TMDNA的二級結(jié)構(gòu)MRNA,,TMDNA分子的熔點(diǎn)（TM）增色效應(yīng)達(dá)到最大值的50時的溫度稱為DNA分子的熔點(diǎn)。用TM表示。當(dāng)DNA溶液的溫度達(dá)到TM時，已經(jīng)有50％的DNA處于解鏈狀態(tài)。,,DNA的二級結(jié)構(gòu)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)，具有A，B，Z等多種構(gòu)象其中B型最多見，為右手雙螺旋結(jié)構(gòu)，是兩條反向平行互補(bǔ)的脫氧核苷酸鏈組成的雙螺旋信使核糖核酸MRNA,MESSENGERRIBONUCLEICACID一類用作蛋白質(zhì)合成模板的RNA,第三組,DNA的復(fù)性減色效應(yīng)DNA的一級結(jié)構(gòu),DNA的復(fù)性在一定條件下，變性DNA單鏈間堿基重新配對恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)，伴有A260減?。p色效應(yīng)）,DNA的功能恢復(fù)。一定條件往往指的是緩慢冷卻減色效應(yīng)（HYPOCHROMICEFFECT）隨著DNA復(fù)性，紫外吸收降低的現(xiàn)象,,DNA的一級結(jié)構(gòu)脫氧核糖核苷酸的排列順序，通過磷酸二酯鍵連接。,

簡介：APOPTOSIS細(xì)胞凋亡研究方法建立與評價,蔣紀(jì)愷,研究生,研究方向研究立題（研究背景、發(fā)現(xiàn)問題、提出問題（）、提出假設(shè)、解決問題的策略與方法）申請課題，獲得經(jīng)費(fèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證（實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、技術(shù)指標(biāo)、方法建立與評價）結(jié)果分析（撰寫論文，申報專利，評獎）,,研究方向白血病研究立題腫瘤靶向治療的分子機(jī)制研究。文獻(xiàn)閱讀與學(xué)習(xí)。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在白血病發(fā)生與治療的背景知識研究模型白血病細(xì)胞株；動物模型等技術(shù)平臺實(shí)驗(yàn)技術(shù)的建立與評價，（技術(shù)指標(biāo)，動手能力）結(jié)果分析統(tǒng)計學(xué)知識，文獻(xiàn)回顧論文撰寫語言能力,研究背景,腫瘤治療手術(shù)放療化療骨髓移植（白血?。?增殖分化凋亡SURVIVALGROWTHDIFFERETIATIONAPOPTOSIS腫瘤TUMOUR,,,,,,立題依據(jù),增殖細(xì)胞通過分裂使細(xì)胞數(shù)目增加的過程，細(xì)胞分裂。（真核細(xì)胞的增殖方式有有絲分裂、減數(shù)分裂、無絲分裂三種方式，只有連續(xù)進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞才具有細(xì)胞周期。）分化在個體發(fā)育中，通過細(xì)胞分裂后產(chǎn)生的子代細(xì)胞比上一代細(xì)胞具有更專一的功能。后代在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生穩(wěn)定性的差異過程稱為細(xì)胞分化（CELLULARDIFFERENTIATION）。（比如血液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板等都是從造血干細(xì)胞分化出來的，但是與造血干細(xì)胞相比，這些子代細(xì)胞都具有更加專一的功能。）凋亡細(xì)胞凋亡指的細(xì)胞的程序性死亡，細(xì)胞被自身的酶降解，按一定的步驟“自殺”，其死亡細(xì)胞仍為一整體，最終被白細(xì)胞吞噬。（而細(xì)胞壞死會有細(xì)胞壁破裂的現(xiàn)象，內(nèi)含物外泄，會影響周圍的細(xì)胞。）,,,,啟動凋亡早期凋亡中期凋亡晚期,CASPASE激活,★核染色質(zhì)凝縮★細(xì)胞膜PS外翻★線粒體膜電位喪失★DNA被切割成片段,凋亡小體形成,信號通路,,研究模型,慢性粒細(xì)胞白血?。–HRONICMYELOGENOUSLEUKEMIA，CML）逆轉(zhuǎn)K562CELLLINE分化（紅系細(xì)胞）增殖凋亡藥物誘導(dǎo),,,,,LEUKEMIACELLLINES,K562CELLSABCRABLPOSITIVEERYTHROLEUKAMIALINEDERIVEDFROMA53YEAROLDFEMALECMLPATIENTINBLASTCRISISPHILADELPHIACHROMOSOME,,LEUKEMIACELLLINES,HL60HUMANPROMYELOCYTICLEUKEMIACELLSDERIVEDFROMA36YEAROLDWOMANWITHACUTEPROMYELOCYTICLEUKEMIAATTHENATIONALCANCERINSTITUTE,,研究方法建立與評價,靈敏度特異性蛋白質(zhì)分析1，染色2，酶3，免疫分泌蛋白、膜蛋白、細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核蛋白,方法學(xué)建立與研究策略,藥物濃度的選擇（MTT）形態(tài)學(xué)觀察（凋亡小體形成）DNA被切割成片段細(xì)胞膜PS外翻CASPASE激活信號通路,MTT測定細(xì)胞增殖,MTT法（四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法）是MOSMANN1983年報告的。原理是活細(xì)胞內(nèi)線粒體脫氫酶能將四氮唑化物（MTT）由黃色還原為紫紅（蘭）色的甲（肷）紫,后者溶于有機(jī)溶劑（如二甲基亞楓、酸化異丙醇等）,甲紫（肷）產(chǎn)量與細(xì)胞活性成正比?？稍?60NM處用酶標(biāo)儀測定其OD值。,形態(tài)學(xué)觀察,DNA被切割成片段,ANNEXINV,基本原理細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面，目前早期識別仍有困難。這些細(xì)胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸（PS）從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外，使PS暴露在細(xì)胞膜外表面。PS是一種帶負(fù)電荷的磷脂，正常主要存在于細(xì)胞膜的內(nèi)面，在細(xì)胞發(fā)生凋亡時細(xì)胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細(xì)胞膜外。ANNEXINV是一種CA依賴的磷脂結(jié)合蛋白，最初發(fā)現(xiàn)是一種具有很強(qiáng)的抗凝血特性的血管蛋白，ANNEXINV具有易于結(jié)合到磷脂類如PS的特性。對PS有高度的親和性。因此，該蛋白可充當(dāng)一敏感的探針檢測暴露在細(xì)胞膜表面的PS。PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所獨(dú)特的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的，而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就破壞了。因此，可以建立一種用ANNEXINV結(jié)合在細(xì)胞膜表面作為凋亡的指示并結(jié)合一種染料排除試驗(yàn)以檢測細(xì)胞膜的完整性的檢測方法。,細(xì)胞膜PS外翻,GOSSYPOL（24H）,,,個體化靶向治療,DEFICIENCY,,CHINESEHERBALMEDICINEINCHAOSHANAREA,

簡介：COMPARATIVEGENOMICSANDTHEEVOLUTIONOFPROKARYOTES,崔仕超（10708040）,主要內(nèi)容,基因組學(xué)分子進(jìn)化的新紀(jì)元原核生物基因組基因譜系的進(jìn)化HGT和基因系統(tǒng)的進(jìn)化系統(tǒng)發(fā)育和HGT所面臨的問題結(jié)語和展望,基因組學(xué)分子進(jìn)化的新紀(jì)元,原核生物的在進(jìn)化研究中的優(yōu)勢基因組學(xué)為微觀進(jìn)化和宏觀進(jìn)化中所研究的遺傳物質(zhì)提供了非常豐富的信息利用比較基因組學(xué)的方法將這些信息進(jìn)行整合總結(jié),原核生物基因組,原核生物基因復(fù)制和進(jìn)化前導(dǎo)鏈和滯后鏈起始位點(diǎn)和終止位點(diǎn)（圖）原核生物基因組的多樣性開放宏基因組封閉宏基因組HGT（水平基因轉(zhuǎn)移）（圖）,基因譜系的進(jìn)化,基因譜系多樣性基因的獲得和缺矢假基因移碼和置換（圖）新基因的進(jìn)化HGT對基因譜系中突變的貢獻(xiàn)1520％ORF（開放閱讀框）富集HGT變形菌門和硬壁菌門的ORF與噬菌體中的序列有更高的同源性,HGT和基因系統(tǒng)的進(jìn)化,TEICHMANN和MADANBABU的進(jìn)化模型在調(diào)控的基因中有的45％的進(jìn)化是由于復(fù)制和相互作用的遺傳所導(dǎo)致的當(dāng)前觀點(diǎn)原核生物的基因通過HGT將周圍的功能基因的加入來進(jìn)行進(jìn)化，而周圍的功能則直接和與其相互作用的周圍的環(huán)境有關(guān)。功能基因?qū)?xì)胞內(nèi)復(fù)雜的系統(tǒng)的適應(yīng)TFS比基因又相對低的保守性,系統(tǒng)發(fā)育和HGT的問題,基因進(jìn)化樹物種進(jìn)化樹基因進(jìn)化樹與物種進(jìn)化樹的不一致HGT,結(jié)論和展望,組織形成,THANKYOU,,,,開放閱讀框如果一個閱讀框在起始密碼子后有50個以上的連續(xù)密碼子無終止密碼子，那么稱這段順序?yàn)殚_放閱讀框。長的開放閱讀框是為某個蛋白編碼的基因。一個相對分子質(zhì)量為60000的蛋白質(zhì)編碼不間斷的基因需要有一個含有500或更多的密碼子的開放閱讀框,,基因樹與物種樹的區(qū)別,當(dāng)一個分子系統(tǒng)樹是根據(jù)某一基因數(shù)據(jù)構(gòu)建而來時，就稱為基因樹。物種樹則是指代表了一組物種進(jìn)化過程的系統(tǒng)樹（NEI1987）?；驑渑c物種樹可能存在兩方面的區(qū)別。①對于某一被研究的基因，可能存在種內(nèi)的多態(tài)性。換言之，在物種分化之前，該基因可能已開始分化。因此，兩物種間該基因的分化時間可能早于這兩個物種的分化時間。由這一基因計算而來的分枝長度（分枝時間）可能偏高。對于較長時間的進(jìn)化過程而言，因種內(nèi)多態(tài)性導(dǎo)致的這種誤差可以忽略不計。但是，對于新分化的物種，這種誤差的影響可能很大。②基因樹的分枝情況（拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)）可能不同于物種樹的。這種情況一般發(fā)生在分枝點(diǎn)非常接近的物種間。人、猩猩和大猩猩間的關(guān)系可能是較為典型的例子。這是因?yàn)镈NA突變是隨機(jī)過程，在有限的序列內(nèi)可能存在著統(tǒng)計學(xué)上的偏差。通過增加DNA序列的長度并測定多個相互獨(dú)立的基因片段，一般可以避免這種問題的發(fā)生。,無乳鏈球菌STREPTOCOCCUSAGALACTIAEHALOQUADRATUMWALSBYI噬鹽古細(xì)菌芽孢桿菌目BACILLALESLACTOBACILLALE乳桿菌BACILLUSANTHRACIS（炭疽桿菌）XENOLOG異同源物由某一個水平基因轉(zhuǎn)移事件而得到的同源序列EXCISION切除刪除,

簡介：葉酸和葉酸輔酶,食工1602班四組,葉酸（FOLICACID）也叫維生素B9、維生素M，是一種水溶性維生素。葉酸（FOLICACID）維生素B復(fù)合體之一，相當(dāng)于蝶酰谷氨酸，是米切爾（H．K．MITCHELL，1941）從菠菜葉中提取純化的，故而命名為葉酸。有促進(jìn)骨髓中幼細(xì)胞成熟的作用，人類如缺乏葉酸可引起巨紅細(xì)胞性貧血以及白細(xì)胞減少癥，對孕婦尤其重要。綠葉蔬菜中含量豐富,葉酸的物理特性,葉酸為鮮黃色的結(jié)晶狀粉末，微溶于熱水，不溶于乙醇、乙醚及其他有機(jī)溶劑，但葉酸的鈉鹽易溶解于水，但在水溶液中易被光解破壞；在酸性溶液中不穩(wěn)定，PＨ＜４易破壞，但在中性或堿性溶液中對熱穩(wěn)定，加熱至100℃１H也不被破壞。食物中葉酸的烹調(diào)損失率為50～90。,對孕婦尤其重要,葉酸,生理功能在體內(nèi)的活性形式為四氫葉酸，在體內(nèi)許多重要的生物合成中作為一碳單位的載體發(fā)揮重要功能。可通過腺嘌呤、胸酐酸影響DNA和RNA的合成；可通過蛋氨酸代謝影響磷脂、肌酸、神經(jīng)介質(zhì)的合成等。缺乏人體缺少葉酸可導(dǎo)致紅血球的異常，未成熟細(xì)胞的增加，貧血以及白血球減少。葉酸是胎兒生長發(fā)育不可缺少的營養(yǎng)素。孕婦缺乏葉酸有可能導(dǎo)致胎兒出生時出現(xiàn)低體重、唇腭裂、心臟缺陷等。如果在懷孕頭3個月內(nèi)缺乏葉酸，可引起胎兒神經(jīng)管發(fā)育缺陷，而導(dǎo)致畸形。,葉酸的缺乏癥,①巨幼紅細(xì)胞貧血紅細(xì)胞比正常大而少，并且發(fā)育不全。這種貧血是由于核蛋白形成不足，使骨髓中的核巨紅細(xì)胞（幼稚型紅細(xì)胞）不能成熟。②孕婦缺乏葉酸使先兆子癇、胎盤早剝的發(fā)生率增高；如在懷孕頭3個月內(nèi)缺乏葉酸，可導(dǎo)致胎兒神經(jīng)管發(fā)育缺陷，從而增加裂腦兒，無腦兒的發(fā)生率。其次，孕婦經(jīng)常補(bǔ)充葉酸，可防止新生兒體重過輕、早產(chǎn)以及先天性畸形。,攝入不足、酗酒、某些口服藥等干擾葉酸的吸收和代謝，導(dǎo)致葉酸缺乏。,葉酸與葉酸輔酶的結(jié)構(gòu)式,葉酸分子由2氨基4羥基6甲基喋啶、對氨基甲苯酸與L谷氨酸連接而成的。,葉酸在生物體中的活性形式為其加氫的還原產(chǎn)物5,6,7,8四氫氨酸（葉酸輔酶、FH4）,葉酸輔酶,四氫葉酸是一碳基團(tuán)轉(zhuǎn)移酶的輔酶，具有傳遞一碳基團(tuán)的作用，是許多生物合成反應(yīng)所必需的輔酶，其分子中的N5和N10是結(jié)合一碳基團(tuán)的部位。四氫葉酸（THF）是一種還原型葉酸，亦稱輔酶F，是輔酶形式的葉酸的母體化合物。當(dāng)葉酸缺乏或某些藥物抑制了葉酸還原酶，使葉酸不能轉(zhuǎn)變?yōu)樗臍淙~酸，都可影響血細(xì)胞的發(fā)育和成熟，造成巨幼紅細(xì)胞性貧血。,葉酸輔酶,四氫葉酸是體內(nèi)一碳單位轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)中的輔酶，是由葉酸在維生素C和NADH存在下，經(jīng)葉酸還原酶作用下生成二氫葉酸，然后由二氫葉酸還原酶催化生成四氫葉酸。,四氫葉酸的生成,判斷,四氫葉酸是一碳基團(tuán)轉(zhuǎn)移酶的輔酶，具有傳遞一碳基團(tuán)的作用，是許多生物合成反應(yīng)所必需的輔酶,有促進(jìn)骨髓中幼細(xì)胞成熟的作用，人類如缺乏葉酸可引起巨紅細(xì)胞性貧血以及白細(xì)胞減少癥，對孕婦尤其重要。,維生素B12和B12輔酶,維生素B12又叫氰鈷胺素、抗惡性貧血維生素，是唯一含金屬元素的維生素。自然界中的維生素B12都是微生物合成的，高等動植物不能制造維生素B12。維生素B12是唯一的一種需要一種腸道分泌物（內(nèi)因子）幫助才能被吸收的維生素。1948年才從肝臟中分離出一種具有控制惡性貧血效果的紅色晶體物質(zhì)，定名為維生素B12、維生素Ｂ12。是Ｂ族維生素中迄今為止發(fā)現(xiàn)最晚的一種,維生素B12的物理特性,深紅色結(jié)晶體，熔點(diǎn)高320℃時不熔，無臭無味，溶于水、乙醇和丙酮，不溶于氯仿、丙酮和乙醚；結(jié)構(gòu)性質(zhì)相當(dāng)穩(wěn)定；耐熱、酸、堿，日光、氧化劑和還原劑均能使其破壞。,維生素B12,生理功能以輔酶形式參與各種代謝過程，促進(jìn)甲基的形成和轉(zhuǎn)移，參與某些化合物的異構(gòu)化作用、維持SH基的還原狀態(tài)，促進(jìn)DNA和蛋白質(zhì)的合成促進(jìn)細(xì)胞的成熟，維持神經(jīng)組織的正常功能，臨床上可用于治療惡性貧血。,缺乏圖為小雞缺乏B12的癥狀，可以看到腳爪有明顯的畸形。巨紅細(xì)胞貧血。神經(jīng)系統(tǒng)損害。四肢僵硬、易受刺激、困倦、精神不振等,維生素Ｂ12缺乏癥,缺乏維生素B12可能影響到體內(nèi)的所有細(xì)胞，對細(xì)胞分裂快的組織影響最為嚴(yán)重，如影響骨髓的生血組織可產(chǎn)生巨幼紅細(xì)胞性貧血，即所謂惡性貧血；神經(jīng)系統(tǒng)的損害主要是引起斑狀、彌漫性的神經(jīng)脫髓鞘，出現(xiàn)精神抑郁、記憶力下降、四肢震顫等神經(jīng)癥狀；維生素Ｂ12缺乏還可引起同型半胱氨酸血癥，血清中積累的同型半胱氨酸具有神經(jīng)毒和血管毒，可促使心臟病發(fā)作、栓塞性腦卒中和周圍血管阻塞,維生素B12缺乏導(dǎo)致惡性貧血,維生素B12,5脫氧腺苷鈷胺,5’脫氧腺苷鈷胺素和甲基鈷胺素是維生素B12的輔酶形式,甲基鈷胺素,B12核心結(jié)構(gòu)為一個類似血紅素卟啉環(huán)的鈷啉環(huán)結(jié)構(gòu)，其中心為一個鈷離子。,輔酶B12參與的重排反應(yīng),輔酶B12在生物體中參與最多的酶催化反應(yīng)還是重排反應(yīng)；取代基X與相鄰碳原子之間進(jìn)行交換；,,輔酶B12參與的甲基轉(zhuǎn)移反應(yīng),生物體系中，一種重要的酶催化反應(yīng)需要在輔酶B12類似物甲基鈷胺素的存在下才能完成，這就是甲基轉(zhuǎn)移反應(yīng)，催化這種反應(yīng)的酶稱之為甲基轉(zhuǎn)移。代表性酶METHIONINESYNTHETASE（蛋氨酸合成酶）,蛋氨酸合成酶,輔酶B12參與的氧化還原反應(yīng),在該酶的作用下，核糖體核苷被還原為2’脫氧核糖核苷，這是生物合成DNA的速度決定步驟。（在某些細(xì)菌中）,判斷,（1）B12輔酶和維生素B12是同一種物質(zhì)。,（2）與葉酸配合的是維生素B12。,錯、維生素B12的功能是作為輔酶，但維生素B12在體內(nèi)是無活性的，需轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘妮o酶形式，即輔酶B12,錯、輔酶形式，B12作為四氫葉酸轉(zhuǎn)甲基酶的輔酶,維生素和輔酶的關(guān)系,維生素既不是構(gòu)成組織細(xì)胞的原料，也不是體內(nèi)能源物質(zhì)。很多維生素是在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成輔酶或輔基，參與物質(zhì)的代謝調(diào)節(jié)。所有B族維生素都是以輔酶或輔基的形式發(fā)生作用的，但是輔酶或輔基則不一定都是由維生素組成的，如細(xì)胞色素氧化酶的輔基為鐵卟啉，輔酶Q不是維生素等。,謝謝,

簡介：第四章維生素與輔酶,第一節(jié)、維生素概論一、維生素維生素是機(jī)體維持正常生命活動所必不可少的一類有機(jī)物質(zhì)。二、維生素的分類一般習(xí)慣分為脂溶性和水溶性兩大類。,VITAMIN,三、維生素的研究歷史,唐代孫思邈用肝治夜盲癥，用谷皮治腳氣病。1897年荷蘭醫(yī)生CEIJKMAN證明米糠可治腳氣病。1906年英國的FGHOPKINS發(fā)現(xiàn)大鼠喂飼純化飼料（包括蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、和礦質(zhì)）和水，不能存活；添加微量牛奶就能正常生長。牛奶中存在的營養(yǎng)輔助因素也就是維生素。他們兩人因發(fā)現(xiàn)維生素而獲諾貝爾獎。,四、維生素的功能,維生素對生物并非供能或組成生物體的結(jié)構(gòu)成分，但確為代謝過程所必需，多作為輔酶或輔基的功能、或影響酶的活性、或影響一些特殊的生理功能影響到正常代謝而影響正常生命活動和生長發(fā)育。嚴(yán)重缺乏時會引發(fā)病變。脂溶性維生素在體內(nèi)可直接參與代謝的調(diào)節(jié)作用。水溶性維生素是通過轉(zhuǎn)變成輔酶在代謝過程中起原子、電子、基團(tuán)的載體，調(diào)節(jié)代謝。,返回,第二節(jié)、脂溶性維生素,一、維生素A,維生素A分A1,A2兩種，是不飽和一元醇類。維生素A1又稱為視黃醇，A2稱為脫氫視黃醇。,維生素A的功能和缺乏癥,維生素A的功能是視紫紅質(zhì)的組分，與動物感受弱光有關(guān)主要存在于魚的肝臟,維生素A的缺乏癥夜盲癥,二、維生素D,維生素D是固醇類化合物，主要有D2,D3,D4,D5。其中D2,D3活性最高。,維生素D的結(jié)構(gòu),在生物體內(nèi)，D2和D3本身不具有生物活性。它們在肝臟和腎臟中進(jìn)行羥化后，形成1，25二羥基維生素D。其中1，25二羥基維生素D3是生物活性最強(qiáng)的。,維生素D的功能和缺乏癥,維生素D的功能調(diào)節(jié)鈣和磷的吸收及代謝，并促進(jìn)成骨作用，具抗佝僂病和抗軟骨病的作用。魚油、肝、蛋類等動物性食物是VITD的主要來源。,維生素D缺乏癥軟骨病佝僂病,維生素D缺乏癥,VITAMINS,三、維生素E,又叫做生育酚，目前發(fā)現(xiàn)的有6種，其中?，?，?，?四種有生理活性。,維生素E的功能和缺乏癥,維生素E的功能為油狀物，紫外光及氧化劑可使其失活，無氧條件下耐熱。因易氧化可用于保護(hù)其他物質(zhì)不被氧化，常被用于保護(hù)脂肪和VITA不被氧化；保護(hù)生物膜，增加細(xì)胞對廢氣的抵抗力，使細(xì)胞免受損傷和癌變；對生育功能重要，臨床用于防治流產(chǎn)及早產(chǎn)。,維生素E缺乏癥人類尚未發(fā)現(xiàn)典型的缺乏癥,四、維生素K,維生素K有3種，K1,K2,K3。其中K3是人工合成的。維生素K是2甲基萘醌的衍生物。,維生素K的功能和缺乏癥,維生素K的功能與凝血作用有關(guān)，具抗出血不凝作用，主要功能是加速血液凝固、促進(jìn)肝臟合成凝血酶原所必需的因子、參與體內(nèi)氧化還原反應(yīng)（是呼吸鏈的一部分，參與電子傳遞和氧化磷酸化）。肝、魚、肉、蔬菜等都富含VITK。,維生素K缺乏癥成人一般不易缺乏新生兒及膽管阻塞患者。,返回,第三節(jié)水溶性維生素與輔酶,某些小分子有機(jī)化合物與酶蛋白結(jié)合在一起并協(xié)同實(shí)施催化作用，這類分子被稱為輔酶（或輔基）。輔酶是一類具有特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)和功能的化合物。參與的酶促反應(yīng)主要為氧化還原反應(yīng)或基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng)。大多數(shù)輔酶的前體主要是水溶性B族維生素。許多維生素的生理功能與輔酶的作用密切相關(guān)。,1、硫胺素,硫胺素維生素B1在體內(nèi)以焦磷酸硫胺素TPP形式存在。缺乏時表現(xiàn)出多發(fā)性神經(jīng)炎、皮膚麻木、心力衰竭、四肢無力、下肢水腫。俗稱腳氣病。,一、水溶性維生素與輔酶,硫胺素和焦磷酸硫胺素TPP,焦磷酸硫胺素是脫羧酶的輔酶，它的前體是硫胺素維生素B1。,功能是催化酮酸的脫羧反應(yīng),一、水溶性維生素與輔酶,2、核黃素（VB2,核黃素維生素B2由核糖醇和6，7二甲基異咯嗪兩部分組成。缺乏時組織呼吸減弱，代謝強(qiáng)度降低。主要癥狀為口腔發(fā)炎，舌炎、角膜炎、皮炎等。,一、水溶性維生素與輔酶,2、核黃素和FAD和FMN,FAD黃素腺嘌呤二核苷酸和FMN黃素單核苷酸是核黃素維生素B2的衍生物，,一、水溶性維生素與輔酶,功能在脫氫酶催化的氧化還原反應(yīng)中，起著電子和質(zhì)子的傳遞體作用。,3、維生素PP,菸酸和菸酰胺，在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)檩o酶I和輔酶II。能維持神經(jīng)組織的健康。缺乏時表現(xiàn)出神經(jīng)營養(yǎng)障礙，出現(xiàn)皮炎（癩皮病）。,一、水溶性維生素與輔酶,維生素PP和NAD和NADP,NAD煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，又稱為輔酶I和NADP煙酰胺腺嘌呤磷酸二核苷酸,又稱為輔酶II是維生素?zé)燉０返难苌铮?一、水溶性維生素與輔酶,功能是多種重要脫氫酶的輔酶。,4、泛酸和輔酶ACOA,維生素B3泛酸是由?，?二羥基?二甲基丁酸和一分子?丙氨酸縮合而成。,一、水溶性維生素與輔酶,泛酸和輔酶ACOA,輔酶A是生物體內(nèi)代謝反應(yīng)中乙?；傅妮o酶，它的前體是維生素B3泛酸。,一、水溶性維生素與輔酶,功能是傳遞?；?，是形成代謝中間產(chǎn)物的重要輔酶。,5、葉酸和四氫葉酸FH4或THFA,四氫葉酸是合成酶的輔酶，其前體是葉酸又稱為蝶酰谷氨酸，維生素B11。缺乏癥為惡性貧血。,四氫葉酸的主要作用是作為一碳基團(tuán)，如CH3,CH2,CHO等的載體，參與多種生物合成過程。,一、水溶性維生素與輔酶,6、吡哆素,吡多素維生素B6，包括吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺。人類未發(fā)現(xiàn)缺乏癥。,一、水溶性維生素與輔酶,吡哆素和磷酸吡哆素,磷酸吡哆素主要包括磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺。它的,一、水溶性維生素與輔酶,磷酸吡多素是轉(zhuǎn)氨酶的輔酶，轉(zhuǎn)氨酶通過磷酸吡多醛和磷酸吡多胺的相互轉(zhuǎn)換，起轉(zhuǎn)移氨基的作用。,7、生物素,生物素是羧化酶的輔酶，它本身就是一種B族維生素B7。人類未發(fā)現(xiàn)缺乏癥。,一、水溶性維生素與輔酶,生物素的功能是作為CO2的遞體，在生物合成中起傳遞和固定CO2的作用。,8、維生素B12輔酶,維生素B12又稱為鈷胺素。維生素B12分子中與CO相連的CN基被5’脫氧腺苷所取代，形成維生素B12輔酶。維生素B12輔酶的主要功能是作為變位酶的輔酶，催化底物分子內(nèi)基團(tuán)主要為甲基的變位反應(yīng)。缺乏癥為惡性貧血。,一、水溶性維生素與輔酶,維生素B12,9、硫辛酸,硫辛酸是少數(shù)不屬于維生素的輔酶。硫辛酸是6,8二硫辛酸，有兩種形式，即硫辛酸（氧化型）和二氫硫辛酸（還原型）人類尚未發(fā)現(xiàn)缺乏癥,10、維生素C,在體內(nèi)參與氧化還原反應(yīng)，羥化反應(yīng)。人體不能合成。缺乏癥為壞血病。,維生素C,因能防治壞血病（SCURVY）又名抗壞血酸（ASCORBICACID）?？梢悦摎鋮⑴c生物體氧化還原反應(yīng)，起遞氫作用；具抗毒作用，能保護(hù)巰基酶不被氧化，用于防治職業(yè)中毒如鉛、汞、砷、苯等慢性中毒；參與PRO和LYS是羥基化作用，促進(jìn)膠原蛋白和粘多糖的合成，促進(jìn)骨骼的正常生長和傷口愈合。缺乏時患壞血病。,二、輔酶QCOQ,輔酶Q又稱為泛醌，廣泛存在與動物和細(xì)菌的線粒體中，其結(jié)構(gòu)為,輔酶Q的活性部分是它的醌環(huán)結(jié)構(gòu)，主要功能是作為線粒體呼吸鏈氧化還原酶的輔酶，在酶與底物分子之間傳遞電子。,返回,

簡介：一、維生素概論,維生素是參與生物生長發(fā)育和代謝，維持生命現(xiàn)象所必需的一類微量小分子有機(jī)物質(zhì)。動物體內(nèi)或者不能合成維生素，或者合成量不足，所以必須從食物中攝取。有些維生素可以由動物腸道內(nèi)的細(xì)菌合成，合成量可以滿足動物的需要。動物細(xì)胞可將色氨酸轉(zhuǎn)變成煙酸（一種B族維生素），但量不足需要。除靈長類動物（包括人類）及豚鼠外，其它動物都可以自身合成維生素C。植物和多數(shù)微生物都能自己合成維生素。,維生素的概念,THENOBELPRIZEINPHYSIOLOGYORMEDICINE1929,CHRISTIAANEIJKMAN,SIRFREDERICKGOWLANDHOPKINS,UTRECHTUNIVERSITYTHENETHERLANDS,UNIVERSITYOFCAMBRIDGEUNITEDKINGDOM,“FORHISDISCOVERYOFTHEANTINEURITICVITAMIN“,“FORHISDISCOVERYOFTHEGROWTHSTIMULATINGVITAMINS“,維生素的作用,維生素在生物體內(nèi)的作用不同于糖類、脂肪和蛋白質(zhì)，不作為能量來源，不是結(jié)構(gòu)物質(zhì)，但它們在調(diào)節(jié)代謝中起著非常重要的作用。已知絕大多數(shù)維生素是作為輔酶或輔基的組成成分起作用。機(jī)體缺乏維生素時，會產(chǎn)生各種相應(yīng)的維生素缺乏癥。生物對維生素的需要量非常小。,維生素的命名,維生素的命名一般是按發(fā)現(xiàn)的先后順序在“維生素”后面加A、B、C等字母來命名。有些維生素在初發(fā)現(xiàn)時以為是一種，后來發(fā)現(xiàn)是多種維生素的混合物，又在相應(yīng)的字母下加下標(biāo)1、2、3等加以區(qū)分。每一種維生素還有一個化學(xué)名稱，如維生素C又叫抗壞血酸。,維生素的分類,各種維生素在化學(xué)結(jié)構(gòu)上沒有共同性。通常按其溶解性質(zhì)分為脂溶性和水溶性兩大類。脂溶性的維生素有維生素A、D、E、K等，水溶性的維生素有維生素B1、B2、煙酸和煙酰胺、B6、泛酸、生物素、葉酸、B12（它們都屬于B族維生素）和維生素C等。,維生素與輔酶的關(guān)系,見P434表111,二、脂溶性維生素,維生素A又名視黃醇（RETINOL），通常以脂肪酸酯的形式存在，其氧化態(tài)為視黃醛（RETINENE）。視黃醇是一種類異戊二烯分子。,維生素A,維生素A,視黃醇從動物類食品中吸收，或從植物類食品中吸收Β－胡蘿卜素后自身合成。Β－胡蘿卜素是維生素A合成的前體。維生素A包括A1和A2兩種，A2的生理活性只有A1的一半。,視黃醛的順反異構(gòu)體,9,11,Β－胡蘿卜素的結(jié)構(gòu),維生素A的生理功能,維生素A是構(gòu)成視覺細(xì)胞內(nèi)感光物質(zhì)的成分。眼球視網(wǎng)膜上有兩類感覺細(xì)胞，即圓錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。圓錐細(xì)胞對強(qiáng)光及顏色敏感，桿細(xì)胞對弱光敏感，對顏色不敏感。桿細(xì)胞內(nèi)含有感光物質(zhì)視紫紅質(zhì)（RHODOPIN）。視紫紅質(zhì)在光中分解，在暗中再合成。視紫紅質(zhì)是由9,11－順視黃醛和視蛋白中賴氨酸殘基的Ε－氨基通過SCHIFF堿縮合而成的一種綴合蛋白質(zhì)。眼睛對弱光的感光性取決于視紫紅質(zhì)的合成。當(dāng)維生素A缺乏時，視紫紅質(zhì)合成受阻，暗中的視力下降，嚴(yán)重時可出現(xiàn)夜盲癥。,維生素A的來源和需要量,,維生素A主要來自動物性食品，以肝臟、乳制品和蛋黃中含量最多。維生素A原（Β－胡蘿卜素）主要來自植物性食品，以胡蘿卜、綠葉蔬菜和玉米等含量較多。正常人每日維生素A的需要量為2600～3300國際單位，過多攝入維生素A可引起中毒癥狀。1個國際單位的維生素A為03ΜG維生素A。,維生素D,,維生素D為類甾醇衍生物。它與動物骨骼的鈣化有關(guān)，故又稱為鈣化醇（CALCIFEROL），具有抗佝僂病的作用。維生素D家族最重要的成員是麥角鈣化醇（維生素D2）及膽鈣化醇（維生素D3）。植物或酵母中所含的麥角甾醇經(jīng)紫外線激活后可轉(zhuǎn)化為維生素D2，動物皮下的7脫氫膽甾醇經(jīng)紫外線照射也可以轉(zhuǎn)化為維生素D3。因此麥角甾醇和7脫氫膽甾醇被稱為維生素D原。,維生素D2與D3的結(jié)構(gòu),,,維生素D的活性形式與生理作用,,維生素D3經(jīng)過肝和腎中的羥基化，最終形成高活性的1,25二羥膽鈣化醇。1,25二羥膽鈣化醇的生理功能是促進(jìn)鈣、磷的吸收，減少鈣、磷從尿中排出，提高血鈣、血磷濃度，有利于新骨的生成與鈣化。孕婦、嬰兒和青少年對維生素D的需要量大，如果此時維生素D不足，會出現(xiàn)骨骼變軟及畸形，發(fā)生在兒童身上稱為佝僂病，在孕婦身上為骨質(zhì)軟化癥。,維生素D治療佝僂病,維生素D3的前體及轉(zhuǎn)化過程,,B環(huán)開環(huán),,H重排,,,,維生素D3轉(zhuǎn)變成活性形式,,人體維生素D3的來源及需要量,,,人體中的維生素D主要是D3，除了從食物中攝取外，多曬太陽是預(yù)防維生素D缺乏的主要方法之一。肝、奶及蛋黃中維生素D含量較高，尤以魚肝油中含量最豐富。1克維生素D為4千萬國際單位。嬰兒、青少年、孕婦及哺乳者每日需要量為400～800單位。長期過量服用會造成中毒。,維生素E,維生素E與動物的生育有關(guān)，故稱生育酚（TOCOPHEROL）。天然的生育酚共有8種，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上，均系苯駢二氫吡喃的衍生物。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)分為生育酚及生育三烯酚兩類，每類又可根據(jù)甲基數(shù)目和位置的不同，分為Α、Β、Γ和Δ四種。,維生素E結(jié)構(gòu)式,R1、R2不同則成為不同的種類,維生素E的功能,維生素E與動物的生殖功能有關(guān)，并有抗氧化作用。動物缺乏維生素E時，其生殖器官受損而不育。維生素E中以Α－生育酚的生理活性最高，但Δ－生育酚的抗氧化作用最強(qiáng)。,維生素E的抗氧化作用,維生素E的需要量,維生素E一般不易缺乏。成人每天對維生素E的需要量尚不清楚，但動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，每天食物中有50毫克即可滿足需要，妊娠及哺乳期需要量略增。維生素E以麥胚油、大豆油、玉米油和葵花籽油中含量最為豐富，豆類及蔬菜中也含量較多。,維生素K,維生素K具有促進(jìn)凝血的功能，故又稱為凝血維生素。天然的維生素K有兩種K1和K2。K1在綠葉植物及動物肝中含量較豐富，K2是人體腸道細(xì)菌的代謝產(chǎn)物。它們都是2甲基1,4萘醌的衍生物。另外還有人工合成的K3和K4，它們的活性比天然維生素K還高。K3和K4是水溶性的。,維生素K的結(jié)構(gòu)式,4個異戊二烯碳骨架，1個雙鍵,6個異戊二烯碳骨架，6個雙鍵,23,維生素K的生理功能,,維生素K的主要生理功能是促進(jìn)肝臟合成凝血酶原，還能調(diào)節(jié)另外3種凝血因子Ⅶ、Ⅸ及Ⅹ的合成。缺少維生素K時，凝血功能減弱，常發(fā)生肌肉和胃腸道出血。凝血酶原轉(zhuǎn)變成凝血酶需要結(jié)合CA2，而結(jié)合CA2要求肽鏈上有Γ羧基谷氨酸殘基。此種不常見蛋白質(zhì)氨基酸是由依賴維生素K的谷氨酰羧化酶催化完成的。當(dāng)維生素K缺乏時，凝血酶原不能轉(zhuǎn)變成凝血酶。,依賴維生素K的羧化反應(yīng),,依賴維生素K的羧化反應(yīng),依賴維生素K的羧化反應(yīng)是在肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中進(jìn)行的，羧化反應(yīng)與維生素K的環(huán)氧化物生成相偶聯(lián)，此環(huán)氧化物經(jīng)過維生素K循環(huán)可以重新轉(zhuǎn)變成維生素K。雙羥香豆素能抑制環(huán)氧化物還原酶，從而抑制維生素K循環(huán)，所以雙羥香豆素是抗凝血劑。,雙羥香豆素,維生素K循環(huán),維生素K的來源,一般情況下人體不會缺乏維生素K，因?yàn)榫S生素K在蔬菜中含量豐富，人和哺乳動物腸道中的大腸桿菌也可以合成維生素K。大劑量使用維生素K也有一定毒性，如新生兒注射30MG/天，連用3天有可能引起高膽紅素血癥。,三、水溶性維生素,維生素B1和硫胺素焦磷酸,維生素B1由含硫的噻唑環(huán)和含氨基的嘧啶環(huán)組成，故稱為硫胺素（THIAMINE），在生物體內(nèi)常以硫胺素焦磷酸（TPP）的輔酶形式存在。維生素B1在堿性溶液中加熱極易被破壞，而在酸性溶液中則對熱穩(wěn)定。,維生素B1和TPP,TPP參與催化的反應(yīng),硫胺素焦磷酸是涉及到糖代謝中羰基碳合成與裂解反應(yīng)的輔酶，參與催化?。呀夥磻?yīng)、Α－縮合反應(yīng)、?。D(zhuǎn)移反應(yīng)等。,維生素B1的需要量,維生素B1主要存在于種子外皮及胚芽中，米糠、麥麩、黃豆、酵母、瘦肉中含量最豐富。人體每日需要量為2毫克，體內(nèi)若維生素B1過多，極易隨尿排出，未見因體內(nèi)積累而造成中毒的情況。大劑量用于治療時，也未見副作用。,維生素B1缺乏癥,由于維生素B1和糖代謝關(guān)系密切，因此多食糖類食物，維生素B1的需要量也相應(yīng)增多。當(dāng)維生素B1缺乏時，糖代謝受阻，丙酮酸積累，使病人的血、尿和腦組織中丙酮酸含量增多。VB1還是乙酰膽堿酯酶的抑制劑，缺少VB1時，膽堿酯酶活性增加，乙酰膽堿減少，出現(xiàn)多發(fā)性神經(jīng)炎、皮膚麻木、心力衰竭、四肢無力、肌肉萎縮及下肢浮腫等癥狀，臨床上稱為腳氣病。根據(jù)其缺乏癥，又將維生素B1稱為抗神經(jīng)炎維生素（抗腳氣病維生素）。,維生素PP和煙酰胺輔酶,維生素PP包括煙酸（NICOTINICACID）和煙酰胺（NICOTINAMIDE），也稱為維生素B3，二者均屬于吡啶衍生物。在體內(nèi)煙酰胺與核糖、磷酸、腺嘌呤組成煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NICOTINAMIDEADENINEDINUCLEOTIDE，NAD，輔酶Ⅰ）和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NICOTINAMIDEADENINEDINUCLEOTIDEPHOSPHATE，NADP，輔酶Ⅱ）。,煙酰胺輔酶的結(jié)構(gòu)和氧化還原狀態(tài),兩個電子的轉(zhuǎn)移反應(yīng),煙酰胺輔酶參與催化的反應(yīng),煙酰胺輔酶是電子載體，參與催化氧化還原反應(yīng)，是多種脫氫酶的輔酶。這些反應(yīng)涉及到從底物轉(zhuǎn)移氫負(fù)離子給NAD或從NAD轉(zhuǎn)移氫負(fù)離子給底物，其吡啶環(huán)的C4位是反應(yīng)中心。依賴NAD和NADP的脫氫酶至少催化6種不同類型的反應(yīng)。,煙酰胺輔酶參與催化的6類反應(yīng),維生素PP需要量及缺乏癥,維生素PP在酵母、花生、肝、魚及瘦肉中含量豐富。人體每日需要量約20毫克。人缺乏維生素PP時，表現(xiàn)為神經(jīng)營養(yǎng)障礙，初時全身乏力，以后在兩手、兩頰、左右額及其他裸露部位出現(xiàn)對稱性皮炎。故維生素PP又名抗癩皮病維生素。,維生素B2和黃素輔酶,維生素B2又名核黃素（RIBOFLAVIN），是核醇與7,8二甲基異咯嗪的縮合物。由于在異咯嗪的1位和5位氮原子上具有兩個活潑的雙鍵，易起氧化還原反應(yīng)，故維生素B2和有氧化型和還原型兩種形式，在催化氧化還原反應(yīng)時起傳遞氫的作用。核黃素易受光照射破壞。,核黃素、FMN和FAD的結(jié)構(gòu),核黃素的輔酶形式,在體內(nèi)核黃素是以黃素單核苷酸（FLAVINMONONUCLEOTIDE，F(xiàn)MN）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FLAVINADENINEDINUCLEOTIDE，F(xiàn)AD）的形式存在。是生物體內(nèi)一些氧化還原酶（黃素蛋白）的輔基，與脫輔酶以非共價鍵結(jié)合。黃素是比NAD和NADP更強(qiáng)的氧化劑，能被1個電子和2個電子還原。FMN和FAD廣泛參與體內(nèi)的各種氧化還原反應(yīng)。,FAD和FMN的氧化還原態(tài),無色,黃色,藍(lán)色,紅色,黃素蛋白催化的反應(yīng),維生素B2的需要量及缺乏癥,維生素B2廣泛存在于動植物中，在酵母、肝、腎、蛋黃、奶及大豆中含量豐富。人體每日需要量為2～3毫克。當(dāng)維生素B2缺乏時，引起口角炎、唇炎、陰囊皮炎、眼瞼炎及角膜血管增生、混濁、潰爛、畏光等。,泛酸和輔酶A,泛酸廣泛存在于生物界，故又名遍多酸（PANTOTHENICACID），是由Β－丙氨酸通過肽鍵與Α,Γ二羥基Β,Β二甲基丁酸縮合而成的一種有機(jī)酸。泛酸是輔酶A（COENZYMEA）和磷酸泛酰巰基乙胺的組成成分，輔酶A是泛酸的主要活性形式，常簡寫為COA，是由3’,5’ADP以磷酸酐鍵連接4磷酸泛酰巰基乙胺而成。,輔酶A的結(jié)構(gòu),磷酸泛酰巰基乙胺,輔酶A參與催化的機(jī)理,輔酶A主要起傳遞酰基的作用，是各種酰化反應(yīng)中的輔酶。由于攜帶?；牟课辉冢璖H上，故輔酶A通常以COASH表示。硫酯鍵的水解比酯鍵的水解更為有利，所以?；鵆OA是酰基的活化形式。,泛酸含量高的食物,泛酸在酵母、肝、腎、蛋、小麥、米糠、花生和豌豆中含量豐富，在蜂王漿中含量最高。輔酶A被廣泛用作各種疾病的重要輔助藥物。,維生素B6和磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺,維生素B6包括3種物質(zhì)，即吡哆醇（PYRIDOXINE）、吡哆醛（PYRIDOXAL）和吡哆胺（PYRIDOXAMINE），它們都是吡啶的衍生物。維生素B6在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在，磷酸吡哆醛（PYRIDOXAL5PHOSPHATE，PLP）和磷酸吡哆胺是其活性形式，是氨基酸代謝中多種酶的輔酶。,維生素B6的各種形式,磷酸吡哆醛的作用,PLP在生理?xiàng)l件下有兩種互變異構(gòu)形式。PLP參加涉及氨基酸代謝的各種反應(yīng)，包括轉(zhuǎn)氨作用，Α－和Β－脫羧作用，Β－和Γ－消除作用，消旋作用和羥醛反應(yīng)。,磷酸吡哆醛的兩種互變形式,PLP參與催化的反應(yīng)Ⅰ,1,2,3,PLP參與催化的反應(yīng)Ⅱ,4,5,PLP參與催化的反應(yīng)Ⅲ,6,7,人體對維生素B6的需要量,維生素B6在動植物中分布很廣，酵母、肝、瘦肉、卷心菜等食物中均含量豐富。人體每日需要量約15～2毫克，因?yàn)槭澄镏懈缓S生素B6，同時腸道細(xì)菌也可以合成維生素B6，所以人類很少發(fā)生維生素B6缺乏病。,維生素B12（氰鈷胺素）及其輔酶,維生素B12的化學(xué)名稱為氰鈷胺素（CYANOCOBALAMIN），它在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成兩種輔酶形式，主要輔酶形式是5’脫氧腺苷鈷胺素，次要的輔酶形式是甲基鈷胺素。該結(jié)構(gòu)由一個咕啉環(huán)和一個中心鈷離子組成，鈷離子同4個吡咯氮相配位，鈷軸向的一個配位是二甲基苯并咪唑基的氮，另一個軸向配位可以是－CN、－CH3、－OH、或者5’脫氧腺苷基的5’碳。,維生素B12及其輔酶形式的結(jié)構(gòu)式,維生素B12輔酶參與反應(yīng)的類型,分子內(nèi)重排,核苷酸還原成脫氧核苷酸,甲基轉(zhuǎn)移,從氰鈷胺素合成5’脫氧腺苷鈷胺素,維生素B12的缺乏癥,維生素B12參與DNA的合成，對紅細(xì)胞的成熟很重要，當(dāng)缺少維生素B12時，巨紅細(xì)胞中DNA的合成受到障礙，影響了細(xì)胞分裂，不能分化成紅細(xì)胞，引起惡性貧血。人體對維生素B12需要量極少，每日注射1ΜG即可治療缺乏癥。維生素B12廣泛來源于動物性食品，特別是肉類和肝中含量豐富。人和動物的腸道細(xì)菌都能合成，故在一般情況下不會缺少維生素B12。,生物素,生物素（BIOTIN）是由噻吩環(huán)和尿素結(jié)合而成的一個雙環(huán)化合物，噻吩環(huán)2位側(cè)鏈上有一分子戊酸。它在多種酶促羧化反應(yīng)中作為羧基的活動載體起作用。生物素通過其側(cè)鏈羧基與酶蛋白上賴氨酸的Ε氨基共價結(jié)合，生物素與酶蛋白主肽鏈之間有一個,長長的柔性鏈，這使得生物素可以在酶活性部位的一個亞位上接受羧基，并運(yùn)動到另一個亞位上釋放羧基。,生物素與酶蛋白中賴氨酸的連接,依賴生物素的酶上的3個亞位,依賴生物素的酶具有3個亞位羧化作用亞位；羧基載體亞位；羧基轉(zhuǎn)移亞位。有些酶在一條多肽鏈上攜帶所有的3個亞位，但是許多依賴生物素的酶是由單功能亞基的聚集體組成，不同的亞位分布在不同的亞基上。,生物素參與催化的轉(zhuǎn)羧基反應(yīng)機(jī)理,人體對生物素的需要量,人體每天對生物素的需要量約100～300毫克。生物素來源廣泛，肝、腎、蛋黃、酵母、蔬菜和谷物中都有，腸道細(xì)菌也能合成，所以一般很少出現(xiàn)缺乏癥。,葉酸和四氫葉酸,葉酸（FOLICACID）由2氨基4羥基6甲基蝶啶（6甲基蝶呤）、對氨基苯甲酸和L谷氨酸三部分組成，因其在綠葉中含量十分豐富，因此命名為葉酸。葉酸是除了CO2以外所有氧化水平一碳單位的重要受體和供體，參與催化一碳單位的轉(zhuǎn)移反應(yīng)。四氫葉酸是葉酸的活性輔酶形式，又稱為輔酶F（COF）。,葉酸的結(jié)構(gòu),葉酸還原成四氫葉酸,二氫葉酸,四氫葉酸,四氫葉酸攜帶的一碳單位中碳的氧化態(tài),四氫葉酸攜帶各種一碳單位的形式,,,,,,,葉酸類似物,可抑制二氫葉酸還原酶，它們是抗腫瘤藥物,人體對葉酸的需要量和缺乏癥,由于葉酸與核酸的合成有關(guān)，當(dāng)葉酸缺乏時，DNA的合成受到抑制，造成巨紅細(xì)胞性貧血。葉酸廣泛存在于肝、酵母及蔬菜中，人類腸道細(xì)菌也能合成葉酸，故一般不易發(fā)生缺乏癥。當(dāng)吸收不良，代謝失?；蜷L期使用腸道抑菌藥時，可引起葉酸缺乏癥。人體每日需要量約400ΜG，孕婦需要量增加一倍。,硫辛酸的結(jié)構(gòu),硫辛酸（LIPOICACID）是6,8二巰基辛酸，以氧化態(tài)和還原態(tài)兩種形式存在，這兩種形式可以通過氧化還原互相轉(zhuǎn)變。在酶分子中，硫辛酸的羧基與肽鏈中的賴氨酸側(cè)鏈氨基以酰胺鍵連接。,硫辛酸的作用,硫辛酸是一種?；d體，存在于丙酮酸脫氫酶和?。於崦摎涿钢?，這兩種酶是糖代謝中的兩種多酶復(fù)合體，分別催化丙酮酸脫羧產(chǎn)生乙酰COA和?。於崦擊刃纬社牾OA。硫辛酸在?。嵫趸饔煤兔擊茸饔脮r行使偶聯(lián)?；D(zhuǎn)移和電子轉(zhuǎn)移的功能。此反應(yīng)在后面會詳細(xì)介紹。,維生素C,維生素C具有防治壞血病的功能，故又稱為抗壞血酸（ASCORBICACID）。維生素C是一種含有6個碳原子的酸性多羥基化合物，分子中C2及C3位上兩個相鄰的烯醇式羥基易解離而釋放H，所以維生素C雖無自由羧基，但仍具有酸的性質(zhì)。,L型有高活性D型只有低活性,維生素C,維生素C廣泛分布于動物界和植物界，僅人類和其他靈長類、豚鼠、一些鳥類和某些魚類不能合成，因?yàn)槿祟惡瓦@些動物的肝臟中缺少L古洛糖酸Γ內(nèi)酯氧化酶，所以不能合成抗壞血酸，必須從食物中獲得。,維生素C的生物合成,維生素C的降解,氧化型的抗壞血酸（脫氫抗壞血酸）易降解,維生素C的氧化還原,維生素C的功能,,維生素C參與體內(nèi)的多種氧化還原反應(yīng)，通過偶聯(lián)氧化還原，使一些分子保持還原態(tài)。維生素C是羥化酶維持活性所必需的輔因子之一，體內(nèi)有許多反應(yīng)涉及到羥化反應(yīng)，膠原分子上的羥脯氨酸和羥賴氨酸就是脯氨酸和賴氨酸經(jīng)羥化酶催化產(chǎn)生的。缺少維生素C膠原的合成受到影響。還有許多代謝過程也受到阻礙。,維生素C的偶聯(lián)氧化還原,,重金屬離子,,（酶失活）,維生素C的缺乏癥,維生素C是最不穩(wěn)定的一種維生素，由于它容易被氧化，在食物貯藏或烹調(diào)過程中，甚至切碎新鮮蔬菜時都能被破壞。因此，只有新鮮的蔬菜、水果或生拌菜才是維生素C的豐富來源。人缺少維生素C時會發(fā)生壞血病，出現(xiàn)易出血，牙齒松動，傷口不易愈合，易骨折等癥狀。由于維生素C在人體內(nèi)的半衰期較長（大約16天），所以食用不含維生素C的食物3～4個月后才會出現(xiàn)壞血病。人體每天需要量為20～30毫克，妊娠后期及哺乳期為50毫克。,

簡介：,作者朱月春張巧,,單位昆明醫(yī)科大學(xué),第二十章,維生素,VITAMINS,,,,維生素概述,第一節(jié)脂溶性維生素,第二節(jié)水溶性維生素,,小結(jié),重點(diǎn)難點(diǎn),維生素的定義、分類、名稱、活性形式及缺乏癥,維生素的生理功能及其作用機(jī)制,維生素的來源及每日攝取量,（一）定義,維生素VITAMIN是人體內(nèi)不能合成，或合成量甚少、不能滿足機(jī)體的需要，必須由食物供給，以維持正常生命活動的一類低分子量有機(jī)化合物，是人體的重要營養(yǎng)素之一。,,維生素概述,（二）分類,脂溶性維生素（LIPIDSOLUBLEVITAMIN）水溶性維生素（WATERSOLUBLEVITAMIN）,按照溶解特性的不同，維生素可分為兩大類,VITAMINSOVERVIEW,脂溶性維生素,第一節(jié),LIPIDSOLUBLEVTAMIN,（一）共同特點(diǎn),均為疏水性化合物，易溶于脂類和有機(jī)溶劑，常隨脂類物質(zhì)被吸收在血液中與脂蛋白或特異性結(jié)合蛋白結(jié)合而運(yùn)輸，不易被排泄，在體內(nèi)主要儲存于肝，故不需每日供給不同種類脂溶性維生素執(zhí)行不同的生物化學(xué)與生理功能脂類吸收障礙和食物中長期缺乏此類維生素可引起相應(yīng)的缺乏癥，攝入過多則可發(fā)生中毒,脂溶性維生素,（二）種類,維生素A、維生素D、維生素E和維生素K,1結(jié)構(gòu)特征與天然形式,（一）一般性質(zhì),2來源動物性食品肝、肉類、蛋黃、乳制品、魚肝油等植物維生素A原（如Β胡蘿卜素）,脂溶性維生素維生素A,一、維生素A（視黃醇、抗干眼病維生素）,3活性形式視黃醇、視黃醛和視黃酸,異戊二烯衍生物，為不飽和一元醇A1（視黃醇）、A2（3脫氫視黃醇）,維生素A的結(jié)構(gòu),1視黃醛參與視覺傳導(dǎo),（二）生物學(xué)功能,脂溶性維生素維生素A,視循環(huán),2視黃酸調(diào)控基因表達(dá)和細(xì)胞生長與分化,脂溶性維生素維生素A,3維生素A和胡蘿卜素是有效的抗氧化劑,4維生素A及其衍生物可抑制腫瘤生長,關(guān)鍵物質(zhì)9順視黃酸全反式視黃酸或全反式維甲酸（ALLTRANSRETINOICACID，ATRA）作用途徑與細(xì)胞內(nèi)核受體結(jié)合，進(jìn)而與DNA反應(yīng)元件作用,（三）維生素A缺乏癥及中毒,脂溶性維生素維生素A,1缺乏癥,2建議攝入量,中國成人膳食維生素A的平均需要量（EAR）男性560ΜG/D，女性為480ΜG/D,3中毒癥狀,夜盲癥干眼病增加機(jī)體對感染性疾病的敏感性,頭痛、惡心、共濟(jì)失調(diào)等中樞神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)肝細(xì)胞損傷和高脂血癥長骨增厚、高鈣血癥、軟組織鈣化等鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)表現(xiàn)皮膚干燥、脫屑和脫發(fā)等表現(xiàn),EARESTIMATEDAVERAGEREQUIREMENT,（一）一般性質(zhì),2來源魚油、蛋黃、肝，紫外線照射下由人體皮膚的7脫氫膽固醇合成,脂溶性維生素維生素D,二、維生素D（膽鈣化醇、麥角鈣化醇、抗佝僂病維生素）,3活性形式1,25二羥維生素D3,1,25二羥維生素D3的結(jié)構(gòu),是類固醇（STEROID）的衍生物，為環(huán)戊烷多氫菲類化合物。D3或稱膽鈣化醇（CHOLECALCIFEROL）、D2或稱麥角鈣化醇（ERGOCALCIFEROL）,1結(jié)構(gòu)特征,維生素D3在體內(nèi)的轉(zhuǎn)變,脂溶性維生素維生素D,,11,25OH2D3調(diào)節(jié)鈣磷代謝,（二）生物學(xué)功能,脂溶性維生素維生素D,21,25OH2D3影響細(xì)胞分化,其與靶細(xì)胞內(nèi)特異的核受體結(jié)合，調(diào)節(jié)鈣結(jié)合蛋白等基因的表達(dá)其通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)使鈣通道開放，發(fā)揮對鈣磷代謝的快速調(diào)節(jié)作用其可促進(jìn)小腸對鈣、磷的吸收，維持血鈣和血磷的正常水平，促進(jìn)骨和牙的鈣化,其可調(diào)節(jié)皮膚、大腸、前列腺、乳腺、胰島Β細(xì)胞等細(xì)胞的分化其可促進(jìn)胰島Β細(xì)胞合成與分泌胰島素，具有對抗1型和2型糖尿病的作用其對某些腫瘤細(xì)胞具有抑制增殖和促進(jìn)分化的作用,（三）維生素D缺乏癥及中毒,脂溶性維生素維生素D,1缺乏癥,2建議攝入量,中國居民膳食維生素D的平均需要量（EAR）為8ΜG/D,3中毒癥狀,夜盲癥佝僂?。▋和┸浌遣『凸琴|(zhì)疏松癥（成人）,因皮膚儲存7脫氫膽固醇有限，多曬太陽不致維生素D中毒高鈣血癥、高鈣尿癥、高血壓以及軟組織鈣化等口渴，皮膚瘙癢，嘔吐、腹瀉、尿頻等,1結(jié)構(gòu)特征與種類,（一）一般性質(zhì),2來源植物油、油性種子和麥芽,脂溶性維生素維生素E,三、維生素E（生育酚）,苯駢二氫吡喃的衍生物生育酚（TOCOPHEROL）、生育三烯酚（TOCOTRIENOL）,3活性形式生育酚的各類衍生物,維生素E的結(jié)構(gòu),1維生素E是體內(nèi)最重要的脂溶性抗氧化劑,（二）生物學(xué)功能,脂溶性維生素維生素E,2維生素E具有調(diào)節(jié)基因表達(dá)的作用,3維生素E促進(jìn)血紅素的合成,機(jī)制捕捉過氧化脂質(zhì)自由基,保護(hù)生物膜的結(jié)構(gòu)與功能。,機(jī)制促進(jìn)Δ氨基Γ酮戊酸ALA合酶和ALA脫水酶的活性,調(diào)控生育酚攝取和降解相關(guān)基因的表達(dá)延緩衰老調(diào)控脂類攝取與動脈硬化相關(guān)基因的表達(dá)預(yù)防和治療冠心病調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)蛋白、細(xì)胞黏附與炎癥相關(guān)基因的表達(dá)抗炎、維持正常免疫功能調(diào)控細(xì)胞信號系統(tǒng)和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)抑制細(xì)胞增殖，抗腫瘤,（三）維生素E缺乏癥及中毒,脂溶性維生素維生素E,1缺乏癥,2建議攝入量,3中毒癥狀,一般不易缺乏；早產(chǎn)兒與新生兒、脂類吸收障礙與肝損傷時可引起缺乏癥溶血性貧血可治療先兆流產(chǎn)及習(xí)慣性流產(chǎn),成人膳食維生素E的適宜攝入量（AI）為14MGΑTE/D,人類尚未發(fā)現(xiàn)維生素E中毒癥成人可耐受的最高攝入量（TOLERABLEUPPERINTAKELEVEL，UL）是600MGΑTE/D,ΑTE（ΑTOCOPHEROLEQUIVALENT）Α生育酚當(dāng)量；AIADEQUATEINTAKE,1結(jié)構(gòu)特征,（一）一般性質(zhì),2活性形式2甲基1,4萘醌,脂溶性維生素維生素K,四、維生素K（植物甲萘醌、葉綠醌、凝血維生素）,K1，又稱植物甲萘醌或葉綠醌K2，腸道細(xì)菌的產(chǎn)物K3，人工合成的水溶性甲萘醌，可口服及注射,3來源深綠色蔬菜（如甘藍(lán)、菠菜、萵苣等）、植物油、腸道細(xì)菌合成,2甲基1,4萘醌的衍生物,維生素K的結(jié)構(gòu),1維生素K是凝血因子活化所必需的輔酶,（二）生物學(xué)功能,脂溶性維生素維生素K,2維生素K對骨代謝具有重要作用,3維生素K對減少動脈鈣化也具有重要的作用,是Γ谷氨酰羧化酶的輔酶，參與凝血因子的活化,因?yàn)楣氢}蛋白（OSTEOCALCIN）和骨基質(zhì)Γ羧基谷氨酸蛋白均是維生素K依賴蛋白。,（三）維生素K缺乏癥,脂溶性維生素維生素K,1缺乏癥,2建議攝入量,中國成人膳食維生素K的適宜攝入量（AI）為80ΜG/D,成人不易缺乏，新生兒可能缺乏脂類吸收障礙（如胰腺、膽管疾?。┤狈Φ闹饕Y狀易出血,水溶性維生素,第二節(jié),WATERSOLUBLEVITAMIN,（一）共同特點(diǎn),在體內(nèi)主要構(gòu)成酶的輔助因子，直接影響酶的活性依賴食物提供，體內(nèi)過剩的水溶性維生素可隨尿排出，很少蓄積一般無中毒，但供給不足時可導(dǎo)致缺乏癥。,水溶性維生素,（二）種類,B族維生素（B1、B2、PP、B6、B12、生物素、泛酸和葉酸）維生素C,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素維生素B1,一、維生素B1（硫胺素）,主要存在于豆類和種子外皮（如米糠）、胚芽、酵母和瘦肉中,2活性形式焦磷酸硫胺素（THIAMINEPYROPHOSPHATE，TPP），占體內(nèi)硫胺素總量的80,焦磷酸硫胺素的結(jié)構(gòu),（二）生物學(xué)功能,水溶性維生素維生素B1,1維生素B1在體內(nèi)能量代謝中發(fā)揮重要的作用,Α酮酸氧化脫羧酶多酶復(fù)合體的輔酶中轉(zhuǎn)酮醇酶的輔酶,2維生素B1在神經(jīng)傳導(dǎo)中起一定作用,合成乙酰膽堿的乙酰輔酶A主要來自于丙酮酸的氧化脫羧反應(yīng)可作為膽堿酯酶的抑制劑，參與乙酰膽堿的代謝調(diào)控,（三）缺乏癥,水溶性維生素維生素B1,1缺乏癥,2建議攝入量,中國成人男性膳食維生素B1的平均需要量（EAR）為12MG/D，成人女性為10MG/D,腳氣?。˙ERIBERI），神經(jīng)末梢炎,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素維生素B2,二、維生素B2（核黃素）,奶與奶制品、肝、蛋類和肉類等,2活性形式,FMN和FAD的結(jié)構(gòu),黃素單核苷酸（FMN）黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）,（二）生物學(xué)功能,水溶性維生素維生素B2,2參與煙酸和維生素B6的代謝,1為氧化還原酶的輔基，起遞氫體的作用,FMN（FAD）的遞氫作用,脂酰COA脫氫酶、琥珀酸脫氫酶等,3FAD作為谷胱甘肽還原酶的輔酶，參與體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng),作為輔酶參與色氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)闊熕岷蚔ITB6轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿徇炼呷┑姆磻?yīng)。,4FAD與CYTP450結(jié)合，參與藥物代謝,（三）缺乏癥,水溶性維生素維生素B2,1缺乏癥,2建議攝入量,中國成人膳食維生素B2的平均需要量（EAR）男性為14MG/D，成人女性為12MG/D,口角炎、唇炎、陰囊炎、眼瞼炎等,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素維生素PP,三、維生素PP（尼克酸、尼克酰胺、抗癩皮病維生素）,廣泛存在于自然界,2活性形式,維生素PP及其活性形式的結(jié)構(gòu),煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）,（二）生物學(xué)功能,水溶性維生素維生素PP,NAD和NADP是多種不需氧脫氫酶的輔酶，發(fā)揮遞氫體的作用。,糖酵解的3磷酸甘油醛脫氫酶、檸檬酸循環(huán)的蘋果酸脫氫等以NAD為輔酶磷酸戊糖途徑的G6PD以NADP為輔酶，其產(chǎn)物R5P是核糖生成的主要途徑,維生素PP的遞氫作用,（三）缺乏癥,水溶性維生素維生素PP,1缺乏癥,3中毒癥狀,2建議攝入量,中國成人男性膳食維生素PP的平均需要量（EAR）為12MGNE/D，成人女性為10MGNE/D,癩皮病（PELLAGRA）主要表現(xiàn)有皮炎、腹瀉及癡呆,NE（NIACINEQUIVALENT）煙酸當(dāng)量,血管擴(kuò)張、臉頰潮紅、痤瘡及胃腸不適等長期用量超過500MG/D,可致肝損傷,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素泛酸,四、泛酸（遍多酸、維生素B5）,廣泛存在于動、植物組織中,2活性形式,輔酶A的結(jié)構(gòu),輔酶A（COA?；d體蛋白（ACYLCARRIERPROTEIN，ACP）,（二）生物學(xué)功能,水溶性維生素泛酸,COA及ACP構(gòu)成?；D(zhuǎn)移酶的輔酶，參與糖、脂類、蛋白質(zhì)代謝及肝的生物轉(zhuǎn)化作用,（三）缺乏癥,2建議攝入量,中國居民膳食泛酸的適宜攝入量（AI）是50MG/D,缺乏癥少見早期癥狀易疲勞、胃腸功能障礙等疾病嚴(yán)重缺乏最顯著特征是出現(xiàn)肢神經(jīng)痛綜合征,1缺乏癥狀,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素生物素,五、生物素（維生素H、維生素B7、輔酶R）,肝、腎、酵母、蛋類、花生、牛乳、魚類、啤酒等，腸道細(xì)菌也可合成,2活性形式生物素,生物素的結(jié)構(gòu),（二）生物學(xué)功能,水溶性維生素生物素,1為羧化酶丙酮酸羧化酶、乙酰COA羧化酶等的輔基，參與CO2固定，為脂肪與糖代謝所必需,2通過生物素化，參與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因表達(dá)調(diào)控、DNA損傷修復(fù)等,（三）缺乏癥,少見食用生雞蛋，可缺乏（生物素與抗生物素蛋白結(jié)合后不被吸收）長期使用抗生素可缺乏疲乏、惡心、皮炎及脫屑性紅皮病,2建議攝入量,中國居民膳食生物素的適宜攝入量（AI）是40ΜG/D,1缺乏癥狀,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素維生素B6,六、維生素B6（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）,2活性形式磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺,維生素B6及其活性形式的結(jié)構(gòu)與互變,肉類、豆類、堅(jiān)果、蛋黃、酵母等,（二）生物學(xué)功能,1磷酸吡哆醛是多種酶的輔酶,水溶性維生素維生素B6,參與氨基酸脫氨基、鳥氨酸循環(huán)、血紅素合成和糖原分解等，在代謝中發(fā)揮著重要作用,2磷酸吡哆醛可終止類固醇激素作用的發(fā)揮,機(jī)制將類固醇激素受體復(fù)合物從DNA中移去，終止激素的作用,（三）缺乏癥與中毒,低血色素小細(xì)胞性貧血（又稱維生素B6反應(yīng)性貧血）和血清鐵增高。脂溢性皮炎，故VITB6又稱抗皮炎維生素攝入量超過200MG/D,可引起神經(jīng)損傷,中國居民膳食維生素B6的平均需要量（EAR）是12MG/D,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素葉酸,七、葉酸（蝶酰谷氨酸）,2活性形式5,6,7,8四氫葉酸（FH4）,葉酸的結(jié)構(gòu),酵母、肝、水果、綠葉蔬菜，腸菌合成,N5、N10是一碳單位的結(jié)合位點(diǎn),（二）生物學(xué)功能,1FH4是一碳單位轉(zhuǎn)移酶的輔酶。一碳單位參與嘌呤、胸腺嘧啶核苷酸等多種物質(zhì)的合成2甲氨蝶呤和氨蝶呤與葉酸機(jī)構(gòu)相似，抑制FH4合成，有抗腫瘤作用,水溶性維生素葉酸,（三）缺乏癥,中國居民膳食葉酸的平均需要量（EAR）是320ΜGDFE/D,巨幼紅細(xì)胞性貧血（MEGALOBLASTICANEMIA）高同型半胱氨酸血癥孕婦如果葉酸缺乏，可能造成胎兒脊柱裂和神經(jīng)管缺陷,DFF（DIETARYFOLATEEQUIVALENT）膳食葉酸當(dāng)量,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素維生素B12,八、維生素B12（鈷胺素、抗惡性貧血維生素）,2活性形式,由微生物合成，酵母和動物肝含量豐富,維生素B12的結(jié)構(gòu),甲鈷胺素5′脫氧腺苷鈷胺素,（二）生物學(xué)功能,1是N5CH3FH4轉(zhuǎn)甲基酶（甲硫氨酸合成酶）的輔酶，催化同型半胱氨酸甲基化生成甲硫氨酸2是L甲基丙二酰COA變位酶的輔酶，催化琥珀酰COA的生成,水溶性維生素維生素B12,（三）缺乏癥,中國居民膳食B12的平均需要量（EAR）是20ΜG/D,萎縮性胃炎、胃全切患者或內(nèi)因子先天性缺陷者，可因B12的吸收障礙而出現(xiàn)缺乏癥。巨幼紅細(xì)胞性貧血，B12也稱為抗惡性貧血維生素高同型半胱氨酸血癥髓鞘質(zhì)變性退化,1來源,（一）一般性質(zhì),水溶性維生素維生素C,九、維生素C（L抗壞血酸）,2活性形式L抗壞血酸,維生素C的結(jié)構(gòu)及遞氫作用,廣泛存在于新鮮蔬菜和水果中,（二）生物學(xué)功能,1參與體內(nèi)多種羥化反應(yīng)2作為抗氧化劑直接參與體內(nèi)氧化還原反應(yīng)3維生素C具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用,水溶性維生素維生素C,（三）缺乏癥與中毒,中國居民膳食維生素C的平均需要量（EAR）是85MG/D。,引起壞血?。⊿CURVY）影響膽固醇轉(zhuǎn)化，是動脈硬化的危險因素之一長期過量攝入，可能引發(fā)結(jié)石,維生素定義、分類、名稱及活性形式,脂溶性維生素（維生素A、D、E和K）的生理功能及缺乏癥狀,水溶性維生素（B族維生素（B1、B2、PP、B6、B12、生物素、泛酸和葉酸）和維生素C）的生理功能及缺乏癥狀,參考本章的網(wǎng)絡(luò)資源表（維生素分類、活性形式、生理功能、缺乏癥與需要量）,

簡介：2024/3/14,1,第三章蛋白質(zhì),2024/3/14,2,蛋白質(zhì)是由20種L型Α氨基酸組成的長鏈分子。,第一節(jié)蛋白質(zhì)概論,一、蛋白質(zhì)的化學(xué)組成與分類,1、元素組成,碳50氫7氧23氮16硫03微量的磷、鐵、銅、碘、鋅、鉬,凱氏定氮粗蛋白質(zhì)含量蛋白氮625,2、氨基酸組成,2024/3/14,3,酶、運(yùn)輸?shù)鞍?、營養(yǎng)和貯存蛋白、激素、受體蛋白、運(yùn)動蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白、防御蛋白。,3、分類,（1）按組成,簡單蛋白結(jié)合蛋白,（2）按分子外形的對稱程度,球狀蛋白質(zhì)纖維狀蛋白質(zhì)膜蛋白質(zhì),（3）按功能,2024/3/14,4,蛋白質(zhì)分子量氨基酸數(shù)目110,二、蛋白質(zhì)的大小與形狀,少于50個氨基酸的低分子量氨基酸多聚物稱為肽，寡肽或生物活性肽、多肽。,多于50個氨基酸的稱為蛋白質(zhì)。,110氨基酸殘基的平均分子量（P160）,2024/3/14,5,四級結(jié)構(gòu)亞基之間的聚集形式,三、蛋白質(zhì)分子的構(gòu)象與結(jié)構(gòu)層次,蛋白質(zhì)都有自己特有的天然空間結(jié)構(gòu)，稱為構(gòu)象。,一級結(jié)構(gòu)氨基酸順序,二級結(jié)構(gòu)Α螺旋、Β折疊、Β轉(zhuǎn)角，無規(guī)卷曲,三級結(jié)構(gòu)整個肽鏈（亞基）的形狀,2024/3/14,6,1．酶2．結(jié)構(gòu)成分（結(jié)締組織的膠原蛋白、血管和皮膚的彈性蛋白、膜蛋白）3．貯藏（卵清蛋白、種子蛋白）4．物質(zhì)運(yùn)輸（血紅蛋白、NAKATPASE、葡萄糖運(yùn)輸載體、脂蛋白、電子傳遞體）5．細(xì)胞運(yùn)動（肌肉收縮的肌球蛋白、肌動蛋白）6．激素功能（胰島素）7．自我保護(hù)（抗體、皮膚的角蛋白、血凝蛋白8．接受、傳遞信息（受體蛋白，味覺蛋白）9．調(diào)節(jié)、控制細(xì)胞生長、分化、和遺傳信息的表達(dá)（組蛋白、阻遏蛋白）,四、蛋白質(zhì)功能的多樣性,2024/3/14,7,第二節(jié)氨基酸,四大類生物分子中，蛋白質(zhì)是生物功能的主要載體，而氨基酸是蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子。,自然界中存在的成千上萬種蛋白質(zhì)，在結(jié)構(gòu)和功能上的驚人的多樣性歸根結(jié)底是由20中常見的氨基酸的內(nèi)在性質(zhì)造成的。,這些性質(zhì)包括,聚合能力,酸堿性,側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的多樣性,化學(xué)功能的多樣性,2024/3/14,8,一、蛋白質(zhì)的水解,酸水解色氨酸破壞，天冬酰胺、谷胺酰胺脫酰胺基,堿水解消旋，色氨酸穩(wěn)定,酶水解水解位點(diǎn)特異，用于一級結(jié)構(gòu)分析，肽譜,2024/3/14,9,非蛋白質(zhì)氨基酸存在于生物體內(nèi)但不組成蛋白質(zhì)約150種,二、氨基酸的結(jié)構(gòu)與分類,基本氨基酸（編碼的蛋白質(zhì)氨基酸）組成蛋白質(zhì)，20種,稀有氨基酸是多肽合成后由基本氨基酸經(jīng)酶促修飾而來,重點(diǎn),2024/3/14,10,,Α氨基酸的一般結(jié)構(gòu),Α氨基酸,與羧基相鄰的Α碳原子（CΑ）上有一個氨基的氨基酸。,COO,CΑ,R,,,H3N,可變的側(cè)鏈,H,2024/3/14,11,（1）R為脂肪烴基的氨基酸（5種）,（一）基本氨基酸（編碼的蛋白質(zhì)氨基酸，20種）,1、按照R基的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類,,,,,,,,,,,,,,,,2024/3/14,12,GLY是唯一不含手性碳原子的氨基酸，因此不具旋光性從GLY至ILE，R基團(tuán)疏水性增加,特點(diǎn),R基均為中性烷基，R基對分子酸堿性影響很小，它們幾乎有相同的等電點(diǎn)。（60±003）,2024/3/14,13,（2）R中含有羥基和硫的氨基酸（共4種）,,,,,,,,2024/3/14,14,★SER的CH2OH基（PKA15）在生理?xiàng)l件下不解離，但在大多數(shù)酶的活性中心都發(fā)現(xiàn)有SER殘基存在?！颯ER和THR的OH往往與糖鏈相連，形成糖蛋白?！顲YS的R中含巰基（SH），具有兩個重要性質(zhì)（1）在較高PH值條件，巰基離解。（2）兩個CYS的巰基氧化生成二硫鍵，生成胱氨酸。★MET在生物合成中是一種重要的甲基供體。,特點(diǎn),2024/3/14,15,（3）R中含有酰胺基團(tuán)（2種）,酰胺基中氨基易發(fā)生氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng),,,2024/3/14,16,（4）R中含有酸性基團(tuán)（2種）ASP、GLU,ASP側(cè)鏈羧基PKA為386，GLU側(cè)鏈羧基PKA為425它們是唯一在生理?xiàng)l件下帶有負(fù)電荷的的兩個氨基酸,,,2024/3/14,17,（5）R中含堿性基團(tuán)（3種）,,,,,,2024/3/14,18,★L(fēng)YS側(cè)鏈氨基的PKA為1053，生理?xiàng)l件下，LYS側(cè)鏈帶有一個正電荷（NH3），側(cè)鏈的氨基反應(yīng)活性增大?！顰RG是堿性最強(qiáng)的氨基酸，側(cè)鏈上的胍基是已知堿性最強(qiáng)的有機(jī)堿，PKA值為1248，生理?xiàng)l件下完全質(zhì)子化。★HIS是PKA值最接近生理PH值的一種（游離氨基酸中為600，在多肽鏈中為735），是在生理PH條件下唯一具有緩沖能力的氨基酸?！颒IS在酶的酸堿催化機(jī)制中起重要作用,特點(diǎn),2024/3/14,19,在280NM處，TRP吸收最強(qiáng)，TYR次之，PHE最弱。,（6）芳香族氨基酸（苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸）,苯丙氨酸（PHE,F）,酪氨酸（TYR,Y）,色氨酸（TRP,W）,2024/3/14,20,（7）、雜環(huán)族氨基酸（2種）,PRO的Α亞氨基是環(huán)的一部分，因此具有特殊的剛性結(jié)構(gòu)。一般出現(xiàn)在兩段Α螺旋之間的轉(zhuǎn)角處，PRO殘基所在的位置必然發(fā)生骨架方向的變化，,2024/3/14,21,嬰兒期ARG（精氨酸）和HIS（組氨酸）供給不足，屬半必需氨基酸。,U必需氨基酸U,成年人THR蘇氨酸VAL纈氨酸LEU亮氨酸ILE異亮氨酸PHE苯丙氨酸TRP色氨酸LYS賴氨酸MET甲硫氨酸,攜（纈氨酸）一（異亮氨酸）兩（亮氨酸）本（苯丙氨酸）單（蛋氨酸，即甲硫氨酸）色（色氨酸）書（蘇氨酸）來（賴氨酸）。攜（寫）一兩本單色書來；一兩色素本來淡些；假設(shè)來寫一兩本書,,（一）賴氨酸（LYSINE）促進(jìn)大腦發(fā)育，是肝及膽的組成成分，能促進(jìn)脂肪代謝，調(diào)節(jié)松果腺、乳腺、黃體及卵巢，防止細(xì)胞退化；（二）色氨酸（TRYPTOPHANE）促進(jìn)胃液及胰液的產(chǎn)生；（三）苯丙氨酸（PHENYLALANINE）參與消除腎及膀胱功能的損耗；（四）蛋氨酸（又叫甲硫氨酸）（METHIONINE）；參與組成血紅蛋白、組織與血清，有促進(jìn)脾臟、胰臟及淋巴的功能；（五）蘇氨酸（THREONINE）有轉(zhuǎn)變某些氨基酸達(dá)到平衡的功能；（六）異亮氨酸（ISOLEUCINE）參與胸腺、脾臟及腦下腺的調(diào)節(jié)以及代謝；腦下腺屬總司令部作用于甲狀腺、性腺；（七）亮氨酸（LEUCINE）作用平衡異亮氨酸；（八）纈氨酸（VILINE）作用于黃體、乳腺及卵巢。（九）組氨酸（HLSTIDINE）作用于代謝的調(diào)節(jié)；,2024/3/14,22,2024/3/14,23,在維持蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)中起著重要（蛋白質(zhì)的疏水核心）。,（1）非極性氨基酸9種,這類氨基酸的側(cè)鏈都能與水形成氫鍵，因此很容易溶于水,（2）不帶電何的極性氨基酸6種,（3）帶負(fù)電荷的氨基酸酸性氨基酸2種,（4）帶正電荷的氨基酸堿性氨基酸3種,2024/3/14,24,非極性氨基酸,在維持蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)中起著重要作用（蛋白質(zhì)的疏水核心）。,2024/3/14,25,2024/3/14,26,不帶電荷的極性氨基酸,這類氨基酸的側(cè)鏈都能與水形成氫鍵，因此很容易溶于水。,2024/3/14,27,帶負(fù)電荷的氨基酸酸性氨基酸,2024/3/14,28,帶正電荷的氨基酸堿性氨基酸,2024/3/14,29,膠原蛋白中的LYS側(cè)鏈氧化時能形成很強(qiáng)的分子間內(nèi)交聯(lián)。,ARG的側(cè)鏈堿性很強(qiáng)，與NAOH相當(dāng)。,HIS是一個弱堿，是天然的緩沖劑，往往存在于許多酶的活性中心。,非極性氨基酸一般形成蛋白質(zhì)的疏水核心，帶電荷的氨基酸和極性氨基酸位于表面。,酶的活性中心HIS、SER、CYS,2024/3/14,30,（二）非編碼的蛋白質(zhì)氨基酸,也稱修飾氨基酸，是在蛋白質(zhì)合成后，由基本氨基酸修飾而來。,（1）4羥脯氨酸（2）5羥賴氨酸這兩種氨基酸主要存在于結(jié)締組織的纖維狀蛋白中。（3）6N甲基賴氨酸存在于肌球蛋白中（4）Г羧基谷氨酸存在于凝血酶原及某些具有結(jié)合CA2離子功能的蛋白質(zhì)中。（5）TYR的衍生物35二碘酪氨酸、甲狀腺素存在于甲狀腺蛋白中（6）鎖鏈素由4個LYS組成存在于彈性蛋白中,2024/3/14,31,,,2024/3/14,32,ΒALA（泛素的前體）、Γ氨基丁酸（神經(jīng)遞質(zhì)）,（三）非蛋白質(zhì)氨基酸,不組成蛋白質(zhì)，但有生理功能的氨基酸,L瓜氨酸、L鳥氨酸是尿素循環(huán)的中間物,1、L型Α–氨基酸的衍生物,2、D型氨基酸,DGLU、DALA（肽聚糖中）、DPHE（短桿菌肽S）,3、Β、Γ、Δ氨基酸,2024/3/14,33,,2024/3/14,35,精氨酸、瓜氨酸、鳥氨酸是尿素循環(huán)的中間物。,三、氨基酸的功能,1、組成蛋白質(zhì),2、一些氨基酸及其衍生物充當(dāng)化學(xué)信號分子,?氨基丁酸，色氨酸衍生物5羥色胺、褪黑激素，都是神經(jīng)遞質(zhì)。甲狀腺素（TYR衍生物），吲哚乙酸（TRP衍生物）都是激素,3、氨基酸是許多含N分子的前體物,核酸的含氮堿基、血紅素、葉綠素的合成都需要氨基酸。,4、一些基本氨基酸和非基本氨基酸是代謝中間物,2024/3/14,36,GLY（甘氨酸）只有一種構(gòu)型,無旋光性THR（蘇氨酸）和ILE（異亮氨酸）有四種光學(xué)異構(gòu)體。其余17種氨基酸有兩種光學(xué)異構(gòu)體L型、D型。構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸均屬L型。,四、氨基酸的構(gòu)型、旋光性和光吸收,1、氨基酸的構(gòu)型,2024/3/14,37,,,2024/3/14,38,L蘇氨酸和D蘇氨酸組成消旋物。L別一蘇氨酸和D別蘇氨酸組成消旋物,2、氨基酸的旋光性,★氨基酸的旋光性（符號和大小）取決于它的R基的性質(zhì)，并與溶液的PH值有關(guān)。,★外消旋物D型和L型的等摩爾混合物。,2024/3/14,39,胱氨酸有三種立體異構(gòu)體L胱氨酸、D胱氨酸、內(nèi)消旋胱氨酸。L胱氨酸和D胱氨酸是外消旋物,★內(nèi)消旋物分子內(nèi)消旋,2024/3/14,40,3、氨基酸的光吸收性,TYR、PHE、TRP的R基含有共軛雙鍵，在220300NM近紫外區(qū)有吸收。,P145,2024/3/14,41,五、氨基酸的酸堿性質(zhì),1、氨基酸在晶體和水溶液中主要以兼性離子形式存在,2、氨基酸的兩性解離和酸堿滴定曲線,（1）PKA/就是氨基酸50解離（堿酸）時溶液的PH值，KA/就是此時溶液的H,（2）當(dāng)HA50解離時，溶液的PH值等于PKA/,（3）PHPKA/時，堿酸（50解離）PHPKA/時，堿酸（＞50解離）PH堿（＜50解離）,2024/3/14,42,甘氨酸的滴定曲線（解離曲線）,2024/3/14,43,起點(diǎn)100G凈電荷1第一拐點(diǎn)50G，50G±平均凈電荷05PHPK1LGG±/GPK1234第二拐點(diǎn)0G±凈電荷0等電點(diǎn)PI597第三拐點(diǎn)50G±，50G平均凈電荷05PHPK2LGG/G±PK296終點(diǎn)100G凈電荷1在PH234和PH960處，GLY具有緩沖能力。,2024/3/14,44,2024/3/14,45,,GLY等電點(diǎn)的計算,2024/3/14,46,,,2,2,,3,,,3,,,,R,NH,NH,COOH,PK,PK,PI,PK,PK,PI,,,,,,,,A,A,A,中性氨基酸,堿性氨基酸,酸性氨基酸,氨基酸等電點(diǎn)的計算,2024/3/14,47,★PHPI時，COOH解離成COO，氨基酸帶負(fù)電荷，在電場作用下向正極移動。,★PHPI時，氨基酸凈電荷為零，在電場中不移動,2024/3/14,48,六、氨基酸的化學(xué)性質(zhì),HNO2,,N2↑,收集反應(yīng)放出的氮?dú)?，可用來測定氨基酸的含量，這種測定氨基酸含量的方法稱為范斯萊克（VANSLYKE）氨基測定法。,1、與亞硝酸反應(yīng),（一）ΑNH2參加的反應(yīng),,,,2024/3/14,49,芐氧甲酰氯（CARBOBENZYLOXYCHLORIDE,CBZCL叔丁氧甲酰氯對甲苯磺酰氯鄰苯二甲酸酐,2、與酰化試劑反應(yīng),氨基酸的氨基與酰氯或酸酐在弱堿溶液中發(fā)生作用時，氨基即被?；??；噭?★?；噭┰诙嚯牡娜斯ず铣芍斜挥米靼被Ｗo(hù)劑。,P136,2024/3/14,50,（DNS氨基酸，黃色熒光）,★丹磺酰氯（DNSCL，5二甲基氨基萘1磺酰氯）常用于多肽鏈NH2末端氨基酸的標(biāo)記和微量氨基酸的定量測定。,,,,2024/3/14,51,★SANGER反應(yīng)（2，4一二硝基氟苯，DNFB）DNP氨基酸被SANGER用來測定多肽的NH2末端氨基酸,3、烴基化反應(yīng),（弱堿）,（黃色）,,氨基酸氨基的一個H原子可被烴基（包括環(huán)烴及其衍生物）取代。,2024/3/14,52,苯異硫氰酸酯，PITC苯氨基硫甲酰衍生物（PTC多肽）苯乙內(nèi)酰硫脲衍生物（PTH氨基酸），無色，可以用層析法分離鑒定。被EDMAN用來鑒定多肽的NH2末端氨基酸,（弱堿）,（CH3NO2/H）,★EDMAN反應(yīng),2024/3/14,53,,,甲醛,甲醛,西佛堿是某些酶促反應(yīng)的中間產(chǎn)物（如轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)的中間產(chǎn)物）。,4、生成西佛堿的反應(yīng)（SCHIFF）,氨基酸的Α氨基能與醛類化合物反應(yīng)生成弱堿（SCHIFF’SBASE）,,,2024/3/14,54,5、脫氨基反應(yīng),氨基酸在生物體內(nèi)經(jīng)氨基酸氧化酶催化即脫去Α氨基而轉(zhuǎn)變成酮酸。,,氨基酸氧化酶,,,2024/3/14,55,（二）Α羧基參加的反應(yīng),1、成鹽、成酯反應(yīng),可以屏蔽羧基活化氨基,,C2H5OH,,干燥，HCL,回流,,R,CH,COOC2O5,NH3CL,,,,,,,H2O,成酯反應(yīng),,NAOH,,,H2O,2024/3/14,56,,,氨基被保護(hù)后，羧基可與二氯亞砜或五氯化磷反應(yīng)，生成酰氯，使羧基活化，在多肽的人工合成中常用。,2、成酰氯的反應(yīng),HN保護(hù)基,RCHCOOH,,,PCL5,HN保護(hù)基,RCHCOOCL,,,POCL3,,,HCL,,,2024/3/14,57,,,,3、疊氮反應(yīng),活化羧基，可用于肽的人工合成。,?；被峒柞ィ╕?；?,YNHO,RCHCNHNH2,,,,?；被狨ｋ?NH2NH2,,YNHO,RCHCNNN,,,,,,H2O,?；被岑B氮,2024/3/14,58,,,將?氨基酸加熱時，可脫去CO2得到胺。,4、脫羧基反應(yīng),2024/3/14,59,茚三酮在弱酸中與Α氨基酸共熱，引起氨基酸的氧化脫氨，脫羧反應(yīng)，最后，茚三酮與反應(yīng)產(chǎn)物氨和還原茚三酮反應(yīng)，生成紫色物質(zhì)（ΛMAX570NM）。,（三）ΑNH2和ΑCOOH共同參加的反應(yīng),1、與茚三酮反應(yīng),,,NH3CO2RCHOH,,,,C,C,C,OH,O,,,,,,,,,,,,,,,,,,C,C,C,O,O,N,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,藍(lán)紫色復(fù)合物,PRO、HYPRO與直接形成黃色化合物（ΛMAX440NM）,,茚三酮,還原茚三酮,還原茚三酮,茚三酮,（ΛMAX570NM）,2024/3/14,61,2、成肽反應(yīng),一個氨基酸的氨基與另一個氨基酸的羧基可以縮合成肽，形成的鍵稱肽鍵。,肽鍵,,,2024/3/14,62,（四）側(cè)鏈R基參加的反應(yīng)用于蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾,略,,2024/3/14,63,（一）基于電荷性質(zhì)差異的分離方法,七、氨基酸的分離和分析,GLU、LEU、HIS、LYS，4種混合樣，在PH60時，泳動方向,1、電泳分離,電泳的基本原理,GLULEUHISLYSPI322598759974,,,,,,2024/3/14,64,2、離子交換柱層析,磺酸型陽離子交換樹脂,氨基酸與樹脂上解離基團(tuán)之間的靜電引力氨基酸與樹脂基質(zhì)聚苯乙烯之間的疏水作用,,,NH3CHCOOH,R,,,,2024/3/14,65,2024/3/14,66,2024/3/14,67,1、紙層析,流動相丁醇、醋酸、水,★基本步驟點(diǎn)樣、展層、現(xiàn)色、定性（定量）,（二）基于分配系數(shù)（極性）差異的分離方法分配層析,分配系數(shù)在流動相中分配系數(shù)越大，移動越快。,固定相吸附的水,逆流分溶原理,2024/3/14,68,2、薄層層析,★基本步驟鋪板、點(diǎn)樣、展層、現(xiàn)色、定性（定量）,★支持劑纖維素粉、硅膠、氧化鋁粉,2024/3/14,69,3、分配柱層析,支持劑纖維素、淀粉、硅膠固定相吸附水流動相；苯酚、正丁醇,2024/3/14,70,固定相涂有薄層液體的惰性顆粒流動相H2、N2、CO2★前提樣品能汽化、熱穩(wěn)定,（三）氣液層析（氣相層析、氣相色譜）,2024/3/14,71,分配層析離子交換層析吸附層析凝膠過濾層析,（四）高效液相層析（HPLC）,2024/3/14,72,第三節(jié)蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)（共價結(jié)構(gòu)）,蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層次,2024/3/14,73,蛋白質(zhì)分子中氨基酸殘基的排列順序含二硫鍵,一級結(jié)構(gòu)（共價結(jié)構(gòu)）,二級結(jié)構(gòu),多肽主鏈中各個肽段借助于相鄰氨基酸之間的氫鍵形成的構(gòu)象。主要有Α螺旋、Β折疊、Β轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲。,超二級結(jié)構(gòu),由兩個以上二級結(jié)構(gòu)單元相互聚集形成的有規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)的組合體如ΑΑ、ΒΑΒ、ΒΒΒ。,2024/3/14,74,2024/3/14,75,2024/3/14,76,2024/3/14,77,2024/3/14,78,大的球蛋白分子中，多肽鏈形成幾個緊密的球狀構(gòu)象，彼此以松散的肽鏈相連，此球狀構(gòu)象是結(jié)構(gòu)域，結(jié)構(gòu)域是多肽鏈的獨(dú)立折疊單位，一般由100200個氨基酸殘基構(gòu)成。,結(jié)構(gòu)域,2024/3/14,79,單鏈蛋白質(zhì)只有一、二、三級結(jié)構(gòu)，無四級結(jié)構(gòu)。,三級結(jié)構(gòu),整條多肽鏈或亞基通過盤旋、折疊，形成緊密的、借各種次級鍵維持的球狀構(gòu)象。,四級結(jié)構(gòu),寡聚蛋白中亞基種類、數(shù)目、空間排布及亞基間相互作用力。,2024/3/14,80,2024/3/14,81,2024/3/14,82,酰胺平面，肽單位間以ΑC原子相隔，構(gòu)成肽鏈。,一、肽和肽鍵的結(jié)構(gòu),肽,一個氨基酸的羧基和另一個氨基酸的氨基脫水縮合而成的化合物。其中的氨基酸單位稱氨基酸殘基。,肽鍵,氨基酸間脫水后形成的共價鍵稱肽鍵（酰氨鍵）。,肽單位,2024/3/14,83,五肽名稱絲氨酰甘氨酰酪氨酰丙氨酰亮氨酸寫法ＮSERGLYTRYALALEU或ＳＧＹＡＬ，,,,,,2024/3/14,84,肽鍵具有部分雙鍵性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)。肽鍵具有平面性，組成肽鍵的4個原子和2個CΑ幾乎處在同一平面內(nèi)（酰氨平面）。肽鍵亞氨基在PH014內(nèi)不解離。,★肽鍵的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),2024/3/14,85,★多肽鏈可以看成由CΑ串聯(lián)起來的無數(shù)個酰胺平面組成,2024/3/14,86,短肽在晶體和水溶液中也是以偶極離子形式存在。肽的酸堿性質(zhì)主要取決于Ｎ端?。危龋埠停枚甩。瑿OOH以及側(cè)鏈Ｒ上可解離的基團(tuán)。在長肽或蛋白質(zhì)中，可解離的基團(tuán)主要是側(cè)鏈基團(tuán)。,二、肽的重要性質(zhì),1、旋光性,一般短肽的旋光度等于其各個氨基酸的旋光度的總和。,2、肽的酸堿性質(zhì),2024/3/14,87,雙縮脲反應(yīng)是肽和蛋白質(zhì)特有的反應(yīng)，游離氨基酸無此反應(yīng)。,3、肽的化學(xué)反應(yīng),肽的Α羧基，Α氨基和側(cè)鏈R基上的活性基團(tuán)都能發(fā)生與游離氨基酸相似的反應(yīng)。,★雙縮脲反應(yīng),凡是有肽鍵結(jié)構(gòu)的化合物都會發(fā)生雙縮脲反應(yīng)，可用于定量分析。,H2NCONHCONH2,雙縮脲,CUSO4NAOH,,,紫紅色化合物,,,2024/3/14,88,★紅細(xì)胞中的巰基緩沖劑。參與氧化還原過程，清除內(nèi)源性過氧化物和自由基，維護(hù)蛋白質(zhì)活性中心的巰基處于還原狀態(tài)。,三、天然存在的活性肽,1、谷胱甘肽GLUCYSGLY,2024/3/14,89,由短桿菌產(chǎn)生的10肽環(huán)。抗革蘭氏陽性細(xì)菌，臨床用于治療化濃性病癥。,2、短桿菌肽（抗生素）,2024/3/14,90,①合成蛋白質(zhì)的剪切、修飾②酶專一性逐步合成（如谷胱甘肽）、③動物腸道可吸收寡肽,3、腦啡肽（5肽）,MET腦啡肽TYRGLYGLYPHEMETLEU腦啡肽TYRGLYGLYPHELEU具有鎮(zhèn)痛作用。,生物體內(nèi)寡肽的來源,2024/3/14,91,4、肽類激素,2024/3/14,92,四、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定,（一）蛋白質(zhì)測序的基本策略,對于一個純蛋白質(zhì)，理想方法是從N端直接測至C端，但目前只能測60個N端氨基酸。,1、直接法（測蛋白質(zhì)的序列）,2、間接法（測核酸序列推斷氨基酸序列）,2024/3/14,93,（1）測定蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的數(shù)目（2）拆分蛋白質(zhì)分子中的多肽鏈。（3）斷裂鏈內(nèi)二硫鍵。（4）分析多肽鏈的N末端和C末端。（5）測定多肽鏈的氨基酸組成。（6）多肽鏈部分裂解成肽段。（7）測定各個肽段的氨基酸順序（8）確定肽段在多肽鏈中的順序。（9）確定多肽鏈中二硫鍵的位置。,（二）蛋白質(zhì)測序的一般步驟,2024/3/14,94,估算氨基酸殘基數(shù)，確定肽鏈數(shù)方法SDSPAGE凝膠過濾法沉降系數(shù)法,（三）測序前的準(zhǔn)備工作,1、蛋白質(zhì)的純度鑒定,要求純度97以上，均一。鑒定方法⑴聚丙烯酰胺凝膠電泳PAGE要求一條帶。⑵DNSCL（二甲氨基萘磺酰氯）法測N端氨基酸。,2、測定蛋白質(zhì)的分子量,2024/3/14,95,酸水解的同時輔以堿水解。確定肽鏈中各種氨基酸出現(xiàn)的頻率,便于選擇裂解方法及試劑。,3、確定亞基種類及數(shù)目,根據(jù)分子量和N末端數(shù),4、拆分多肽鏈，分別分離純化,⑴非共價鍵結(jié)合8MOL/L尿素，SDSPAGE⑵二硫鍵結(jié)合過甲酸氧化SSHCOOOH→SO3HΒ巰基乙醇還原,5、測定氨基酸組成,2024/3/14,96,6、端基分析,N端分析,★DNSCL法,最常用，黃色熒光，靈敏度極高，DNS多肽水解后的DNS氨基酸不需要提取。,★DNFB法,SANGER試劑，DNP多肽，酸水解，黃色DNP氨基酸，有機(jī)溶劑（乙酸乙酯）抽提分離，紙層析、薄層層析、液相等,★PITC法,EDMAN法，逐步切下。無色PTH氨基酸，有機(jī)溶劑抽提，層析,2024/3/14,97,無水肼NH2NH2100℃510H。苯甲醛沉淀氨基酸的酰肼，C端游離氨基酸留在上清中。GLN、ASN、CYS、ARG不能用此法。,C端分析,★肼解法,,2024/3/14,98,羧肽酶A除PRO、ARG、LYS外的所有C端氨基酸羧肽酶B只水解ARG、LYS,羧肽酶法測C末端,★羧肽酶法（PRO不能測）,2024/3/14,99,①溴化氰METX產(chǎn)率85②亞碘酰基苯甲酸TRPX產(chǎn)率70100③NTCB（2硝基5硫氰苯甲酸）XCYS④羥胺NH2OHASNGLY約150個氨基酸出現(xiàn)一次,（四）肽鏈的部分裂解和肽段的分離純化,1、化學(xué)裂解法,2024/3/14,100,胰蛋白酶LYSXX≠PROARGX胰凝乳蛋白酶TYRXX≠PROTRPXPHEX胃蛋白酶PHETRP、TRY、LEUPHETRP、TRY、LEUGLU蛋白酶GLUX（VS蛋白酶）ARG蛋白酶ARGXLYS蛋白酶XLYSPRO蛋白酶PROX,2、酶法裂解,2024/3/14,101,①電泳法ＳＤＳ－ＰＡＧＥ根據(jù)分子量大小分離②離子交換層析法（DEAECELLULOSE、DEAESEPHADEX）根據(jù)肽段的電荷特性分離③反相ＨＰＬＣ法根據(jù)肽段的極性分離凝膠過濾根據(jù)肽段的大小分離,3、肽段的分離純化,要求ＳＤＳ－ＰＡＧＥ單帶ＨＰＬＣ單峰Ｎ端單一（常用ＤＮＳ－CL法）,2024/3/14,102,（1）耦聯(lián)PITC＋H２NABCDPH89，40℃PTCABCD（2）裂解無水三氟乙酸（TFA）ATZAH2NBCD（3）轉(zhuǎn)化PTHAPTC肽苯氨基硫甲酰肽ATZ噻唑啉酮苯胺（一氨基酸）PTH苯乙內(nèi)酰硫脲（一氨基酸）,（五）肽段序列測定及肽鏈的拼接,1、EDMAN法,2024/3/14,103,熒光基團(tuán)或有色試劑標(biāo)記的PITC試劑。4N、N二甲基氨基偶氮苯4’異硫氰酸酯。,2、DNSEDMAN法,用DNS法測N末端，用EDMAN法提供（N1）肽段。,3、有色EDMAN法,2024/3/14,104,儀器原理EDMAN法。1967液相測序儀自旋反應(yīng)器，適于大肽段。1971固相測序儀表面接有丙氨基的微孔玻璃球，可耦連肽段的Ｃ端。1981氣相測序儀用POLYBRENE反應(yīng)器。（聚陽離子）四級銨鹽聚合物液相5NMOL2040肽97氣相5PMOL60肽98,4、用自動序列分析儀測序,2024/3/14,105,16肽，Ｎ端HＣ端ＳＡ法裂解ONSPSEOVERLAHOWTＢ法裂解SEOWTONVERLAPSHO重疊法確定序列HOWTONSEOVERLAPS,5、肽段拼接成肽鏈,2024/3/14,106,2024/3/14,107,2024/3/14,108,①碘乙酰胺封閉SH②胃蛋白酶酶解蛋白質(zhì)

簡介：微量元素與維生素異常的生物化學(xué)檢驗(yàn),1,臨床檢驗(yàn)教研室龔曉華,,1、掌握微量元素與維生素的概念；常用微量元素與維生素的檢測方法及參考區(qū)間；微量元素與維生素在體內(nèi)含量變化的臨床意義,2、熟悉微量元素及維生素的種類、代謝特點(diǎn)及功能,本章教學(xué)要求,2,第一節(jié)微量元素的生化檢驗(yàn),,3,必需微量元素對維持人的生命，保持正常生理功能所必需的，缺乏時會導(dǎo)致某種疾病或嚴(yán)重功能不全的微量元素,4,一、樣本的收集,1、血液樣本是臨床上常用的檢測樣本，常用血清，通常為清晨空腹靜脈血或毛細(xì)血管血，采血后立即檢測。紅細(xì)胞中含有高濃度的鋅，要防止樣本溶血，造成血清鋅濃度偏高。2、尿液樣本可反映體內(nèi)微量元素的代謝和排泄?fàn)顩r。但尿液標(biāo)本影響因素較多，且濃度偏低，只有在特殊情況下才會使用3、毛發(fā)和指甲樣本有一定的局限性4、唾液樣本采樣在早晨空腹時進(jìn)行,5,二、樣本的制備和處理方法,稀釋法高溫干灰化法常壓濕消化法高壓濕消化法燃燒法水解法等,6,三、樣本的分析測定方法,分光光度法原子吸收光譜法電感耦合等離子體發(fā)射光譜法中子活化分析法質(zhì)譜法色譜法等,7,四、主要的微量元素,（一）鐵和總鐵結(jié)合力,血清總鐵結(jié)合力（TIBC）是指血清中的轉(zhuǎn)鐵蛋白全部被鐵飽和所能結(jié)合的鐵量。正常人血液循環(huán)中的轉(zhuǎn)鐵蛋白約30被飽和。鐵飽和度血清鐵和總鐵結(jié)合力的百分比鐵飽和度血清鐵/血清總鐵結(jié)合力100,8,人體內(nèi)鐵分類功能鐵（2/3）、貯存鐵（1/3）含量約為3～5G吸收部位整個消化道均可吸收排泄每日約排泄05～1MG,1、檢驗(yàn)項(xiàng)目,鐵（FE,9,2、檢測方法,亞鐵嗪比色法,血清鐵血清鐵和轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合成復(fù)合物，在酸性介質(zhì)中鐵從復(fù)合物中解離出來，再被還原劑還原成二價鐵，并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物，在波長562NM處有一吸收峰，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)液比較，即可求得血清中鐵的含量。,10,2、檢測方法,亞鐵嗪比色法,總鐵結(jié)合力將過量的鐵標(biāo)準(zhǔn)液加到血清中，使之與未帶鐵的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，多余的鐵被輕質(zhì)碳酸鎂粉吸附除去，然后測定血清中的總鐵含量，即為總鐵結(jié)合力。,11,3、參考區(qū)間,血清鐵男性1130UMOL/L170600UG/DL）女性927UMOL/L5001500UG/DL）血清總鐵結(jié)合力男性5077UMOL/L28004300UG/DL）女性5477UMOL/L30004300UG/DL）,12,4、臨床意義,（1）降低主要見于缺鐵性貧血,缺鐵三個階段鐵減少期儲存鐵減少，血清鐵濃度下降，無臨床癥狀紅細(xì)胞生成缺鐵期（無貧血缺鐵期）血清鐵、鐵蛋白下降，TIBC增高，處于亞臨床癥狀階段缺鐵性貧血期HB和HCT下降，出現(xiàn)不同程度的低色素性貧血。,治療常用硫酸亞鐵,13,4、臨床意義,（2）增加鐵中毒,急性鐵中毒過量誤服亞鐵鹽；食用鐵器煮的食物；靜脈注射鐵劑過量慢性鐵中毒長期過量服用或注射鐵劑；攝入含鐵量高的特殊食品；慢性酒精中毒；多次大量輸血,14,（二）鋅,1、檢驗(yàn)項(xiàng)目,正常成年人含鋅總量為23G鋅存在于人體所有組織中，視網(wǎng)膜、胰腺及前列腺含鋅較高鋅主要由糞便、尿液、汗液、乳腺、頭發(fā)排泄，失血也是丟失鋅的重要途徑。,15,2、檢測方法,3、參考區(qū)間,成人血清鋅90207UMOL/L170600UG/L）尿鋅23199UMOL/L28004300UG/DL）,吡啶偶氮酚比色法,16,4、臨床意義,血清鋅降低見于（1）酒精性肝硬化及慢性肝臟疾?。?）急慢性傳染病，急性組織損傷等（3）腎病綜合征、慢性腎功能不全（4）胃腸道吸收障礙、糖尿病的等（5）肺癌及惡性淋巴瘤,17,血清鋅升高見于（1）兒童不適當(dāng)補(bǔ)鋅（2）工業(yè)污染中的急性鋅中毒（3）甲狀腺功能亢進(jìn)、高血壓等,18,（三）銅,1、檢驗(yàn)項(xiàng)目,經(jīng)消化道吸收，主要吸收部位是十二指腸和小腸上段，少量由胃吸收銅藍(lán)蛋白是運(yùn)輸銅的基本載體肝臟是儲存銅的倉庫，含銅量最高，腦和心臟也含有較多的銅,19,2、檢測方法,3、參考區(qū)間,成人血清銅男性10992198UMOL/L7001400UG/L）女性12562355UMOL/L8001500UG/L）尿銅024047UMOL/24小時,環(huán)己酮草酰二腙比色法,20,血清銅生理性變化（1）性別女性略高于男性（2）年齡隨年齡增長呈增高趨勢（3）月經(jīng)周期與妊娠,4、臨床意義,21,血清銅降低見于（1）肝豆?fàn)詈俗冃匝蹇傘~及CP均降低（2）營養(yǎng)不良、腎病綜合征及燒傷所致的低蛋白血癥,4、臨床意義,22,血清銅升高見于（1）肝內(nèi)外膽汁瘀滯如肝硬化、肝轉(zhuǎn)移癌或其他惡性腫瘤血清銅和CP均升高（2）各種感染、白血病、貧血、心肌梗死及淋巴瘤等（3）風(fēng)濕病、甲亢、妊娠或注射雌激素等,4、臨床意義,23,第二節(jié)維生素異常的生化檢驗(yàn),維生素指存在于大多數(shù)食物中的一類含量少，彼此無關(guān)，但又為維持機(jī)體正常代謝功能所必需的有機(jī)物。在生物體，其主要功能是作為輔酶的成分，調(diào)節(jié)機(jī)體代謝。如果缺乏會出現(xiàn)維生素缺乏癥。,24,維生素缺乏癥的原因1、攝入不足2、機(jī)體的吸收利用率降低3、維生素的需要量相對增高4、食物以外的維生素供給不足,25,一、主要維生素的代謝及其紊亂,按溶解性能分為兩類（一）脂溶性維生素不溶于水，溶于脂類及有機(jī)溶劑。如維生素A、D、E、K。（二）水溶性維生素能溶于水，如維生素B1、B2、B6、B12、C、PP、葉酸。,,,27,二、維生素異常的生化檢驗(yàn),（一）維生素測定的樣品及分析方法,28,（二）維生素代謝異常的檢測,1、維生素A,又稱抗眼干燥癥維生素，有A1（視黃醇）和A2（3脫氫視黃醇）兩種，臨床上多為A1。維生素A只存在于動物性食物中，植物食品中含有維生素A原胡蘿卜素。維生素A在體內(nèi)的活性形式包括視黃醇、視黃醛和視黃酸。,29,維生素A生物學(xué)作用促進(jìn)視覺細(xì)胞感光物質(zhì)的合成與再生參與糖蛋白的合成促進(jìn)生長發(fā)育具有抑癌作用維持機(jī)體正常免疫功能,30,（1）檢測方法,三氯化銻比色法,分光光度法易受Β胡蘿卜素干擾，適用于樣品中含維生素A高的樣品?？焖?、方法簡單、結(jié)果準(zhǔn)確、樣品用量少，最低檢出量08NG。一般以血清視黃醇來代表維生素A的水平，HPLC法是目前測定視黃醇的推薦方法。,31,（2）參考區(qū)間,20UG/L為缺乏，2030UG/L為可疑缺乏,（3）臨床意義,維生素A缺乏夜盲癥、干眼癥、角膜軟化病等維生素A過量急性、慢性及致畸毒性,32,2、維生素D見十五章內(nèi)容,3、維生素E,維生素E是指具有Α生育酚生物活性的一類物質(zhì)。在膽汁酸存在下，維生素E被小腸吸收，多數(shù)通過淋巴進(jìn)入血液，并與CM和VLDL結(jié)合。維生素E存在于多種組織，以脂肪組織最多，其中植物種子油中含量最為豐富。,33,維生素E生物學(xué)作用抗氧化作用，預(yù)防衰老促進(jìn)血紅素代謝促進(jìn)蛋白質(zhì)合成與生殖功能有關(guān),34,（1）檢測方法,熒光法和HPLC法,（2）參考區(qū)間,2630±515UMOL/L,（3）臨床意義,維生素E缺乏溶血性貧血維生素E過量抑制生長，干擾血液凝固出現(xiàn)骨骼萎縮、凝血時間延長等表現(xiàn),35,4、維生素C,又稱抗壞血酸，來源于新鮮水果和綠葉蔬菜中，在小腸被吸收，從尿中排出。在體內(nèi)以垂體、腎上腺等組織中和血液中的血小板和白細(xì)胞中濃度最高，其次肝、腎、心肌、胰等組織含量也高。,36,維生素C生物學(xué)作用促進(jìn)鐵的吸收促進(jìn)膠原蛋白的合成是7Α羥化酶的輔酶參與芳香族氨基酸的代謝參與體內(nèi)氧化還原反應(yīng),37,（1）檢測方法,直接碘量法,還可用分光光度法、熒光法和HPLC法,（2）參考區(qū)間,284795UMOL/L514MG/L114UMOL/L2MG/L可出現(xiàn)癥狀尿液中20MG可診斷為維生素缺乏,38,（3）臨床意義,維生素C缺乏壞血病維生素C過量惡心、腹瀉、鐵的吸收過度、膽固醇升高、腎結(jié)石、膀胱結(jié)石等,39,5、維生素B12,又稱鈷胺素，是唯一含金屬元素的維生素。肝臟中維生素B12含量豐富，在回腸吸收。因結(jié)合的基團(tuán)不同，可形成多種存在形式，如羥鈷胺素、氰鈷胺素、甲鈷胺素、5’脫氧腺苷鈷胺素，后兩者是維生素B12的活化型，也是血液中存在的主要形式。,40,（1）檢測方法,放射免疫法,（2）參考區(qū)間,148660PMOL/L,（3）臨床意義,維生素B12缺乏惡性貧血、出血時間延長、精神抑郁、厭食等維生素B12過量哮喘、濕疹等過敏反應(yīng)，神經(jīng)興奮、心悸等。導(dǎo)致葉酸缺乏,41,6、葉酸,葉酸又稱維生素M，亦稱蝶酰谷氨酸，體內(nèi)活性形式為四氫葉酸（FH4）。動植物食物中都含有葉酸，肝與腎中含量豐富，在小腸吸收，排泄主要通過膽汁和尿排出。,42,（1）檢測方法,放射免疫法,（2）參考區(qū)間,男性861238PMOL/L女性793204PMOL/L,（3）臨床意義,葉酸缺乏巨幼紅細(xì)胞性貧血、同型半胱氨酸血癥葉酸過量損害神經(jīng)系統(tǒng),,,維生素的檢測,,THEEND,THANKYOU,

簡介：臨床生物化學(xué)檢驗(yàn),北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科生化室程歆琦,生物化學(xué),臨床生物化學(xué)的主要任務(wù),分子生物學(xué),免疫學(xué),化學(xué),生物學(xué),,,,,,,,,,,,,探討疾病的發(fā)病機(jī)制,研究病理過程中出現(xiàn)的特異性化學(xué)標(biāo)志物,研究病理過程中體內(nèi)特定成分的改變,,,,病史,臨床查體,,,診斷學(xué)檢查,,,實(shí)驗(yàn)室檢查,影像學(xué)檢查,,,,生物化學(xué)檢驗(yàn),血液學(xué)檢驗(yàn),,病理學(xué)檢驗(yàn),,免疫學(xué)檢驗(yàn),,微生物檢驗(yàn),,糖代謝紊亂的檢查,氧化供能,血糖39～61MMOL/L,,,,,轉(zhuǎn)化成其它物質(zhì)（甘油、脂肪酸、氨基酸等）,合成糖原,超過腎糖閾時經(jīng)尿排出,胰島素,糖異生,,食物中的糖類,糖原分解,,,胰高血糖素、腎上腺素、生長激素、皮質(zhì)醇,血糖測定,葡萄糖氧化酶法葡萄糖O2H2O葡萄糖酸H2O2H2O2苯酚4氨基安替比林醌亞胺520NMH2O顏色深淺在一范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比。空腹血糖（FPG至少8小時不攝入含熱量食物后的血漿葡萄糖含量。參考范圍39～61MMOL/L,GOD,,,POD,臨床意義,升高出現(xiàn)糖尿病癥狀加上隨機(jī)血糖≥111MMOL/L或空腹血糖FPG≥70MMOL/L可診斷糖尿病。,血糖測定的影響因素,全血標(biāo)本放置1H,室溫血糖降低044MMOL/L，4℃降低006～017MMOL/L，因此全血標(biāo)本應(yīng)在2H內(nèi)（最好30分鐘）分離血清或血漿待測。不同抗凝劑對血糖穩(wěn)定性的影響NAF抗凝，采全血3H后，血糖僅降低056MMOL/L，其后一直穩(wěn)定。全血比血漿約低10；空腹血糖，末梢血比靜脈血低022MMOL/L。,糖耐量試驗(yàn)口服或注射一定量葡萄糖后，每間隔一定時間測定血糖水平，稱為糖耐量試驗(yàn)。（GTT）口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）靜脈葡萄糖耐量試驗(yàn)（IGTT）,OGTT試驗(yàn)的方法,將75G無水葡萄糖溶解在300ML水中，坐位取血后5分鐘內(nèi)口服，服糖后每隔30分鐘取血1次，共4次。于采血同時，每隔1小時留取尿液作尿糖試驗(yàn)。,葡萄糖耐量曲線,胰島素測定,測定方法放射免疫法（RIA）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA和化學(xué)發(fā)光法等。臨床意義用于糖尿病的分型診斷及低血糖的鑒別診斷。胰島素正常健康人、某些2型DM等。胰島素升高胰島素瘤、肥胖及2型DM等。胰島素降低1型DM。,C肽測定,,優(yōu)點(diǎn)不被肝臟破壞，只在腎臟降解和代謝；外源性胰島素不含C肽，不與胰島素抗體反應(yīng)；因此C肽測定能夠更好的反映胰島B細(xì)胞的胰島素合成和釋放功能。臨床意義胰島B細(xì)胞瘤胰島素和C肽均升高；外源性胰島素過量引起低血糖胰島素升高，C肽降低；評估胰島素分泌,糖化蛋白,糖化蛋白糖類物質(zhì)通過糖基和蛋白質(zhì)的氨基酸基團(tuán)結(jié)合形成的糖基化產(chǎn)物。影響因素糖化蛋白濃度主要受相關(guān)蛋白質(zhì)半壽期及某一時期內(nèi)平均血糖水平影響，不受飲食、運(yùn)動及每天的血糖波動的影響。臨床意義主要用于評估血糖控制效果，不用于診斷。,糖化血紅蛋白,由葡萄糖和血紅蛋白的氨基酸殘基縮合而成。糖化HB有多種結(jié)構(gòu)，主要成份為HBA1C，約占80％。HBA1C濃度與紅細(xì)胞壽命和6～8周內(nèi)血糖的平均濃度有關(guān)，反應(yīng)檢測前1～2個月內(nèi)的平均血糖水平。國際公認(rèn)的監(jiān)測血糖控制水平的最佳指標(biāo)。,脂類代謝紊亂的檢查,血漿脂蛋白,載脂蛋白的功能構(gòu)成并穩(wěn)定脂蛋白的結(jié)構(gòu)修飾并影響與脂蛋白代謝有關(guān)的酶的活性作為脂蛋白受體的配體，參與脂蛋白與細(xì)胞表面脂蛋白受體的結(jié)合及其代謝。,膽固醇測定膽固醇氧化酶法膽固醇酯H2OCHE膽固醇＋游離脂肪酸膽固醇＋Ｏ2COD△4－膽甾烯酮＋H2O22H2O2＋4－氨基安替比林＋酚POD醌亞胺醌亞胺的最大吸收峰在500NM，吸光度與標(biāo)本中的膽固醇含量成正比．參考范圍血脂異常防治建議規(guī)定，TC＜520MMOL/L為合適范圍，523～569MMOL/L為邊緣性增高，572MMOL/L以上為升高。,,,,酶法測定TG,血漿脂蛋白測定,超速離心分離純化法電泳分離法血漿脂蛋白膽固醇測定,HDLC和LDLC的參考范圍,HDLC我國血脂異常防治建議中提出，HDLC的合適范圍為100MMOL/L。LDLC合適范圍364MMOL/L。NCEPATPⅢ明確要求，高脂血癥患者血LDLC的治療目標(biāo)定為26MMOL/L以下。,載脂蛋白測定,測定方法免疫透射比濁法。測定項(xiàng)目APOAⅠ、APOAⅡ、APOB100、APOCⅡ、APOCⅢ、APOE等。臨床意義APOAⅠ隨HDLC水平變動；APOB隨TC和LDLC水平變動。AS和CHD時APOAⅠ下降、APOB升高。CHD時APOB升高比TC、LDLC升高更有意義；腦血管病時，以APOAⅠ和HDLC下降更為明顯。,水、電解質(zhì)平衡與酸堿平衡紊亂的檢測,緩沖體系,肺,腎臟,水、電解質(zhì)、PH平衡,,,,,內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,一、水平衡,60,70,體液容量及分布,60,細(xì)胞內(nèi)液40,細(xì)胞外液20,血漿5,組織間液15,,,水平衡紊亂,飲水1200食物1000代謝水300,,,,尿1000～2000肺200～400皮膚300～600腸道100～200,,,2500,2500,二、水鈉平衡紊亂,,低血鈉正常多,低體液多,,,低容量性低鈉血癥（低滲性脫水）,高容量性低鈉血癥（低滲性水腫）,低容量性高鈉血癥（高滲性脫水）,高容量性高鈉血癥（高滲性水腫）,高容量正常鈉血（等滲性水腫）,,,,,,,,低容量正常鈉血（等滲性脫水）,體液的電解質(zhì),,CL,NA,NA,CL,K,HPO4,,,,,,,,,,,,,,,,,,,血漿,細(xì)胞間液,細(xì)胞內(nèi)液,K,CAMG,K,CAMG,HCO3HPO4,HCO3HPO4,HCO3,SO4,SO4,SO4,PR,PR,有機(jī)酸,有機(jī)酸,NA,CA,MG,,鉀攝入與排出平衡,尿液80～90,糞便10,汗液,,攝入50～200MMOL/L/天,少吃少排，30～50MMOL/D不吃也排，5～10MMOL/D,細(xì)胞內(nèi)外的轉(zhuǎn)移,跨細(xì)胞轉(zhuǎn)移,,NAKATPASE,胰島素NAKATPASE進(jìn)K＋E高進(jìn)低出酸堿平衡酸出堿進(jìn),鉀細(xì)胞內(nèi)外平衡,參與細(xì)胞內(nèi)的正常代謝維持細(xì)胞內(nèi)容量、離子、滲透壓及酸堿平衡維持神經(jīng)肌肉的應(yīng)激性維持心肌的正常功能,鉀的生理功能,鉀濃度的調(diào)節(jié)進(jìn)入K過多血K暫時升高刺激胰島素分泌刺激醛固酮分泌K轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)遠(yuǎn)由小管分泌K尿K升高血K恢復(fù)正常,,,,,,,,,,,,,,,離子選擇電極法檢測電極表面電位的改變，依鉀電極、鈉電極或氯電極與參比電極表面電位變化的大小計算樣本中鉀離子、鈉離子或氯離子的含量。參考范圍血清鉀35～55MMOL/L血清鈉135～145MMOL/L血清氯96～106MMOL/L腦脊液氯120～130MMOL/L,鉀、鈉、氯測定,低鉀血癥K55MMOL/L,原因和機(jī)制,,輸入過多,從細(xì)胞內(nèi)移出,排泄障礙,,,腎臟,,,酸中毒,細(xì)胞損傷,輸液過多、過快,血液氣體分析,所謂的血?dú)馐侵秆褐兴难鯕夂投趸細(xì)怏w。是評價病人呼吸、氧化及酸堿平衡狀態(tài)的必要指標(biāo)血?dú)夥治鲋饕?xiàng)目；血液氧分壓、二氧化碳分壓、和PH值,氧的運(yùn)輸,CTO2O2HBCDO2氧在血液中大部分是通過與血液中的HB結(jié)合成氧合血紅蛋白而參與運(yùn)輸?shù)摹Ｎ锢砣芙獾难魿DO2量極少，僅占血液總量的23％,HB與O2可逆結(jié)合的程度，取決于血液的氧分壓。當(dāng)PO2升高時，促進(jìn)O2與HB結(jié)合，PO2降低時O2與HB解離。血液HBO2的量與HB總量之比稱之為血紅蛋白氧飽和度。以PO2值為橫座標(biāo)，血氧飽和度為縱座標(biāo)，求得血液中HBO2的O2解離曲線，稱為HBO2解離曲線。,,,,HH公式,,血液PH主要是由HCO3/H2CO3緩沖對所決定，據(jù)HH公式運(yùn)算PH6103LOGHCO3代謝因素H2CO3ΑPACO2呼吸因素（Α為CO2在血液中的溶解系數(shù)）,,,,血?dú)夥治鰞x測定原理及儀器結(jié)構(gòu),目前的血?dú)夥治鰞x主要由專門的氣敏電極分別測出O2、CO2和PH三個數(shù)據(jù)，再參考HB及體溫的數(shù)據(jù)計算出其他診斷參數(shù)。其結(jié)構(gòu)組成基本一般包括電極（PH、PO2、PCO2）、進(jìn)樣室、CO2空氣混合器、放大器元件、數(shù)字運(yùn)算顯示屏和打印機(jī)等部件，進(jìn)行自動化分析，其所需樣品少，檢測速度快而準(zhǔn)確。,PH,正常值動脈血PH735～745,意義PH↓失代償性酸中毒PH↑失代償性堿中毒,PH,無酸堿平衡紊亂代償性酸堿平衡紊亂酸堿中毒并存相互抵消,動脈血二氧化碳分壓,意義①判斷肺泡通氣狀態(tài)②判斷呼吸性酸堿失衡的性質(zhì)原發(fā)性↑呼酸原發(fā)性↓呼堿③判斷呼吸衰竭類型,正常值男性35～46MMHG,標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽SB,意義排除了呼吸因素的影響反映代謝性酸堿紊亂,正常值21～25MMOL/L,實(shí)際碳酸氫鹽AB,正常值21～26MMOL/L,受呼吸和代謝兩方面的影響當(dāng)AB＝SB＝21～26MMOL/L時，正常AB，SB同時升高或降低，反映代謝因素AB＞SB，表示CO2有潴留，合并呼吸因素AB＜SB，表示CO2排出過多，合并呼吸因素,堿剩余BE,意義BE正值增大－代堿BE負(fù)值增大－代酸,正常值0±3MMOL/L,概念標(biāo)準(zhǔn)條件下，將1升全血或血漿滴定到PH74所需的酸或堿的量。,動脈血氧分壓（PAO2）參考值75105MMHGPAO2越高，HBO2越高反映肺通氣或和換氣功能PAO255MMHG提示有呼吸衰竭；PAO230MMHG既有生命危險。,氧分壓,陰離子間隙AG,概念是指血漿中未測定陰離子量與未測定陽離子量的差值。,AGUAUC,NAKUCCLHCO3UA,UAUCAGNAKCLHCO3,血NAK濃度減去血CL－和HCO3－的濃度，等于血漿中未測定陰離子UA與未測定陽離子UC的差值。,陰離子間隙AG,意義①AG升高［H］增加引起的代謝性酸中毒；②AG正常HCO3原發(fā)性降低而血氯升高的代謝性酸中毒。,正常范圍NACLHCO37～14MMOL/LNAKCLHCO310～18MMOL/L,酸堿平衡及調(diào)節(jié),酸堿平衡的調(diào)節(jié),緩沖系統(tǒng)肺腎,近端腎小管泌H＋,遠(yuǎn)端腎小管泌H＋重吸收HCO3－,腎小管泌NH4＋（NH3）,HENDERSONHASSELBALCH方程,611374,酸堿平衡紊亂的類型,PH＝,HCO3,,H2CO3（PCO2）,,酸中毒,,堿中毒,代謝性,酸中毒,,,堿中毒,,呼吸性,酸中毒,,堿中毒,

簡介：骨代謝紊亂和相關(guān)元素的生物化學(xué)檢驗(yàn),掌握鈣和磷的代謝及調(diào)節(jié)；鈣和磷代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)指標(biāo)；鎂的代謝及代謝紊亂熟悉臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目在骨代謝疾病診治中的應(yīng)用了解骨代謝紊亂的生化檢驗(yàn)；,本章教學(xué)要求,2,3,第一節(jié)概述,無機(jī)物礦物質(zhì)鈣、磷、鈉、鎂、鐵、氟等鹽羥磷灰石結(jié)晶和磷酸氫鈣有機(jī)基質(zhì)蛋白質(zhì)、I型膠原、多糖類物質(zhì)、脂類、糖蛋白復(fù)合體骨組織骨組織細(xì)胞骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞骨纖維,,,骨的組成,,,成骨細(xì)胞合成有機(jī)基質(zhì),并通過新合成的基質(zhì)控制無機(jī)物,促進(jìn)骨形成。破骨細(xì)胞通過產(chǎn)生酸和蛋白水解酶分解無機(jī)物和水解有機(jī)基質(zhì),促進(jìn)骨吸收。,成骨細(xì)胞,,,4,,,骨形成,骨吸收,,5,6,第二節(jié)鈣和磷代謝紊亂的生化檢驗(yàn),一、鈣和磷的代謝及調(diào)控,（一）鈣的代謝,吸收在活性維生素D3的調(diào)節(jié)下，由十二指腸主動吸收，PH影響鈣的吸收，堿性環(huán)境吸收減少，酸性環(huán)境促進(jìn)吸收。排泄腸道和腎,,,,,人體中鈣的存在形式,細(xì)胞外鈣,血鈣血漿中的鈣稱為血鈣，分為可擴(kuò)散鈣和不擴(kuò)散鈣兩大類。,不擴(kuò)散鈣與離子鈣之間的互相轉(zhuǎn)化,蛋白結(jié)合鈣CA2小分子結(jié)合鈣,,,,,當(dāng)H升高時，蛋白結(jié)合體鈣向離子鈣轉(zhuǎn)移當(dāng)H降低時，血漿離子鈣降低，而血漿總鈣量可無變化，此時可出現(xiàn)低鈣抽搐現(xiàn)象。PH每改變01單位,血清游離鈣濃度改變005MMOL/L在測定CA2同時要測PH。,10,（二）磷的代謝,1吸收部位小腸上段（空腸最快，70）方式食物中的磷主要指有機(jī)磷酸脂和磷脂，在磷酸酶的作用下生成無機(jī)磷酸鹽，才能被吸收；影響因素腸道的PH食物中金屬離子的影響鈣鎂鐵體內(nèi)鈣的利用情況2排泄腎是磷排泄的主要器官，腎排磷占總排磷的70％，其余30％由糞便排泄。,11,血中的磷以有機(jī)磷和無機(jī)磷兩種形式存在。血中的磷通常指血漿中的無機(jī)磷，主要以HPO42的形式存在，占80％85％以上。正常成人血漿無機(jī)磷含量為081145MMOL/L。,血磷,血鈣和血磷,骨鈣骨磷,,,沉積,溶解,腸,食物鈣磷,,,糞鈣,,,吸收,排出,組織細(xì)胞,,,利用,排出,腎,,,排泄,重吸收,,尿磷,鈣磷的代謝,12,1、甲狀旁腺素（PTH）的調(diào)節(jié),甲狀旁腺素合成及分泌,甲狀旁腺主細(xì)胞,前甲狀旁腺素原115AA,甲狀旁腺素原90AA,PTH84AA,,,,13,（三）鈣磷代謝的激素調(diào)節(jié),PTH的生理作用升高血鈣、降低血磷,（1）對骨的作用動員骨鈣入血，使血鈣升高增加骨吸收和骨生成，骨吸收大于骨生成（2）對腎的作用,鈣重吸收,,磷重吸收,,,,保鈣排磷,14,（3）對維生素D和小腸的作用,PTH,,激活腎臟1Α羥化酶,,活性D3增加,腸道吸收鈣增加,,,,15,,,7脫氫膽固醇,VITD3的合成,,16,2、活性維生素D的調(diào)節(jié),,,活性維生素D的生成,17,2、活性維生素D的調(diào)節(jié),活性維生素D,活性維生素D的生理作用升高血鈣、升高血磷,基本途徑,活性維生素D,靶細(xì)胞上維生素D受體,激素－受體復(fù)合物,二聚體,維生素D反應(yīng)元件,相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯,鈣磷代謝調(diào)控,,,視黃醛X受體,,,,,,18,（1）對小腸的作用促進(jìn)小腸對鈣磷的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn),小腸粘膜上皮細(xì)胞維生素D受體,活性維生素D,,相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯,鈣結(jié)合蛋白表達(dá)上調(diào),CA2MG2ATP酶增加,,,,,,,小腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)增加,19,（2）對骨的作用溶骨和成骨的雙重作用,活性維生素D,增加破骨細(xì)胞數(shù)量和活性,協(xié)同PTH增加破骨細(xì)胞數(shù)量,增加血鈣,增加膠原,,,,促進(jìn)溶骨（低血鈣時）,促進(jìn)成骨（高血鈣時）,,,（3）對腎臟的作用促進(jìn)腎小管對鈣、磷的重吸收,20,3、降鈣素（CALCITONIN，CT）,降鈣素的合成與分泌,甲狀腺濾泡旁細(xì)胞合成和分泌單鏈多肽，由32個氨基酸殘基組成血鈣是影響CT分泌的主要因素,21,抑制破骨、促進(jìn)成骨抑制腎小管對鈣、磷的重吸收抑制腎維生素D1Α羥化酶活性因雌激素減少而減少,降鈣素的生理作用降低血鈣、降低血磷,22,其主要作用機(jī)制為,標(biāo)本血清或低濃度肝素抗凝血漿測定方法滴定法、比色法、火焰光度法、原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法等決定性方法同位素稀釋質(zhì)譜法（IFCC）參考方法原子吸收分光光度法（IFCC）常規(guī)方法鄰甲酚酞絡(luò)合酮（OCPC）法（衛(wèi)生部）參考區(qū)間22265MMOL/L,23,二、鈣和磷代謝紊亂的生化檢驗(yàn),（一）血清鈣總鈣測定,,OCPC法,1測定原理,2方法評價,操作簡便、快速、穩(wěn)定，同時適于手工和自動化分析反應(yīng)體系的PH值對結(jié)果影響較大,24,,,離子鈣測定,標(biāo)本血清、低濃度肝素抗凝血漿或全血測定方法生物學(xué)法、透析法、超濾法、金屬指示劑法、ISE法等參考方法ISE法參考區(qū)間115135MMOL/L,25,ISE法,1測定原理,鈣離子選擇電極膜與鈣離子結(jié)合，如果鈣離子在膜內(nèi)外兩面分布不均，將產(chǎn)生一個跨膜電位，ISE的電位與溶液中的被測離子濃度的對數(shù)成正比,2方法評價,操作簡便、快速、重復(fù)性好準(zhǔn)確度和敏感性高，影響因素少,26,臨床意義,1、血清鈣升高,,27,（1）惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移（2）部分藥物引起腎臟重吸收鈣增多（3）維生素D中毒致腸道對鈣吸收增加（4）原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)和PTH異位分泌,臨床意義,2、血清鈣降低,,28,（1）低蛋白血癥使血液總鈣降低（2）急慢性腎衰竭致血磷升高，鈣磷乘積下降，活性維生素D功能發(fā)生障礙，使與白蛋白結(jié)合的鈣隨白蛋白形腎臟排出（3）甲狀旁腺或甲狀腺手術(shù)的失誤所引起的甲狀腺功能異常（4）佝僂病,,,標(biāo)本血清、肝素化血漿常用方法磷鉬酸還原法、磷鉬酸紫外分光光度法、酶法、原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法等決定性方法同位素稀釋質(zhì)譜法常規(guī)方法磷鉬酸紫外分光光度法、磷鉬酸還原法參考區(qū)間084145,29,（二）血清磷,,磷鉬酸還原法,1測定原理,2方法評價,方法簡便、快速，穩(wěn)定體系中加入TRITONX100等表面活性劑，則不需要除蛋白即可直接測定,30,酸性環(huán)境,,,,1測定原理,2方法評價,顯色穩(wěn)定，線性范圍寬，干擾因素小，可用于自動化分析所用的酶試劑比較貴血清磷測定的發(fā)展方向,31,黃嘌呤氧化酶法,臨床意義,1、血清磷升高,,32,（1）慢性腎臟疾病、急慢性腎衰竭患者排磷減少（2）甲狀腺功能亢進(jìn)同時出現(xiàn)高鈣血癥與高磷血癥（3）磷酸鹽攝入過多（4）乳酸中毒、痛癥酸中毒、細(xì)胞溶解致細(xì)胞內(nèi)磷酸鹽外移,臨床意義,2、血清磷降低,,33,（1）使用葡萄糖、營養(yǎng)素、胰島素致磷向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移（2）甲狀旁腺功能亢進(jìn)使無機(jī)磷隨尿排出增多（3）嘔吐、腹瀉、維生素D缺乏致腸道磷酸鹽吸收減少,34,第三節(jié)鎂代謝紊亂的生化檢驗(yàn),鎂存在于除脂肪以外的所有動物組織及植物性食品中，日攝入量為250MG，其中2/3來自谷物和蔬菜,1、吸收部位主要在回腸方式主動轉(zhuǎn)運(yùn)過程2、排泄消化道排泄、腎排泄（主要途徑）,35,3、血漿中鎂的濃度約為067104MMOL/L，主要以三種形式存在55是游離的、30與蛋白結(jié)合、15與陰離子形成復(fù)合物。4、骨骼中的鎂主要以MG3PO42和MGCO3的形式存在，吸附于磷灰石表面。5、紅細(xì)胞中鎂含量約為血清鎂的3倍，測定血清鎂時應(yīng)防止溶血。,36,細(xì)胞內(nèi)鎂的功能1、是體內(nèi)300多種酶的輔因子，廣泛參與各種生命活動。2、參與酶底物形成MGATP、MGGTP3、是許多酶系統(tǒng)的變構(gòu)效應(yīng)激活因子4、在氧化磷酸化、糖酵解、細(xì)胞復(fù)制、核苷酸代謝以及蛋白生物合成中起著重要作用。,37,細(xì)胞外鎂的功能1、細(xì)胞內(nèi)鎂的來源；2、降低神經(jīng)、肌肉興奮性。3、MG2在突觸的神經(jīng)末梢競爭性抑制CA2的進(jìn)入，影響神經(jīng)遞質(zhì)在神經(jīng)肌肉連接點(diǎn)的釋放。4、MG2濃度減少會導(dǎo)致神經(jīng)肌肉應(yīng)急性增加。,38,標(biāo)本血清（非鈣離子絡(luò)合抗凝劑）測定方法比色法、原子吸收分光光度法、酶法、同位素稀釋質(zhì)譜法等決定性方法同位素稀釋質(zhì)譜法參考方法原子吸收分光光度法常規(guī)方法甲基麝香草酚藍(lán)（MTB）比色法鈣鎂試劑法參考區(qū)間067104MMOL/L,血清鎂測定,臨床意義,1、血清鎂升高,,39,（1）腎功能不全及急性腎功能不全少尿期致排出鎂減少（2）內(nèi)分泌疾病如甲狀腺功能減退癥（粘液性水腫）、甲狀旁腺功能減退癥、愛迪森病、未治療的糖尿病昏迷等,臨床意義,2、血清鎂降低,,40,（1）鎂攝入不足（2）鎂的消化道丟失，如長期禁食、消化不良、慢性腹瀉、嚴(yán)重嘔吐等（3）鎂的尿路丟失，如慢性腎炎多尿期或長期使用利尿藥后（4）鎂離子在細(xì)胞內(nèi)外重新分布，如胰島素治療糖尿病酮癥酸中毒、糖原合成需鎂等,,41,第四節(jié)骨代謝紊亂的生化檢驗(yàn),（一）骨形成標(biāo)志物1、骨鈣素2、骨性堿性磷酸酶3、I型前膠原羧基前肽和I型前膠原氨基酸前肽,,42,第四節(jié)骨代謝紊亂的生化檢驗(yàn),（二）骨吸收標(biāo)志物1、吡啶酚和脫氧吡啶酚2、I型膠原C端肽和N端肽3、抗酒石酸酸性磷酸酶4、尿羥脯氨基,,43,第五節(jié)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目在骨代謝疾病診治中的應(yīng)用,骨質(zhì)疏松癥（OP）佝僂病和骨軟化病變形性骨炎,,THEEND,THANKYOU,

簡介：第十七章妊娠的生物化學(xué)檢驗(yàn),廣東醫(yī)學(xué)院臨床生物化學(xué)教研室DEPARTMENTOFCLINICALBIOCHEMISTRYOFGUANGDONGMEDICALCOLLEGE,BRIEFCONTENTS,第一節(jié)妊娠的生物化學(xué)特征第二節(jié)正常及異常妊娠的生物化學(xué)檢驗(yàn)第三節(jié)孕婦與胎兒的健康評價第四節(jié)妊娠與相關(guān)疾病的生物化學(xué)檢驗(yàn)第五節(jié)新生兒代謝特點(diǎn)與新生兒篩查,MAJOROBJECTIVES,了解妊娠期母體的代謝改變和內(nèi)分泌改變；妊娠與相關(guān)疾病的生物化學(xué)檢驗(yàn)。熟悉正常妊娠和異常妊娠；孕婦的健康評價；新生兒代謝特點(diǎn)。掌握正常和異常妊娠的生物化學(xué)檢驗(yàn)；胎兒的健康評價；新生兒疾病篩查。重點(diǎn)母體血清及尿液HCG的檢測；胎兒肺成熟度評價實(shí)驗(yàn)。難點(diǎn)胎兒肺成熟度評價實(shí)驗(yàn)；新生兒篩查。,第一節(jié)妊娠及其生物化學(xué)特征,子宮變化最大；卵巢、輸卵管、陰道、會陰有不同程度的變化,乳房也有明顯；母體產(chǎn)生大量激素；,（一）胚胎和胎兒發(fā)育妊娠（PREGNANCY）胚胎EMBRYO和胎兒FETUS在母體內(nèi)發(fā)育成長的過程。卵子受精（FERTILIZATION）妊娠的開始胎兒及其附屬物自母體排出妊娠終止,一、妊娠,正常妊娠持續(xù)約40周末次月經(jīng)（LMP）月經(jīng)第一天三個階段每段三個月，略長于13周1早期妊娠從LMP第一天起至滿13周。,2中期妊娠13至滿26周。胎兒生長迅速，許多重要器官開始成熟。3晚期妊娠2640周。胎兒器官完全成熟的時期。預(yù)產(chǎn)期EDC胎兒的預(yù)計出生日期正常分娩發(fā)生于3742周內(nèi)。,卵子從卵巢排出↓輸卵管↓傘部的撿拾作用輸卵管↓收縮迅速送至壺腹部↓受精卵孕卵進(jìn)入宮腔↓約3～4天的細(xì)胞反復(fù)分裂卵裂↓輸卵管子宮端桑椹胚↓宮腔繼續(xù)分裂,體積增大稱為囊胚,（一）胚胎和胎兒的發(fā)育,（二）胎盤（PLACENTA）,是胎兒與母體之間物質(zhì)交換的重要器官，是胚胎與母體組織的結(jié)合體，由羊膜、葉狀絨毛與底蛻膜構(gòu)成。具有多種功能。,1胎盤發(fā)育妊娠6～7周時開始形成，3個月時完全形成，4～5個月發(fā)育基本結(jié)束。妊娠開始8周的孕體稱胚胎9周起稱胎兒,2胎盤的功能胎盤具有物質(zhì)交換、代謝、分泌激素、防御以及合成功能，是維持胎兒在子宮內(nèi)營養(yǎng)發(fā)育的重要器官。,3胎盤激素蛋白類激素HCG胎盤催乳素（PLACENTALLACTOGEN,PL）類固醇激素（STEROIDSHORMONE）孕酮、雌酮（E1）、雌二醇（E2）、雌三醇（E3）,（1）蛋白類激素①絨毛膜促性腺激素（HCG）糖蛋白、含Α、Β亞基，以11～12個SS互聯(lián)而成。Α亞基92個氨基酸殘基，Β亞基145個氨基酸殘基Β亞基具有特異性；HCG、FSH、LH、TSH的Α亞基高度同源。產(chǎn)生部位合體滋養(yǎng)層細(xì)胞,分泌自末次月經(jīng)第一天算起約40天HCG迅速增加，孕8～10周達(dá)高峰，12周后迅速下降，直至分娩末期一直保持低水平；約產(chǎn)后5～6天轉(zhuǎn)陰性。清除經(jīng)肝臟和腎臟清除，首次晨尿標(biāo)本和血清中的HCG濃度有可比性。生物活性妊娠早期維持黃體繼續(xù)發(fā)育，利于妊娠的繼續(xù)。,表171妊娠期血清HCG濃度變化,妊娠期（周）受精后距末次月經(jīng)HCGU/L24510035200300461000080000512714900005000001324152650008000026382740300015000,,,,②人類胎盤催乳素（HPL）多肽類激素，含191個氨基酸殘基產(chǎn)生部位合體滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌動態(tài)受孕后3周即可在絨毛內(nèi)測出，孕5～8周用RIA在母血內(nèi)測出HPL；隨妊娠進(jìn)展HPL持續(xù)增加至妊娠末期。母血中HPL濃度與胎盤大小成正比。,生物活性①促進(jìn)乳腺發(fā)育，為產(chǎn)后泌乳作準(zhǔn)備；②參與代謝FFA增加；抑制母體細(xì)胞攝取葡萄糖；促進(jìn)蛋白質(zhì)合成。,PL測定的臨床意義①診斷滋養(yǎng)層細(xì)胞疾病，葡萄胎患者血中PL值較正常妊娠低，但HCG反而增高，HCG/PL比值比正常妊娠高100倍。②早孕時連續(xù)測定PL，可預(yù)測先兆流產(chǎn)，此時PL值偏低或呈下降趨勢。③妊娠35周后血漿PL低于40ΜG/ML提示先兆子癇、胎盤功能不良或胎兒宮內(nèi)窒息。,孕酮和雌激素維持妊娠期子宮內(nèi)膜的正常形態(tài)、功能、充足血供并為分娩做準(zhǔn)備。孕酮由胎盤利用母體的CH合成，從妊娠36天起胎盤即能生產(chǎn)足夠孕酮，到37孕周達(dá)最高峰，一直保持到臨產(chǎn)前才稍降。,（2）胎盤分泌的類固醇激素,胎盤缺乏17Α羥化酶，因此所有雌激素都從中間產(chǎn)物17羥孕酮合成。硫酸脫氫表雄酮DHEA16ΑOHDHEAS,,胎盤雌激素的前體,,孕酮,17羥孕酮,DHEA,膽固醇,孕烯醇酮,,17羥孕雌醇酮,,T、E1E2,,,,,,,17Α羥化酶缺陷阻斷步驟,胎盤雌激素合成示意圖,17Α羥化酶缺陷阻斷步驟,,衡量胎盤功能的生化指標(biāo)血E3和24小時尿E3血E3常用，反映瞬間的變化，敏感性高，快速測定方法放射免疫法，化學(xué)發(fā)光法等15ΜG/L正常值150U/L）。,（二）尿液HCG定性試驗(yàn)?zāi)z體金免疫層析法（GICA）檢測限為50U/L，需2MIN30MIN完成GICA原理免疫反應(yīng)和物理層析快速、敏感和操作簡便，是目前應(yīng)用最廣泛的篩查方法。,母體血清HCG定量測定測定方法RIA，CIA，ELISA等最低檢測限1U/L2U/L影響因素溶血、污染特異性高，假陽性結(jié)果低用途診斷正常妊娠和異常妊娠篩查DOWN綜合征和18三體綜合征腫瘤標(biāo)志物,二、異常妊娠異位妊娠（ECTOPICPREGNANCY）妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病（GESTATIONALTROPHOBLASTICDISEASE，GTD）,（一）異位妊娠受精卵在子宮體腔以外著床稱為異位妊娠。異位妊娠依受精卵在子宮體腔外種植部位不同而分為輸卵管妊娠卵巢妊娠腹腔妊娠闊韌帶妊娠子宮頸妊娠子宮角妊娠,異位妊娠的診斷囊胚著床于子宮體以外典型三聯(lián)癥下腹疼痛、陰道流血和附件包塊。HCG濃度變化大，0200KU/L，平均1000U/L。低于同期正常妊娠值。血HCG陰性可排除異位妊娠，陽性則需要鑒別正?；虍愇蝗焉铩３暀z查受孕24天后宮體未發(fā)現(xiàn)孕囊早期發(fā)現(xiàn)、及時終止妊娠,二妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病及檢驗(yàn),1、葡萄胎病變的絨毛失去吸收營養(yǎng)的功能，致使胚胎早期死亡，經(jīng)自溶而被吸收。2、惡性葡萄胎葡萄胎的小泡樣組織已超過子宮腔范圍，侵入子宮肌層深部或在其它部位發(fā)生轉(zhuǎn)移者。3、絨癌繼發(fā)于正常或異常妊娠之后臨床表現(xiàn)停經(jīng)，陰道出血，子宮異常增大等。,葡萄胎,妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病生化檢驗(yàn)HCG遠(yuǎn)高于相應(yīng)孕周正常水平，常超過1000KU/L，且停經(jīng)12周后仍繼續(xù)上升。惡性葡萄胎診斷葡萄胎排空后＞2個月尿妊娠試驗(yàn)仍持續(xù)陽性或一度陰性后有轉(zhuǎn)陽性者，診斷性刮宮。,,第三節(jié)孕婦與胎兒的健康評價,一、孕婦的健康評價,相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢測紅細(xì)胞比積、ABO血型、RH血型、紅細(xì)胞抗體篩查、尿液分析、風(fēng)疹病毒效價、脫落細(xì)胞涂片、快速血漿反應(yīng)素實(shí)驗(yàn)、淋球菌培養(yǎng)以及乙肝表面抗原檢查等。對高危人群應(yīng)作肝炎病毒、HIV及禁忌藥物的篩查。,二、胎兒的健康評價,胎兒肺成熟度胎兒先天性缺陷,（一）胎兒肺成熟度評價試驗(yàn),檢測胎兒肺表面活性物質(zhì)的方法主要有六種1磷脂酰膽堿（卵磷脂）／鞘磷脂比值（L／S）2羊水雙飽和磷脂酰膽堿（DSPC）測定3磷脂酰甘油PHOSPHATIDYLGLYCEROL，PG測定4泡沫穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)（FOAMSTABILITYINDEX，F(xiàn)SI）5熒光偏振（FLUORESCENCEPOLARIZATIONASSAY，F(xiàn)PA6薄層小體計數(shù)（LAMELLARBODIESCOUNTS）,（1）PSPULMONARYSURFACTANT肺泡表面活性物質(zhì)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分泌多種脂類、蛋白質(zhì)和碳水化合物組成脂類主要成分，約占85％磷脂酰膽堿（卵磷脂）85％是DSPC磷脂酰甘油（PG）磷脂酰肌醇（PI）鞘磷脂,胎齡2024周時出現(xiàn)，35周后迅速↑覆蓋肺泡上皮表面，穩(wěn)定肺泡內(nèi)壓PS缺乏肺泡表面張力↑，呼氣時肺泡塌陷，吸氣時必須增加壓力，致氣道過度膨脹，呼吸困難，長期反復(fù)導(dǎo)致肺不張。,羊膜穿刺術(shù),取樣最佳時間妊娠16周20周用于染色體分析、酶和蛋白質(zhì)檢測、性染色質(zhì)檢查、DNA分析等。,（2）標(biāo)本收集和處理標(biāo)本羊水標(biāo)本收集的注意事項(xiàng)（1）多胎妊娠時每個羊膜腔均應(yīng)取樣（2）防污染（3）及時檢測，否則應(yīng)低溫保存，4℃冷藏，若推遲一周以上檢測，應(yīng)20℃或70℃冷凍保存（4）檢測前需輕輕顛倒混勻標(biāo)本,（3）羊水卵磷脂/鞘磷脂比率（L/S）和雙飽和磷脂酰膽堿（DSPC）1DSPC肺泡表面活性物質(zhì)（PS的最主要成分占卵磷脂的85％大部分來自胎兒肺，與胎兒肺成熟度相關(guān)聯(lián),2鞘磷脂PS的次要成分廣泛分布于細(xì)胞膜幾乎都來自不成熟的肺，作為測定卵磷脂的參照物。L/S隨妊娠期延長而增加。在34周36周時突然增加，與胎兒肺成熟度密切相關(guān)。,（4）測定肺成熟度組合試驗(yàn)L/S比率DSPC/總卵磷脂比率PG和PI/總磷脂比率PG妊娠32周出現(xiàn)，隨妊娠期增加而↑PI妊娠36周達(dá)到高峰,,結(jié)果分析提示肺成熟L/S20，診斷符合率達(dá)9798DSPC5MG/L糖尿病孕婦L/S3DSPC10MG/LPG在丙酮沉淀部分所占比例3％PG20ΜMOL/L上述指標(biāo)均不用于提示肺不成熟。,自學(xué)（5）泡沫穩(wěn)定性指數(shù)（6）熒光偏振法（FPA）（7）薄層小體計數(shù),（二）胎兒先天性缺陷常用篩查指標(biāo),（一）常見胎兒先天性缺陷,（1）神經(jīng)管缺陷（2）DOWN綜合征（3）18三體綜合癥,（二）胎兒先天缺陷常用篩查指標(biāo)1母體血清、羊水AFP測定85％95％開放神經(jīng)管畸形腦脊液AFP↑直接進(jìn)入羊水，達(dá)10倍以上食管閉鎖而不能吞咽羊水將AFP消化，或先天性腎病及臍疝等都可使羊水中AFP↑,2母體血清HCG篩查DOWN綜合征和18三體綜合征3母體血清游離E3預(yù)報胎兒患DOWN綜合征的風(fēng)險注意上述指標(biāo)僅為早期的篩查或風(fēng)險評估指標(biāo)，不作為確診指標(biāo)。,第四節(jié)妊娠與相關(guān)疾病的生物化學(xué)檢驗(yàn),一妊娠期高血壓綜合征PLH妊高征妊娠特有的疾病，病因無定論可能病因誘發(fā)因素緊張、年齡、肥胖、高血壓家族史及其他妊娠合并癥子宮張力過高造成子宮胎盤缺血RAS系統(tǒng)紊亂等內(nèi)皮素增高造成全身下動脈痙攣微量元素缺乏,表現(xiàn)妊娠20周后出現(xiàn)水腫、高血壓和蛋白尿，嚴(yán)重者有頭痛、頭昏、眼花等自覺癥狀，甚至出現(xiàn)抽搐及昏迷分型輕、中、重（先兆子癇和子癇）特征血壓≥160/110MMHG、自覺癥狀嚴(yán)重的蛋白尿伴水腫→先兆子癇先兆子癇抽搐昏迷→子癇,生化檢測血液粘度高，血漿黏度比值≥16，F(xiàn)DP↑，為正常女性的5倍30倍血漿ATⅢ↓↓血漿纖維連結(jié)蛋白＞4G/L，94發(fā)展為先兆子癇尿蛋白≥300MG/24H，尿CA/CR降低。其他全身小血管痙攣；ALT、AST升高，清蛋白缺乏,A/G倒置，血肌酐、尿素氮、尿酸升高,臨床特征溶血、肝臟酶譜升高、血小板減少。5病人發(fā)生黃疸，LDH濃度急劇升高，AST和ALT達(dá)正常上限的2倍～10倍。,（三）妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥ICP,ICP是妊娠中、晚期特有的并發(fā)癥。臨床特征皮膚瘙癢、黃疸。主要危害胎兒，使圍生兒發(fā)病率和死亡率增高。,（二）HELLP綜合癥,生物化學(xué)檢驗(yàn)（1）血清膽汁酸測定血清膽汁酸升高是ICP最主要的特異性實(shí)驗(yàn)室證據(jù)，測定母血膽汁酸是早期診斷ICP最敏感的方法，對判斷病情嚴(yán)重程度和即使監(jiān)護(hù)、處理均有參考價值。（2）肝功能測定,二、妊娠合并內(nèi)科疾病自學(xué),第五節(jié)新生兒代謝特點(diǎn)與新生兒篩查,一、新生兒代謝特點(diǎn)（一）膽紅素代謝的特點(diǎn)1膽紅素產(chǎn)生增多2膽紅素與清蛋白聯(lián)結(jié)運(yùn)送的能力不足3肝細(xì)胞攝取未結(jié)合膽紅素的能力差4肝臟系統(tǒng)發(fā)育不成熟5腸肝循環(huán)增加,（二）對蛋白質(zhì)、脂肪、糖的消化特點(diǎn),（三）體液電解質(zhì)代謝特點(diǎn)1初生嬰兒體液需要量與其體重和日齡有關(guān)。2新生兒對鈉的耐受限度較窄。3新生兒出生后10天內(nèi)血鉀水平較高，一般不需要補(bǔ)充。4新生兒腎臟雖然能有效維持酸堿平衡，但其碳酸氫鹽的腎閾值低，腎臟處理酸負(fù)荷能力不足，故易發(fā)生代謝性酸中毒。,二、新生兒篩查,新生兒篩查NEONATALSCREENING是指醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)在新生兒群體中，用快速、簡便、敏感的檢驗(yàn)方法，對一些危及兒童生命、危害兒童生長發(fā)育，導(dǎo)致兒童智能障礙的一些先天性、遺傳性疾病進(jìn)行群體篩檢，從而使患兒在臨床上未出現(xiàn)疾病表現(xiàn)，而其體內(nèi)生化、激素水平已有明顯變化時就作出早期診斷，結(jié)合有效治療，避免患兒重要臟器出現(xiàn)不可逆性的損害，保障兒童正常的體格發(fā)育和智能發(fā)育的系統(tǒng)服務(wù)。,項(xiàng)目（一）先天性甲狀腺功能減退癥（CH（二）苯丙酮尿癥（三）半乳糖血癥（四）新生兒黃疸（五）葡萄糖磷酸脫氫酶缺乏癥（六）先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥,二、新生兒篩查,新生兒疾病篩查血片采集步驟1按摩或熱敷新生兒足跟，用75酒精消毒皮膚使用一次性采血針刺足跟內(nèi)或外側(cè)，深度小于3毫米，用干棉球拭去第一滴血，取第二滴血；2將濾紙片接觸血滴，切勿觸及足跟皮膚，使血自然滲透至濾紙背面，至少采集三個血斑；3將血片置于清潔空氣中，避免陽光直射，自然晾干呈深褐色，并登記造冊；4將檢查合格的濾紙干血片，置于塑料袋內(nèi)，保存在2℃～8℃冰箱中；在規(guī)定時間內(nèi)將濾紙干血片遞送至新生兒疾病篩查實(shí)驗(yàn)室檢測機(jī)構(gòu)。,新生兒疾病篩查采血工作質(zhì)量要求1采血濾紙應(yīng)與試劑盒標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控血片用濾紙一致。采血針必須一人一針。2采血時間為出生72小時后，7天之內(nèi)，并充分哺乳；對于各種原因（早產(chǎn)兒，低體重兒，提前出院者等）沒有采血者，最遲不宜超過出生后二十天。3合格濾紙干血片應(yīng)為（1）每個血斑直徑大于8毫米。（2）血滴自然滲透，濾紙正反面血斑一致。（3）血斑無污染。4濾紙干血片應(yīng)在采集后5個工作日內(nèi)遞送，3天內(nèi)必須到達(dá)篩查檢測機(jī)構(gòu)。5有完整的采血卡片及結(jié)果登記冊。,新生兒疾病篩查檢測方法采用國家推薦的實(shí)驗(yàn)方法和批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)試劑盒。對于2次實(shí)驗(yàn)結(jié)果均大于陽性切值的，需追蹤確診。（一）苯丙酮尿癥1血漿游離氨基酸分析和尿液有機(jī)酸分析可采用氨基酸分析儀、高效液相色譜儀（HPLC）、串聯(lián)質(zhì)譜分析技術(shù)、熒光法等測定血苯丙氨酸。2尿三氯化鐵試驗(yàn)和2，4二硝基苯肼試驗(yàn)檢查尿液中Α酮酸。3DNA分析聯(lián)合應(yīng)用PCRASO、PCRSTR、PCRSSCP3種方法進(jìn)行PKU診斷，診斷率為90。,（二）先天性甲狀腺功能減退癥1血漿T4、T3或游離T4、T3和TSH；2TSH濃度的陽性切值根據(jù)實(shí)驗(yàn)室及試劑盒而定，一般為10ΜIU/ML～20ΜIU/ML間；3推薦方法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、酶免疫熒光分析法（EFIA）和時間分辨免疫熒光分析法（TRFIA）。4CKMM同工酶顯著升高，血糖減低，血漿膽固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白多升高，基礎(chǔ)代謝降低。,（三）半乳糖血癥半乳糖血癥（GALACTOSEMIA）是一種由于半乳糖代謝過程中某些酶缺乏致血中半乳糖堆積、利用障礙，而引起臨床一系列癥狀的常染色體隱性遺傳病。半乳糖血癥的臨床表現(xiàn)多樣化，新生兒出生時可表現(xiàn)正常，2天～3天喂奶后出現(xiàn)嘔吐、黃疸、腹瀉、肝重大、嗜睡、溶血、體重下降等。,半乳糖血癥的生物化學(xué)檢驗(yàn)1尿還原糖試驗(yàn)用斑氏試劑測定尿液。2半乳糖和1磷酸半乳糖測定用細(xì)菌或化學(xué)方法測定。3酶活性測定用紅細(xì)胞、白細(xì)胞或培養(yǎng)的皮膚成纖維細(xì)胞測定半乳糖1磷酸尿苷轉(zhuǎn)移酶活性。4DNA分析取外周血白細(xì)胞的DNA進(jìn)行半乳糖1磷酸尿苷轉(zhuǎn)移酶基因分析。,（四）新生兒黃疸,新生兒則分生理性和病理性兩種。1生理性黃疸大部分足月兒在生后2天～3天出現(xiàn)黃疸，5天～7天最重，10天～14天消退，早產(chǎn)兒可延遲至3周～4周，一般情況良好。,2病理性黃疸,有下列情況之一者，應(yīng)視為病理性黃疸①黃疸出現(xiàn)過早足月兒在生后24小時以內(nèi)，早產(chǎn)兒在48小時以內(nèi)出現(xiàn)黃疸；②黃疸程度較重血清膽紅素超過同日齡正常兒平均值，或每日上升超過855ΜMOL/L；③黃疸持續(xù)時間過長（足月兒超過2周以上，早產(chǎn)兒超過3周），或黃疸退后復(fù)現(xiàn)者；④黃疸伴有其它臨床癥狀，或血清結(jié)合膽紅素大于257ΜMOL/L。,發(fā)展趨勢,妊娠病理及胎兒在宮內(nèi)發(fā)育的分子診斷。新生兒疾病篩查在疾病種類和技術(shù)上的開拓。相關(guān)網(wǎng)站W(wǎng)WWOBGYNLINXCOMWWWPEDIATRICLINXCOMWWWXSESCCN/,復(fù)習(xí)思考題,1簡述評價胎兒肺成熟度的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及標(biāo)本收集和處理的注意事項(xiàng)。2簡述妊娠定性試驗(yàn)原理及常用方法和結(jié)果判斷。3簡述定量測定血液或尿HCG的臨床意義4簡述胎盤功能相關(guān)的生化檢查指標(biāo)及其臨床意義。5新生兒先天性缺陷常用的生化指標(biāo)。6新生兒篩查項(xiàng)目有哪些,

簡介：輔酶Q10的生物化學(xué),研究生劉姝（2003級）導(dǎo)師劉中民,SEMINARI,目錄,引言輔酶Q10的生物化學(xué)輔酶Q10的應(yīng)用前景,引言,生物體內(nèi)所有生化反應(yīng)都是在酶的催化下實(shí)現(xiàn)的。酶是一類復(fù)雜的蛋白質(zhì)，許多酶需要輔酶存在，才得以表現(xiàn)其催化活性。,引言,輔酶Q（UBIQUINONE，泛醌）是一系列脂溶性多烯醌類化合物,常與維生素K類物質(zhì)共存,廣泛存在于許多亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中,特別是集中于的線粒體中。輔酶Q是細(xì)胞代謝激活劑和自身合成的抗氧化劑。輔酶Q是各類細(xì)胞發(fā)揮正常功能不可缺少的物質(zhì)基礎(chǔ)。,引言,輔酶Q的化學(xué)結(jié)構(gòu)為不同來源的輔酶Q其側(cè)鏈異戊烯單位的數(shù)目不同。人類和哺乳動物是10個異戊烯單位，故稱輔酶Q10。近年來，對輔酶Q10臨床應(yīng)用和基礎(chǔ)研究，從某種程度上改變了醫(yī)生對疾病治療的理念。,,輔酶Q10的生物化學(xué),生物的一切活動都需要能量。生物所需要的能量主要來源于有機(jī)物質(zhì)糖、蛋白質(zhì)和脂肪在生物體內(nèi)的氧化。生物氧化產(chǎn)生的能量先儲存在高能化合物中，所以生物體內(nèi)的物質(zhì)代謝過隨著能量代謝和能量轉(zhuǎn)換。,輔酶Q10的生物化學(xué),在細(xì)胞線粒體內(nèi)進(jìn)行的氧化過程主要表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)氧的消耗和CO2的釋放，又稱細(xì)胞呼吸。大致分為三個階段,,,,,,,,輔酶Q10的生物化學(xué),各類有機(jī)物在生物體內(nèi)徹底氧化分解,都要經(jīng)過一段共同的終端氧化過程。電子傳遞鏈或呼吸鏈代謝中間物脫氫，按一定順序傳遞給氧分子生成水的體系電子傳遞過程伴隨著能量轉(zhuǎn)化ADP（二磷酸腺苷）磷酸化生成高能化合物ATP（三磷酸腺苷），能量再由ATP傳給生物體需能反應(yīng)。呼吸鏈、生物氧化與氧化磷酸化都是在線粒體內(nèi)部進(jìn)行的，線粒體相當(dāng)于細(xì)胞發(fā)電廠。,輔酶Q10的生物化學(xué),電子傳遞鏈構(gòu)成煙酰胺脫氫酶類（NICOTINANIDEDEHYDROGENASE）黃素脫氫酶（FLAVINDEHYDROGENASE）鐵硫蛋白類（IRONSULFURPROTEIN）；輔酶Q類COENZYMEQ，簡稱COQ。細(xì)胞色素類CYTOCHROME,CELLULARPIGMENT。除輔酶Q和細(xì)胞色素C外，電子傳遞組分形成嵌入內(nèi)膜的結(jié)構(gòu)化超分子復(fù)合物。,輔酶Q10的生物化學(xué),在具有線粒體的生物中，有兩條典型的呼吸鏈。復(fù)合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ組成主要電子傳遞鏈，即NADH呼吸鏈復(fù)合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組成電子傳遞鏈，即FADH2呼吸鏈,輔酶Q10的生物化學(xué),在電子傳遞過程中，這些復(fù)合物按傳遞功能有順序連接，協(xié)調(diào)作用。各組分在呼吸鏈中排列順序與其得失電子趨勢的大小有關(guān)。呼吸鏈中氫和電子的傳遞有嚴(yán)格的順序和方向。,,輔酶Q10在這兩條呼吸鏈的交叉點(diǎn)上，處于呼吸鏈的中心地位。接受復(fù)合體Ⅰ或Ⅱ的氫后，將質(zhì)子（H）釋放到線粒體基質(zhì)中，將電子傳遞給復(fù)合體Ⅲ。輔酶Q10的生物化學(xué)活性來自于其醌環(huán)的氧化還原特性和其側(cè)鏈的理化性質(zhì)。,,輔酶Q10的生物化學(xué),,,NADH的穿梭作用,輔酶Q10的生物化學(xué),苯醌結(jié)構(gòu)，能可逆地進(jìn)行加氫和脫氫反應(yīng)，在氧化呼吸鏈中起傳遞電子和質(zhì)子的重要作用，故屬遞氫體，輔酶Q10是氧化還原酶。輔酶Q10分子小，是呼吸鏈中唯一不與蛋白質(zhì)結(jié)合的傳遞體，疏水性側(cè)鏈?zhǔn)蛊湓诰€粒體內(nèi)膜上自由移動，在呼吸鏈的不同部位起傳遞電子和質(zhì)子的作用。這種作用伴隨能量轉(zhuǎn)化，是所有細(xì)胞賴以發(fā)揮正常功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。,輔酶Q10是組成呼吸鏈的主要成份，作用為代謝激活劑激活細(xì)胞呼吸，加速新陳代謝，促進(jìn)ATP的產(chǎn)生，為細(xì)胞活動提供能量，是能量產(chǎn)生、代謝和貯存的重要輔酶。細(xì)胞自身產(chǎn)生的抗氧劑抑制線粒體的過氧化,具有穩(wěn)定膜電位、保護(hù)和恢復(fù)生物膜結(jié)構(gòu)完整性等作用。在細(xì)胞內(nèi)部抵御自由基，防止自由基的產(chǎn)生和傳播，起到了“清道夫”的作用，能促進(jìn)維他命E的再生。,對生物體免疫有非特異性的增強(qiáng)作用，能提高吞噬細(xì)胞的吞噬率，促進(jìn)抗體產(chǎn)生，改善T細(xì)胞的功能。在生理學(xué)上，輔酶Q10被公認(rèn)為是一種抗老化分子，具有“解毒”功效，甚至還具有潛在的抗癌作用。最顯著的特點(diǎn)是沒有毒副作用。,輔酶Q10的生物化學(xué),在醫(yī)學(xué)上主要用于心血管疾病，如缺血性心臟病、心力衰竭、風(fēng)濕性心臟病、心肌梗塞、狹心癥、心肌炎、心絞痛、心律不齊及高血壓等。臨床研究顯示，各種病因引發(fā)的心血管病，患者血液及組織中輔酶Q10的含量均顯著偏低,且嚴(yán)重的心血管病伴隨嚴(yán)重的輔酶Q10缺乏。輔酶Q10能夠顯著改善心肌功能，沒有毒副作用和藥物交叉反應(yīng)。,輔酶Q10的生物化學(xué),輔酶Q10的應(yīng)用前景,輔酶Q10是所有類型細(xì)胞發(fā)揮正常功能不可或缺的基礎(chǔ)物質(zhì)。補(bǔ)充輔酶Q10有益于各種的疾病的緩解和治療。針對患者,醫(yī)生不應(yīng)該忽視其自身的抗病能力，不能忽視監(jiān)測其的營養(yǎng)平衡狀況。采取藥療和維持營養(yǎng)平衡相結(jié)合的治療方案，才是更好的選擇。,輔酶Q10的應(yīng)用前景,癌癥一些癌癥患者血輔酶Q10偏低的現(xiàn)象已引起了科研人員的注意,用于癌癥的綜合治療，能減輕放療、化療等引起的某些副反應(yīng)。免疫系統(tǒng)針對艾滋患者的研究表明，艾滋病晚期，患者體內(nèi)輔酶Q10水平顯著下降?？寡趸饔煤妥杂苫宄δ芫哂兄委熅植咳毖退ㄈ淖饔眉皽p緩動脈硬化的潛能,輔酶Q10的應(yīng)用前景,肝病急慢性病毒性肝炎、亞急性肝壞死的治療，暴發(fā)性肝炎導(dǎo)致的腦水腫、遷延性肝炎輔酶Q10存在于細(xì)胞線粒體膜以外的其它膜結(jié)構(gòu)中。有助于控制細(xì)胞生長,特別是控制淋巴細(xì)胞的生長。對于輔酶Q10的生物醫(yī)學(xué)、臨床應(yīng)用及相關(guān)的生物能學(xué)和自由基化學(xué)的研究僅剛剛開始。,謝謝,

簡介：第十章腎臟疾病的生物化學(xué)診斷,泌尿系統(tǒng)由腎臟、輸尿管、膀胱和尿道組成。腎臟是生成尿液的器官，腎盞、腎盂以下部分主要為排尿的通路。通過尿液檢查及腎功能檢查可提供許多有關(guān)疾病和平衡失調(diào)的重要信息。,第一節(jié)腎臟的結(jié)構(gòu)和功能,一、腎臟的基本結(jié)構(gòu)腎髓質(zhì)腎實(shí)質(zhì)腎皮質(zhì)腎腎盂,,,由1520個腎椎體組成,,,,腎小球腎小體腎小囊近曲小管腎單位近端小管近直小管腎小管髓袢遠(yuǎn)直小管遠(yuǎn)端小管遠(yuǎn)曲小管,,,,,,,,,,腎單位,腎單位腎臟的解剖單位，每個腎臟約有100萬200萬個，每個腎單位包括一個腎小球和相應(yīng)的腎小管。腎單位可按腎小球在腎皮質(zhì)的部位分為皮質(zhì)腎單位腎小球體積小，與尿液生成有關(guān)。近髓腎單位體積較大，尿液濃縮與稀釋功能。,腎A自腹主A直接分出，進(jìn)入腎臟的血量占心博出量的20。腎通過尿液的分泌和排泄使機(jī)體處于相對恒定的內(nèi)環(huán)境,為細(xì)胞活力和整體生命提供必要的最佳條件。,腎臟的血液供應(yīng),二、腎臟的基本功能排泄人體代謝剩余物質(zhì)（尿素、尿酸、肌酐等含氮物質(zhì)）廢物和毒物。同時，經(jīng)重吸收有用物質(zhì)，調(diào)節(jié)體液及酸堿平衡。,一、腎小球?yàn)V過功能是指血液經(jīng)過腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)時血漿中的水和小分子溶質(zhì)，包括少量分子量較小的血漿蛋白，可以濾入腎小囊的囊腔而形成濾過液過程。,（二）、腎小管重吸收功能（1）近曲小管（2）髓袢（3）遠(yuǎn)曲小管和集合管（4）腎小管重吸收的基本方式,（三）、腎臟的調(diào)節(jié)功能,1．分泌或排泄的概念,腎小管和集合管的上皮細(xì)胞將細(xì)胞產(chǎn)生的或血液中已存在的某些物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到管腔，這一過程稱為分泌或排泄。,2．腎小管在調(diào)節(jié)機(jī)體酸堿平衡方面起著重要作用,通過分泌H、重吸收NAHCO3,通過增加或減少體液中的NAHCO3的濃度以調(diào)節(jié)H的濃度。在近端小管、遠(yuǎn)端小管和集合管都能分泌H，發(fā)生HNA交換，達(dá)到分泌H而重吸收NAHCO3的目的。,三、腎功能的調(diào)節(jié),腎小球的濾過功能調(diào)節(jié),自身調(diào)節(jié),小管液中溶質(zhì)的濃度,球管平衡,管球反饋,神經(jīng)調(diào)節(jié),腎小管和集合管功能的調(diào)節(jié),神經(jīng)和體液因素,血管緊張素Ⅱ?qū)δ蛏傻恼{(diào)節(jié),醛固酮對尿生成的調(diào)節(jié),,,,,,神經(jīng)調(diào)節(jié),通過下列作用影響尿生成,①入球小動脈和出球小動脈收縮，而前者血管收縮比后者更明顯，因此，腎小球毛細(xì)血管的血漿流量減少和腎小球毛細(xì)血管的血壓下降，腎小球的有效濾過壓下降，腎小球?yàn)V過率減少。,②刺激近球小體中的顆粒細(xì)胞釋放腎素，導(dǎo)致循環(huán)中的血管緊張素Ⅱ和醛固酮含量增加，增加腎小管對NACI和水的重吸收。,③增加近球小管和髓袢皮皮細(xì)胞重吸收NA、CI和水。,血管緊張素Ⅱ?qū)δ蛏傻恼{(diào)節(jié)包括,①刺激醛固酮的合成和分泌；醛固酮可調(diào)節(jié)遠(yuǎn)曲小管和集合管上皮細(xì)胞的NA和K轉(zhuǎn)運(yùn)。,,②可直接刺激近球小管對NACL的重吸收，使尿中排出的NACL減少。,③刺激垂體后葉釋放抗利尿激素，因而增加遠(yuǎn)曲小管和集合管對水的重吸收，使尿量減少。,第二節(jié)腎臟疾病的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢查,概念腎清除率表示腎臟在單位時間內(nèi)（MIN）將多少量（ML）血漿中的某物質(zhì)全部清除而由尿排出。,一、腎功能的生物化學(xué)檢測（一）、腎清除試驗(yàn),（一）腎清除試驗(yàn),,,,,腎臟清除試驗(yàn)表示腎臟在單位時間內(nèi)（每分鐘）將多少亳升血漿中的某物質(zhì)清除出去,具體計算需要測量三個數(shù)值U－尿中測定物質(zhì)的濃度（MMOL/L），V－每分鐘尿量（ML/MIN），P－血漿中測定物質(zhì)的濃度（MMOL/L）。C－清除率（ML/MIN），因?yàn)槟蛑性撐镔|(zhì)均來自血漿，所以，UV＝PC亦即C＝UV/P,校正后的清除值CUV/P173／A,注√表示能進(jìn)行；表示不能進(jìn)行,二腎小球?yàn)V過功能檢測1．腎小球?yàn)V過率（GFR）測定①菊粉清除率測定菊粉是理想的測定GFR的物質(zhì)，但菊粉是外源性物質(zhì)，測定方法麻煩。②內(nèi)生肌酐清除率（CCR）同時測定血和尿中肌酐濃度，并記錄每分鐘尿量就可計算出內(nèi)生肌酐清除率。,,CX＝某物質(zhì)單位時間從尿中排出總量/某物質(zhì)在血漿中的濃度＝UXV/PX式中CX為某物質(zhì)清除率ML/MIN、V為每分鐘尿量（ML/MIN）、UX為尿中測定物質(zhì)的濃度MMOL/L、PX為血漿清中該物質(zhì)的濃度MMOI/L標(biāo)準(zhǔn)化的清除值CX＝（UXV）/PX（173/A）A值計算LOGAM20425LOG體重KG0725LOG身高CM2144,2．血肌酐（SCR）和尿素濃度測定反映腎小球?yàn)V過功能的損害程度。尿素是人體蛋白代謝的最終代謝產(chǎn)物，75以上的非蛋白氮最終是以尿素的形式排出體外。肝為尿素合成的主要器官，尿素的合成過程即尿素循環(huán)，是在肝細(xì)胞內(nèi)特異的酶催化下合成的。,90以上的尿素經(jīng)腎臟排泄，小部分經(jīng)胃腸道和皮膚排泄。尿素經(jīng)腎小球自由濾過。原尿中約4050的尿素又被腎小管和集合管重吸收，因此，血清尿素水平在一定程度上反映了腎小球的濾過能力。,①尿素的測定方法1）二乙酰一肟法原理血清中尿素在氨基硫脲存在下，與二乙酰一肟在強(qiáng)酸性溶液中混合加熱，產(chǎn)生紅色，顏色強(qiáng)度與尿素含量成正比。與同樣處理的尿素標(biāo)準(zhǔn)液比較，即可求得血清中尿素含量，進(jìn)而求得尿素氮的含量。2）目前多采用尿素酶偶聯(lián)法,,,,,,,NH2|尿素酶尿素CO→2NH3CO2|H2ONH2,谷氨酸脫氫酶NH3Α酮戊二酸→谷氨酸NADHNAD,通過340NMA值的降低可計算出尿素含量，此反應(yīng)自動化分析儀上常用的測定原理。,參考值范圍,血清尿素1868MMOL/L。新生兒比成人低。大于60歲老年人比年青人要高。男性比女性高，高蛋白飲食可造成血、尿尿素增高。,②肌酐JAFFE反應(yīng)法OH肌酐堿性苦味酸→紅色物質(zhì)參考值血漿肌酐（SCR）44130UMOL/L；血清尿素1868MMOL/L,相當(dāng)于尿素氮BUN36136MMOL/L。,方法學(xué)評價,,JAFFE反應(yīng)法為測定肌酐常用的方法，適用于血、尿標(biāo)本的檢測。但JAFFE反應(yīng)在檢測血肌酐特異性不高，受假肌酐的干擾。,,臨床應(yīng)用,肌酐濃度和血尿素濃度一樣只有在腎臟病變較為嚴(yán)重時才會升高。肌酐攝入、生成量恒定，其濃度波動范圍不大，血尿素濃度除受腎功能影響外，還受到蛋白質(zhì)分解代謝引起的變化。故測定血肌酐濃度較血尿素濃度更能準(zhǔn)確地反映腎小球的功能。,③BUN、SCR測定的臨床意義腎功能不全代償期BUN輕度↑、CR可不↑或輕度↑腎衰失代償期BUN↑↑、CR↑↑尿毒癥BUN214MMOL/L、CR18MMOL/L為診斷指標(biāo)之一。,3．血清尿酸（SUA）測定,（1）生化生理,尿酸是嘌呤代謝的最終產(chǎn)物。食物中的核酸分解產(chǎn)生的嘌呤直接轉(zhuǎn)化成尿酸。腎處理尿酸包括四個步驟,（1）血漿內(nèi)的尿酸由腎小球完全濾過。,（2）在近端腎小管大約98100的尿酸被重吸收。,（3）在近端腎小管的遠(yuǎn)端分泌尿酸。,（4）遠(yuǎn)端腎小管進(jìn)一步重吸收。尿液的凈尿酸排泄量大約為濾過量的612。,（2）測定方法,1）磷鎢酸還原法,2）尿酸酶法,①紫外分光法,②酶聯(lián)比色法,③酶聯(lián)紫外分光法,3）HPLC法（高效液相色譜法）,尿酸在堿性溶液中使磷鎢酸還原生成藍(lán)色的鎢藍(lán)，可在650至700NM波長處比色。,（2）測定方法尿酸酶法為主1）紫外分光法尿酸在282292NM處有特異吸收峰，當(dāng)其經(jīng)尿酸酶作用后，其產(chǎn)物在此波長無吸收峰。測量酶作用前后A值之差經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)品，待測樣品同時處理，可計算尿酸含量。,2）酶聯(lián)比色法尿酸酶尿酸O22H2O→尿囊素CO2H2O2偶聯(lián)過氧化酶（POD）H2O2酚4氨基安替比林→醌亞胺（紅色）醌亞類化合物在500NM處有AMAX，進(jìn)行比色測定A值的↑與樣品中尿酸含量呈成正比。3）酶聯(lián)紫外分光法,,,⑶參考值,血尿酸男性14874164ΜMOL/L,女性8923569ΜMOL/L,⑷方法學(xué)評價,磷鎢酸法試劑易得、價格低廉，但靈敏度低。特異性不高，受多種因素干擾。尿酸酶紫外分光法，該法靈敏度高，特異性好，易于自動化，具有簡單、快速的優(yōu)點(diǎn)，但需要精密儀器，標(biāo)本中蛋白會提高空白管的吸光度。酶聯(lián)比色法敏感，反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色比用酚作色素原時產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度大4倍，可用血清直接測定。酶聯(lián)紫外分光法易于自動化，適合自動化分析但由于體內(nèi)有許多脫氫酶反應(yīng)，因此后兩步氧化還原反應(yīng)易受干擾，導(dǎo)致結(jié)果偏高。,,,,,,⑸臨床意義,血清尿酸濃度升高見于,①腎功能減低血清尿酸比血清肌酐和尿素更能反映腎小球?yàn)V過功能損傷，但血清尿酸測定易受腎外因素的影響，故臨床上比血清肌酐和尿素少用。②體內(nèi)尿酸生成增多，常見于遺傳性酶缺乏導(dǎo)致的原發(fā)性痛風(fēng)，核酸代謝增加的白血病，多發(fā)性骨髓瘤等。,,③長期服用噻嗪類利尿藥物后由于抑制腎小管分泌尿酸，引起血清尿酸水平升高，長期禁食、酒精中毒、腫瘤放化療和妊娠中毒癥等。,血清尿酸濃度降低見于,①各種原因引起腎小管重吸收功能損害,這種重吸收障礙可以是先天性的，如FANCONI’S綜合癥（胱氨酸貯積?。?，或繼發(fā)性的。,②肝功能嚴(yán)重?fù)p傷伴有嘌呤合成減少或次黃嘌呤氧化酶活性減低。,③大劑量使用糖皮質(zhì)激素丙磺舒等藥后,（三）、腎血流量（RBF）測定RBF是指單位時間內(nèi)流經(jīng)腎臟的全血或血漿量。測定對氨基馬尿酸（PAH）清除率或碘銳特清除率均可反映腎血流量腎血漿流量RPF（UPAHV）/PPAH腎全血流量RBFRPF/（1RBC比積）放射性核素腎圖較敏感反映腎的血液量。,,（四）、腎小管功能檢查1．近端小管功能檢查酚紅排泄率（LYS）測定尿微球蛋白及溶菌酶等（BMG）2．腎濃縮稀釋試驗(yàn)正?；蛱囟嬍硹l件下觀察病人尿量和比重的變化3．尿滲透壓測定多采用尿液冰點(diǎn)下降法,測得溶液冰點(diǎn)下降度（℃）滲透壓OSM/KGH2O1858測定尿滲透壓方法1）直接測尿滲透2）測定尿、血漿滲透壓的比值3）自由水清除率,,尿滲透壓血漿滲透壓→尿已濃縮→高滲尿尿滲透壓1腎前性氮質(zhì)血癥FENA02非選擇性蛋白尿，提示腎小球?yàn)V過膜受損嚴(yán)重，見于急進(jìn)性腎炎、慢性腎炎、糖尿病性腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、膜增生性腎炎等。SPI介于0102之間為中度選擇性蛋白尿,2ALB、IG測定用ELISA法測定，檢出量達(dá)到NG/ML水平。腎小球輕度病變時，尿中ALB↑→腎小球進(jìn)一步受損IGG、IGA↑→腎小球嚴(yán)重病變時，尿中IGM↑。,3FDP測定（纖維蛋白降解產(chǎn)物）尿FDP出現(xiàn)意味著腎內(nèi)有凝血和纖溶現(xiàn)象，可用來鑒別腎炎和腎病①腎炎患者尿FDP的含量與尿蛋白成正比（免疫性的損傷）②腎病患者尿FDP陰性約占80，尿FDP與尿蛋白無明顯關(guān)系。③動態(tài)觀察尿FDP的變化，對腎移植后排斥反應(yīng)的診斷有一定意義。腎移植后尿FDP持續(xù)升高出現(xiàn)排斥反應(yīng)。,（二）尿低分子蛋白一組能自由通過腎小球?yàn)V過膜而在腎近曲小管全部吸收的蛋白質(zhì)，包括RBP、Α1M、Β2M、THP近曲小管受損的標(biāo)志。,（三）尿酶的檢測正常尿酶量極少，腎臟疾病時，尿酶活性改變主要有反映代謝的酶LDH、ALPAKP、LAP亮氨酸氨基肽酶反映近端腎小管刷狀緣功能的酶LYS、ΒGLUΒ葡萄糖苷酸酶、NAG反映近端腎小管的損傷的酶LYS、NAG、ΒGLU主要反映重吸收功能的酶LYS反映其腎性損傷的酶NAG,第三節(jié)常見腎臟疾病的生物化學(xué)診斷,一、急性腎小球腎炎（ACUTEGLOMERULONEPHRITIS）簡稱急性腎炎，常有少尿、血尿、蛋白尿、水腫、常伴有高血壓、腎功能減退等臨床表現(xiàn)。,發(fā)病急，以血尿、蛋白尿、高血壓、水腫、腎小球?yàn)V過率降低為特點(diǎn)的腎小球疾病。典型的臨床病例表現(xiàn)為70％病例有水腫，是因腎小球?yàn)V過率減低，水鈉潴留引起；約半數(shù)病人有網(wǎng)眼血尿，同時伴有程度不同的蛋白尿，但多數(shù)每日＜30G；大多數(shù)病人有高血壓，除水腫外，它是最主要的臨床表現(xiàn)，為水鈉潴留、血容量擴(kuò)大所致實(shí)驗(yàn)室檢查血尿（肉眼或鏡下血尿）；尿蛋白定量13G/D；尿滲透壓350MOSM/KGH2O。,血液和尿液中出現(xiàn)FDP正確反映腎血管內(nèi)凝血。FDP升高，腎小球?yàn)V過通透性升高。急性期腎小球?yàn)V過率（GFR）↓，肌酐清除率↓，腎血流量多數(shù)正常。ALB↓，Β球蛋白↑。早期補(bǔ)體及C3↓，其后逐漸恢復(fù)?？梢暈榧毙阅I炎病情活動的指標(biāo)。治愈標(biāo)準(zhǔn)C3正常、FDP正常、血沉正常。,二、腎病綜合征NEPHROTICSYNDROME概念由多種不同病理類型的腎小球病引起，具有共同的臨床表現(xiàn)，最基本的特征是大量蛋白尿，重度水腫，低清蛋白血癥及高脂血癥。,1．大量蛋白尿腎病綜合征的標(biāo)志原因腎小球毛細(xì)血管壁對蛋白質(zhì)的通透性↑，腎小球?yàn)V過屏障發(fā)生異常。蛋白尿的選擇性常用IGG清除率與轉(zhuǎn)鐵蛋白清除率之比表示，即CIGG/CTRF≤01提示高選擇性CIGG/CTRF≥02提示非選擇性,醋纖薄膜電泳呈特征圖譜清蛋白↓至50以下，Γ球蛋白↓，Α2球蛋白和Β球蛋白比例明顯↑兩端下陷，中間增高的圖譜。,2．血清清蛋白濃度↓400ML/日，即進(jìn)入多尿期，尿量通?？蛇_(dá)40006000ML/日。此時，腎功能已有恢復(fù)，能排出尿液。在多尿期的早期，腎單位功能仍未完全恢復(fù)，不能充分地排出血中的氮質(zhì)代謝廢物、鉀和磷。血中上述物質(zhì)仍可繼續(xù)上升，所謂多尿早期是以血清肌酐及尿素氮持續(xù)增高為標(biāo)志。此期在少尿期后710天,（三）恢復(fù)期,經(jīng)過多尿期后，尿量逐漸恢復(fù)正常，此時，血BUN、CR基本正常，但腎小管功能（特別是濃縮功能）仍未恢復(fù)。多尿期過后，腎功能已顯著改善，尿量逐漸恢復(fù)正常。血肌酐、尿素氮此時基本恢復(fù)正常水平，但腎小管尚有輕度障礙。一般在發(fā)病一月后進(jìn)入恢復(fù)期,實(shí)驗(yàn)室檢查,1腎單位功能試驗(yàn)內(nèi)生肌酐清除率下降。腎小管排泌、重吸收功能下降2血液檢測①氮質(zhì)血癥少尿期尿毒癥癥狀的嚴(yán)重程度與血尿素及肌酐增高的濃度相一致。血肌酐和尿素一般分別每日上升442884UMOL/L和357714MMOL/L。腎前性者血尿素升高更顯著,②代謝性酸中毒碳酸氫根濃度下降，二氧化碳結(jié)合力降至1318MMOL/L③低鈉血癥少尿期水中毒時，可發(fā)生稀釋性低鈉血癥，血鈉濃度常低于125MMOL/L④高鉀血癥常出現(xiàn)于少尿數(shù)日后，通常血鉀每日遞增約03MMOL/L,血鉀可高達(dá)7MMOL/L⑤高磷血癥和低鈣血癥血磷可高達(dá)1926MMOL/L。鈣明顯下降（1MMOL/L）⑥血鎂升高,3尿液檢測,①尿比重少尿期為10101015，多尿期＜1010②尿滲量少尿期為280MOSM/L300MOSM/L,多尿期＜350MOSM/L，尿滲量/血漿滲透壓＜11③尿鈉少尿期常＜30MMOL/L多尿期常＞40MMOL/L。FENA＞1,一般認(rèn)為對于診斷有價值④管型少尿期有血尿、蛋白尿、紅細(xì)胞管型和顆粒管型，多尿期出現(xiàn)大量腎衰竭管型⑤自由水清除值多尿期＞1ML/MIN，被認(rèn)為是腎小管功能恢復(fù)的敏感指標(biāo)⑥腎小管損害的尿標(biāo)記Β2微球蛋白、LDH、NAG、LYS、THP等均有增高，但這些指標(biāo)都是非特異性的,四、慢性腎功能衰竭常發(fā)生在各種慢性腎臟疾病的基礎(chǔ)上，臨床上以腎功能減退、代謝產(chǎn)物潴留，水電解質(zhì)及酸堿平衡失調(diào)為主要表現(xiàn)。慢性腎功能衰竭（CHRONICRENALFAILURE，CRF簡稱慢性腎衰）是發(fā)生在各種慢性腎臟疾病基礎(chǔ)上，緩慢出現(xiàn)的腎功能減退以至不可逆轉(zhuǎn)的腎功能衰竭。其臨床主要表現(xiàn)為腎功能減退，水、電解質(zhì)和酸堿平衡失調(diào)，以致于不能維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定的臨床綜合征。CRF不是獨(dú)立的疾病，而是一種臨床綜合征,慢性腎小球腎炎慢性腎盂腎炎→腎功能不全→尿毒癥腎動脈硬化腎功能減退分四個階段腎貯備能力喪失期→氮質(zhì)血癥期→腎功能衰竭期→尿毒癥期,,實(shí)驗(yàn)室生化檢查,1腎小球?yàn)V過測定2血尿素、肌酐測定3水、電解質(zhì)、酸堿物質(zhì)和內(nèi)分泌物質(zhì)測定4血液透析需隨時了解透析效率、水分、貧血狀態(tài)和早期發(fā)現(xiàn)并發(fā)癥。透析效率評定指標(biāo)包括血尿素、肌酐、尿酸、K、Β2M、中分子物質(zhì)等；水分評定指標(biāo)有尿量、體重、血壓、TP等；貧血狀態(tài)評定指標(biāo)包括RBC、HT、FE、TIBC、UIBC、和TP等。具體應(yīng)用需結(jié)合病情變化和臨床表現(xiàn)選擇,病例分析,病例1男性，35歲，主訴腰痛，實(shí)驗(yàn)室檢查血清肌酐為150UMOL/L，24小時尿量為2160ML。尿肌酐濃度為7500UMOL/L1計算肌酐清除率并評價其結(jié)果。2尿量收集時間有錯誤，收集時間為17小時，對結(jié)果有何影響，如何解釋,肌酐清除率可用公式計算U為尿肌酐濃度，V為每分鐘尿量，P為血漿或血清肌酐濃度。一天有1440分鐘，每分鐘尿量2160/144015ML/MIN,尿肌酐與血清肌酐單位必須相同。尿肌酐濃度U75MMOL/L7500ΜMOL/L,血清肌酐P150ΜMOL/L。因此UV/P750015/15075ML/MIN。低于正常值。尿液收集為17小時而非24小時，每分鐘尿量（2160/1020）V21ML/MINUTE,重新計算他的肌酐清除率UV/P750021/150105ML/MINUTE在正常值范圍內(nèi)。因此尿液的收集時間顯著影響肌酐清除率的計算。由尿液收集時間不當(dāng)造成的計算錯誤是肌酐清除率測定中最普通和嚴(yán)重的錯誤。,病例2女性，30歲，因事故造成的骨折，無重大損傷，無大量失血，血液循環(huán)穩(wěn)定，事故后昏迷2天，第四天就診，主訴多尿和口渴，生化檢查結(jié)果NA150MMOL/L,K36MMOL/L,CL106MMOL/L,HCO325MMOL/LUREA尿肌酐55MMOL/L,CREATININE80UMOL/L,GLUCOSE54UMOL/L血滲透壓310MMOL/KG，尿滲透壓110MMOL/KG，尿量8L/24H。是否需要做禁水實(shí)驗(yàn)來診斷并說明理由,對這個患者進(jìn)行禁水試驗(yàn)是不必要的，甚至是危險的。結(jié)合病史和多尿、口渴等臨床癥狀可以明確診斷該患者患有中樞性尿崩癥。根據(jù)患者的血糖水平可以排除糖尿病，口渴癥狀是由尿崩癥和高鈉血癥等原因引起的。在正常情況下，150MMOL/L血清鈉濃度將刺激AVP產(chǎn)生和引起尿液濃縮。因此這個病人的尿液沒有被稀釋。值得注意的是她的血清尿素沒有升高，與其缺水、多尿的癥狀相聯(lián)系。,病例3男性，50歲，發(fā)熱，臨床出現(xiàn)脫水和少尿。實(shí)驗(yàn)室生化檢查結(jié)果NA140MMOL/LK59MMOL/LCL112MMOL/LHCO316MMOL/LUREA229MMOL/LCREATININE155UMOL/L血滲透壓305MMOL/KG，尿滲透壓629MMOL/KG檢查結(jié)果表明患者情況如何,血清尿素的顯著增加并伴隨血清肌酐中等程度的升高可能意味著腎前性尿毒癥的存在。發(fā)熱病人分解代謝過度能引起血清尿素升高。尿滲量為629MMOL/KG支持該診斷。僅僅由于脫水引起腎前性尿毒癥，那么尿滲量將會大大升高。低血清重碳酸鹽和高陰離子隙表明有代謝性酸中毒。酸中毒將引起鉀從細(xì)胞內(nèi)向細(xì)胞外的轉(zhuǎn)移。腎小球?yàn)V過率的減少導(dǎo)致高鉀血癥。,病例4女性40歲，慢性腎衰，透析治療，透析前實(shí)驗(yàn)室生化檢查結(jié)果NA130MMOL/LK57MMOL/LCL100MMOL/LHCO316MMOL/LUREA255MMOL/LCREATININE1430UMOL/L上述結(jié)果有什么意義還需要做哪些檢查結(jié)果對治療有何影響,患者的血尿素水平盡管很高，相對于血清肌酐還是較低。這可能表明低蛋白攝入。血清低重碳酸氫鹽表明代謝性酸中毒的存在。然而，陰離子隙是正常的，說明這個病人的H正常。因此，高鉀血癥可能主要由于腎小球?yàn)V過率低造成的，鉀離子從細(xì)胞內(nèi)向細(xì)胞外轉(zhuǎn)移影響相對較小。高鈉血癥導(dǎo)致體內(nèi)水量升高。結(jié)果表明該病人需要繼續(xù)血液透析，同時需要檢測血清鈣水平，排除高鈣血癥。高血清堿性磷酸酶可能表明代謝性骨疾病的存在。血清甲狀旁腺素濃度是檢測高鈣血癥和伴有腎衰的代謝性骨疾病非常敏感的方法。,THANKYOU,

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