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簡介:西南大學(xué)碩士學(xué)位論文家蠶卵巢細胞系BMNSWU1的建立及其生物學(xué)特性的研究姓名蔡秀娟申請學(xué)位級別碩士專業(yè)細胞生物學(xué)指導(dǎo)教師魯成潘敏慧20070501兩南大學(xué)碩學(xué)位論文5經(jīng)考馬斯亮藍R250染色法顯示,在梭形BMNSWUI細胞中的微絲束是與細胞長軸方向一致的纖維,有時在兩端彎曲成弧形。縱向的微絲束長短不一,許多從細胞一端直達另一端,微絲束常出現(xiàn)分枝和合并,使得整個微絲系統(tǒng)連結(jié)成一個網(wǎng)格。圓形的BMNSWUI細胞中的微絲束以細胞核為中心,向細胞膜方向早輻射狀排列,微絲束也常出現(xiàn)分枝和合并結(jié)成一個網(wǎng)格。這些微絲束構(gòu)成細胞形狀的基本輪廓。綜上所述,經(jīng)兩年多的家蠶卵巢組織的原代培養(yǎng),從不同分化類型的繁殖群體中,篩選并建立了一個新的家蠶卵巢細胞系BMNSWUI。該細胞系以多邊形、圓形及短梭形細胞為主,繁殖力強,二倍率高,對BMNPV病毒敏感。為細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)和桿狀病毒表達載體系統(tǒng)的應(yīng)用研究等提供了一個較好的新細胞材料。更為家蠶功能基因組研究、外源基因的高效表達和推動家蠶作為模式昆蟲的地位提供更好的細胞研究平臺。關(guān)鍵詞家蠶卵巢細胞系生長曲線病毒敏感性N
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簡介:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文北京油雞骨髓間充質(zhì)干細胞和胚胎生殖細胞重要生物學(xué)特性研究姓名陳莉娜申請學(xué)位級別碩士專業(yè)動物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師關(guān)偉軍20070601ABSTRACTTOCLARIFYTHEKEYBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFBONE“MARROWMESENCHYMALSTEMCELLANDEMBRYONICGERMCELLFROMBEIJINGFATTYCHICKEN,THESTUDYRESEARCHEDONISOLATION,MULTIPLICATION,IDENTIFICATION,TRAUSFECTIONANDDIFIERENTIATIONOFTWOKINDSOFSLMCELLSTHERESULTSAREASFOFLOWSITHEMSCSGALLBEDERIVEDFROM3060DBEIJINGFATTYCHICKENBONEMARROWBYDENSITYGRADIENTCENTRIFUGESEPARATIONORCELLATTACHMENTTOTISSUECULTUREPLATESMSCSCALLBEEXPANDEDSTABLYINVITROANDSUBCULTUREDTO7THPASSAGEINMORPHOLOGYTHEGOATMSCSAREFUSIFORM,POLYGONAL,ANDROUND8SAMPLES,25FREEZINGTUBESHAVEBEENCRYOPRCSERVEDTHESURVIVALRATEBEFOREANDAFTERCRYOPRESERVATIONWERE98%875%2THECHICKENMSCSHAVEBEENIDENTIFIEDBYTHEFOLLOWINGMETHODMICROBIALDETECTIONINDICATENOBACTERIAFUNGI,VIRUSANDMYCOMPLASMACONTAMINATIONINCELLCULTUREKARYOTYPEANALYSISSHOWEDTHECELLSKEPTDIPLOIDCONDITIONANDTHEHEREDITARYFEATUREISSTABLEPASRESULTEDPOSITIVEAKPNEGATIVEANDCELLULARMARKERSDETECTIONPOSITIVEINCD44CD54,SSEA4ANDNEGATIVEINCD34。CD45,SSEA1EKIT3MSCSWERETRANSFERREDBYLIPOFEETAMINEMEDIATEDPLASMIDEXPRESSINGPEGFPTHEEXPRESSIONOFPEGFPREACHEDOPTIMALSTATEIN48H96H,WITHTHETRANSFECTIONEFFICIENCYABOUT40%,REMAINEDSTRONGEXPRESSIONWITHIN1WEEK4UNDERINDUCTIONOFMEDIUMWITHDEXAMETIMSONE,∞EORBATEPHOSPHATE,PGLYCEROPHOSPHATE,ANDMEDIUMWITHFRESHBONEPARTICLESMSCSDIFFERENTIATEDINTOOSTCOBLAST,WHICHEXPRESSEDHIGHLEVELALKALINEPHOSPHATASEALIZARINREDSTAINPOSITIVEANDTETRACYCLINESTAINPOSITIVE5PRIMORDIALGERMCELLSWEREGOT蚵ISOLATINGEMBRYONICGONADANDSURROUNDINGTISSUEFROMCHICKENEMBRYO55DAYSOFINCUBATIONPGCSWERECOCULTUREDWITHTHEIRGONADALSOMATICCELLSWEREWELLGROWNINPRIMARYCULTUREWHENSUBCULTURE,USINGPRIMARYMICEEMBRYONICFIBROBLASTPMEFASFEEDERCELLS,EGWERESUBCELTUREDTOTHE7THPASSAGETHEPGCSHADAHI曲NUCLEUSTOCYTOPLASMRATIO,PROMINENTNUCLENLI,ANDDENIESWEREUNIFORMLYROUND,MULTILAYEREDANDWELLDELINEATEDINTHERESEARCH,SSAMPLES25FREEZINGTUBESHAVEBEENCRYOPRESERVED6THECHICKENEGHAVEBEENIDENTIFIEDBYTHEFOLLOWINGMETHODMICROBIALDETECTIONINDICATENOBACTERIAFUNGI,VIRUSANDMYCOMPLASMACONTAMINATIONINCELLCULTUREKARYOTYPEANALYSISSHOWEDTHECELLSKEPTDIPLOIDCONDITIONANDTHEHEREDITARYFEATUREISSTABLETHEPUTATIVEEGCELLSCONTINUEDTOBEPASPOSITIVEANDEXPRESSEDALKALINEPHOSPHATUSE,SSEAL,SSEA4,TRAI一60ANDTRAI8I7EGWERETRANSFERREDBYLIPOFACTAMINEMEDIATEDPLASMIDEXPRESSINGPEGFPTHEEXPRESSIONOFPEGFPREACHEDOPTIMALSTATEIN24HWITHTHETRANSFECTIONEFFICIENCYABOUTL84%GUNDERSUSPENSIONCULTUREWITHOUTCYTOKINES,THEPUTATIVEEGCLONICSCOULDBEINDUCEDTOFORMSIMPLEEMBRYOIDBODIESUNDERINDUCTIONOFDEXAMETHASONEAACORBATEPHOSPHATE,AND13一GLYCEROPHOSPHATE,PGCSANDMSCSDIFFERENTIATEDINTOOSTEOBLAST,WHICHCANBESTAINEDBYALIZARINREDKEYWORDBONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLEMBRYONICGERMCELLBIOLOGICALCHARACTERISTICS
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簡介:密級論文編號中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文體細胞克隆牛生物學(xué)特性的初步研究PRIMARYSTUDYONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFSOMATICCLONEDCATTLE申請人郝海生指導(dǎo)教師朱化彬研究員申請學(xué)位類別農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)動物遺肯育種與繁殖研究方向動物繁殖理論與技術(shù)培養(yǎng)單位北京畜牧獸醫(yī)研究所砑煳提交日期2007年5月ABSTRACTTHESTUDYHAVEDISCUSSEDBODYGROWTH,HAEMATOLOGYANDSERUMBIOCHEMISTRYREPRODUCTIONCAPABILITYABOUTCLONESMAINCONTENTFOILOWEXPERIMENTLTHESTUDYHAVEOBERSERVEDBODYGROWTHOFCLONESFROMBIRTHTO15MONTHAGETHERESULTSHOWEDTHATPARAMETERSOFWEIGLLTANDBODYSIZEARESIMILARBETWEENCLONESANDCONTROLSP005EXPERIMENT2THESTUDYHAVEMEASUREDREPRODUCTIONCAPABILITYOFCLONESTHERESULTSHOWEDTHATPUBERTYOFCLONESSIGNIFICIANTLYLONGERTHANTHATOFCONTROLP005BETWEENTWOGROUPSCLONESWERESUPEROVULATEDBYUSINGFSHFOR3TIMESIGNIFICIANTLYPO05ABOVERESULTSINDICATED,GROWTHANDDEVELOPMENTOFCLONESISNORMALFROMBIRTHTOL5MONTHAGEPUBERTYANDESTROUSCYCLEOFCLONESARENORMALCLONESCANBESUPEROVULATEDASDONORBYUSINGFSH,ANDPREGNANCYRATEOFEMBRYOTRANSFERISNORMALHAEMATOLOGYANDSERUMBIOCHEMISTRYPARAMETERSOFCLONESARCNORMALKEYWORDCLONEDEARLE,WEIGHANDBODYSIZEBLOOD,REPRODUCTIONCAPABILITY
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簡介:CONSTRUCTIONOFSRTAGENEDELETIONMUTANTSTRAINSOFLISTERIAMONOCYTOGENESANDRESEARCHONSOMEBIOLOGICALCHARACTERISTICSADISSERTATIONSUBMITTEDTOSHIHEZIUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRICULTUREBYWUXUELINGPREVENTIVEVETERINARYMEDICINEDISSERTATIONSUPERVISORPROFMAXUNJUNE,2015
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簡介:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文冰草生態(tài)生物學(xué)及細胞學(xué)初步研究姓名高海娟申請學(xué)位級別碩士專業(yè)草業(yè)科學(xué)指導(dǎo)教師云錦鳳20070501PRIMARYSTUDIESONECOBIOLOGYANDCYTOLOGYOFAGROPYRONCRISTATUMBSTRACT11LESTUDIESONBOTANICAL,EC0BIOLOGICAL,CYTOLOGICALCHARACTERISTICSANDPRODUCEPERFORMANCEOFAGROPYRONCRISTATUMWERECARRIEDOUTON“EXPERIMENTALDEMONSTRATIONBASEFORINDUSTRIALIZINGPRODUCTIONTECHNIQUEOFAGROPYRONCRISTATUM”DURINGTHEYEARSFROM2002TO2004INTHEWESTSUNITEBANNEROFXILINGOL,INNERMONGOLIA.ITPROVIDESBASICDATAANDTECHNICALSUPPORTFORCULTIVATIONANDMANAGEMENTANDSEEDPROPAGATIONOFAGROPYRONCRISTATUMINARIDREON.N璩RESULTSSHOWEDASFOLLOWS1AGROPYRONCRISTATUMISCROSSPOLLINATEDFORAGE.THEREWEREGREATDIFFERENCEAMONGPLANTSWITHINPOPULATIONS.ITHASABOUNDGENETICDIVERSITYINECOTYPEANDLIFCFORMOFROOTSYSTEM,HAIRCHARACTERSOFSEEDLEMMAANDLEAFEPIDERMIS.2ITHASGREATDIFFERENCEINPHENOLOGICALPERIOD,TILLERINGABILITYANDGRASSANDSEEDYIOLDOFAGROPYRONCRISTATUMATDIFFERENTYEARS.THEGROWTHANDDEVELOPMENTAREINFLUENCINGFACTORSONTHEDIFLORENCE.MOISTUREISLIMITINGFACTORONNORMALGROWTHANDDEVELOPMENTANDGRASSANDSEEDYIELD.NLEDRYGRASSYIELDSOF2003ALE4878.30KG/LLIN2ANDSEEDYIELDSOF2003ARE710.07KG/BM2,THEYAREHIGHEST;ITHASWEAKTILLERINGABILITYANDLOWGLASSANDSEEDYIELDIN2002WHICHISTHESECONDYEARGROWING.ITHASLOWGRASSANDSEEDYIELDFORLATEPHENOLOGIEALPERIODANDRETURNINGGREENSTAGEIN2004WHICHISDROUGHTYEAR.3111EROOTS,STEMSANDLEAVESOFAGROPYRONCRISTATUMFORMSPECIALMORPHOLOGYANDSTRUCTURETOADAPTEXTERNALENVIRONMENT.INCROSSSECTIONEDROOTFORM2MIDDLEBANKLAYERNEXTINTERNALBARKLAYERESPECIALSTRUCTUREOFREGULARLYARRAY;EPIDERMISCELLOFSTEMSANDLEAVESHAVEDEVELOPEDTHICKENEDEPIDERM,LEAVESEPIDERMISCOVERSHAIR9ITFORMEDDEVELOPEDVASCULARBUNDLES.4CHROMOSOMESOFAGROPYRONCRISTATUMISTETRAPLOID.ITSKARYOTYPEFORMULAIS2N2822M6SM.NLEKARYOTYPEBELONGTOSTEBBINSLATYPE.KEYWORDSDROUGHTREGION,AGROPYRONCRISTATUM;ECOBIOLOGY,CYTOLOGICALDIROOTEDBYYUNJINFENGDPLICANTFORMASTERDEGREEGAOBAIJUANGRASSLANDSTATURECOLLEGEOFECOLOGYANDENVTRONMENTALOFLNNERMONGOLIAA鰣CULTURALUMVCRSITY,HUHHOT010018,CHIHA
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簡介:上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文大鼠大鼠雌性雌性生殖干細胞建生殖干細胞建系、生物學(xué)特性研究與生物學(xué)特性研究與應(yīng)用應(yīng)用作者姓名周勵學(xué)院BIOX研究院專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)班級A0908092學(xué)號0090809002研究方向細胞生物學(xué)指導(dǎo)教師吳際教授二零一三年十一
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簡介:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬流行性腹瀉病毒細胞感染受體的生物學(xué)特性鑒定姓名李寶賢申請學(xué)位級別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師李一經(jīng)20070620THESTUDYONTHECELLULARRECEPTORFORPORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUSABSTRACTPORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUSPEDVEAASALETHALDIARRHEAINPIGLETSTHATLEADSTOGREATECONOMICL稍S囂INEASTASIA.ITWASREPORTEDTHAT帥INOP叩TIDA辨NAPNISTHERECEPTORFORTRANSMISSIBLEGASTROENTCRITISVIRUSTGEV,HUMANCORONAVIMS229EHCOV229EANDFELINECORONAVIRUSFECOVWHICHALLBELONGTOGROUPICORONAVIRUSINCLUDING∞WELLASPEDMITWASALSOCONFIRMEDPREVIOUSLYTHATPORCINEAMINOPCPTIDASENPAPNCANBINDTOPEDV,ANDANTIPAPNANTIBODIESMAYINHIBITTHECOMBINATION.TOINVESTIGATEWHETHERPAPNISARECEPTORFORPEDV.WEWANSFEETEDMDCKCELLSWITHPORCINEAMINOLXPTIDASEOAPNEDNAANDTHISENABLEDNONSUSCEPTIBLECELLSTOSUPPORTPEDVREPLICATIONANDSERIALVIRALPROPAGATION.MOREOVER,THEINFECTIONWASBLOCKEDBYANTIBODIESAGAINSTPAPN,IMPLIESTHECRITICALROLEOFPAPNDURINGVIRUSENTRY.INADDITION,IMMUNOFLUORESCCNCEASSAYSFORDETECTIONOFPAINANDPEDVANTIGENS,TOGETHERWITHNEUTRALIZATIONASSAYSUSINGANTIBODIESAGAINSTPAPN,F(xiàn)URTHERCONFIRMEDTHECORRELATIONBETWEENPAPNEXPRESSIONANDVIRALMPLIEATIONINPAPNTRANSFEETEDMDCKCELLS.THESERESULTSINDICATETHATPAPNISAF_IINETIONALRECEPTORFORPEDV.KEYWORDSRECEPTOR,PORCINEAMINOPEPTIDASE;PORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUS;COROANVIRTBCANDIDATELIBANXIANSPECIALITYPREVENTIVEVETERINARYMEDICINESUPERVMORPROF.LIYIJING
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簡介:弋7.14,5267分類咎UDC四門L農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文密級學(xué)號豎至QQ堡QQ魚玉米C型細胞質(zhì)雄性不育的分子生物學(xué)研究許珂指導(dǎo)教師姓名榮廷昭哲怒菊院士四川農(nóng)業(yè)大學(xué)教授四川農(nóng)業(yè)大學(xué)申請學(xué)位級別盟±’P業(yè)名稱縫塑塑絲離拙論文提交日期2鯉2笙12目論文答辯日期2QQ2生12目學(xué)位授予單位和日期四刪叁羔£叁堂.生旦旦答辯委員會主席評閱夕。2007年12月PQ川農(nóng)業(yè)人學(xué)博I論義下米C型細胞質(zhì)雄件小育的分了生物學(xué)研究對玉米C型細胞質(zhì)雄性不育系C482及其保持系N482苗期葉片線粒體蛋白質(zhì)、單核期和雙核期花藥線粒體蛋白質(zhì)進行了分離,經(jīng)過考馬斯亮藍染色,得到了重復(fù)性較好的雙向電泳圖譜。PDQUEST軟件分別在苗期、單核期和雙核期的雙向電泳圖譜上可識別約280、260、220個蛋白質(zhì)點,將其中23個重復(fù)性比較好且差異表達在兩倍以上的蛋白質(zhì)點采用基質(zhì)輔助激光解析分離飛行時間質(zhì)譜進行了肽指紋圖譜分析,然后用MASCOT軟件對NCBI數(shù)據(jù)庫搜索,其中7個蛋白質(zhì)點得到了鑒定。這7個蛋白質(zhì)分別是FI.ATP合成酶、ATP合成酶、磷脂酰肌醇.3激酶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶、谷氨酸脫氫酶和電壓依賴陰離子通道蛋白2個點。它們分別參與ATP的合成、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、新生肽段的折疊、氮代謝和線粒體外膜的通透性等??傊疚睦肁FLP和雙向電泳技術(shù)分別對玉米線粒體DNA和線粒體蛋白質(zhì)進行了分析,為闡明玉米C型細胞質(zhì)雄性不育的分子機制奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞玉米;細胞質(zhì)雄性不育;線粒體DNA;AFLP;線粒體蛋白質(zhì)雙向電泳
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簡介:分類號S8148單位代碼10364密級公開學(xué)號11720673安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文豬不完全重編程誘導(dǎo)多能干細胞豬不完全重編程誘導(dǎo)多能干細胞的獲取及獲取及生物學(xué)特性生物學(xué)特性GENERATIONACTERIZATIONOFPCINEPARTIALLYREPROGRAMMEDINDUCEDPLURIPOTENTSTEMCELLS研究生魏超指導(dǎo)教師張運海教授合作指導(dǎo)教師章孝榮教授申請學(xué)位門類級別農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)名稱動物遺傳育種與繁殖研究方向動物胚胎工程所在學(xué)院動物科技學(xué)院答辯委員會主席二零一四年六月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名時間年月日導(dǎo)師簽名時間年月日
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簡介:摘要重組牛、豬和雞P干擾素在CHO細胞中的高效穩(wěn)定表達及其生物學(xué)活性研究摘要I型干擾素對人類和動物病毒感染的免疫防治腫瘤疾病治療等相關(guān)基礎(chǔ)研究具重要意義,并有著廣闊的應(yīng)用前景基因工程重組干擾素技術(shù)具有巨大的優(yōu)越性,但目前廣泛采用的人類和動物I型干擾素重組表達生產(chǎn)系統(tǒng)不僅純化,復(fù)性工藝復(fù)雜,而且其表達產(chǎn)物在結(jié)構(gòu),生物學(xué)活性與真正天然干擾素相比存在明顯差距同時,現(xiàn)有I型干擾素的生物學(xué)活性鑒定與定量分析方法也存在費時,繁瑣,不夠精確,特異性差等一系列缺陷,亟待改進創(chuàng)新針對目前畜禽I型干擾素基礎(chǔ)研究和生產(chǎn)應(yīng)用中存在的問題,本研究建立了便捷、敏感準確特異的干擾素生物學(xué)活性定量分析方法,并構(gòu)建了一系列基因工程哺乳動物細胞系,實現(xiàn)了具有天然活性的牛、豬和雞B干擾素在CHO細胞中的高效、穩(wěn)定表迭,并對它們的生物學(xué)活性進行了研究,為畜禽I型干擾素的基礎(chǔ)研究和生產(chǎn)應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)試驗I基于重組VSVGFP病毒的干擾素抗病毒活性定量分析方法的建立使用表達綠色熒光蛋白GFP的重組水皰性口炎病毒VSVGFP于MDBK細胞上進行干擾素抗病毒活性滴定A、,A此方法在96孔細胞培養(yǎng)板上進行操作,通過GFP檢測定量半數(shù)病毒復(fù)制抑制來替代通過細胞染色定量半數(shù)CPE抑制檢測GFP時,直接加50止裂解液至VSVGFP感染的MDBK細胞上清100止裂解細胞釋放GFP,同時病毒被滅活,然后使用儀器檢測GFP的相對熒光值RFU來定量GFP蛋白的相對含量這與細胞染色方法定量半敷CPE相比,步驟得到極大簡化酚紅對GFP的檢測有影響,于無酚紅培養(yǎng)液中的檢測結(jié)果更敏感、更準確,但GFP無論在舍酚紅還是無酚紅培養(yǎng)液中,其濃度和檢測的RFU值都呈良好的線性相關(guān)使用干擾素標準品,病毒復(fù)制時問對最終抗病毒活性計算值幾乎沒有影響此方法具有良好的重復(fù)性使用標準品,批次內(nèi)和批次間檢測的變異系數(shù)分別為121%和138%,且檢測結(jié)果和基于細胞染色方法的檢測結(jié)果基本吻合此外,細胞形成匯合單層有利于提高最終GFP表達量。從而提高檢測的敏感性和準確|生;GFP于濕盒中4℃保存可穩(wěn)定保存至少1周而不影響檢測結(jié)果試驗Ⅱ基于MX啟動子和螢光素酶報告基因定量檢測雞I型干擾素生物學(xué)活性的研究克隆了雞MX啟動子MXP,并在其下游連接螢光素酶1UCIFERASE,1UC報摘要重組POIFNB的CHO細胞克隆CHOPOIFNB,可在無G418壓力篩選下穩(wěn)定表達至少20代在25CM2的細胞瓶5ML培養(yǎng)液中,重組POIFNB的累積表達水平達到7710’AUML~,每天的表達量可達4,6105AUML4或046AU/個細胞表達的重組POIFNB可以誘導(dǎo)PKL5細胞表達豬MX蛋白,并且能夠激活雞H僅啟動子控制的螢光素酶報告基因的轉(zhuǎn)錄表達,證實其具有天然豬I型干擾素的生物學(xué)活勝此外,其可以完全保護PKL5細胞抵抗LOOOTCIDSO的豬傳染性胃腸炎病毒TGEV和偽狂犬病毒PRV的感染,顯示了良好的臨床應(yīng)用前景試驗V1I重組雞D干擾素在CHO細胞中的高效穩(wěn)定表達及其生物學(xué)活性研究把雞B干擾素CHIFNB的ORF基因亞克隆至真核穩(wěn)定表達栽體PCINEOCHIFN6在高效啟動子CMV控制下表達,并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至CHOKL細胞,篩選出可穩(wěn)定表達重組CHIFNB的CHO細胞克隆CHOCⅫFND,可在無G418壓力篩選下穩(wěn)定表達至少20代在25CM2的細胞瓶5ML培養(yǎng)液中,重組CHIFNB的累積表達水平達到69104AUML1,每天的表達量可迭43104AUML|L或O043AU/個細胞表達的重組CHIFNB可以誘導(dǎo)原代雞胚成纖維細胞CEFS表達雞MX蛋白,并且能夠激活雞H僅啟動子控制的螢光素酶報告基因的轉(zhuǎn)錄表達此外,其還可以完全保護CEFS細胞抵抗1000TCID50的禽流感病毒H5NL亞型強毒株的感染本研究構(gòu)建了能夠?qū)型干擾素效應(yīng)產(chǎn)生螢熒光素報告基因特異應(yīng)答反應(yīng)的MDBK工程細胞系,并建立了快捷敏感,準確、特異的I型干擾素生物學(xué)活性新型定量檢測系統(tǒng)此外,本研究建立的基于CHO工程細胞的I型干擾素生產(chǎn)系統(tǒng)具有一系列突出優(yōu)點首先,CHO很久以前即被批準用于人類和動物臨床應(yīng)用疫苗及細胞生物制品的制備,其安全性已經(jīng)得到充分證明其次,作為哺乳動物細胞表達系統(tǒng),其產(chǎn)物IFND為最接近天然干擾素;同桿狀病毒感染昆蟲細胞系統(tǒng)表達水平相似,但完全避免了后者糖基化修飾等翻譯后加工方式的差異,這對其體內(nèi)生物學(xué)活性及與結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的保持降低抗原反應(yīng)性具有關(guān)鍵意義,并且生產(chǎn)、純化工藝大大簡化,簡單處理甚至不經(jīng)處理即可用于動物L(fēng)占床同病毒刺激組織原代淋巴細胞生產(chǎn)系統(tǒng)相比,干擾素的表達水平大幅度提高,在產(chǎn)物純度,生物安全性及經(jīng)濟成本方面更是后者無法比擬的本研究結(jié)果為深入系統(tǒng)開展病原一宿主之問感染與抗感染天然免疫機制研究及I型干擾素的生產(chǎn)應(yīng)用研究提供了良好的技術(shù)平臺和研究基礎(chǔ)關(guān)鍵詞牛;豬;雞;I型干擾素;桿狀病毒;CHO細胞;表達;H僅生物學(xué)活性III
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簡介:中國林業(yè)科學(xué)研究院博士學(xué)位論文楊樹與潰瘍病菌(BOTRYOSPHAERIADOTHIDEA)互作中的細胞生物學(xué)、活性氧代謝及細胞過敏性反應(yīng)姓名王媛申請學(xué)位級別博士專業(yè)森林保護學(xué)指導(dǎo)教師張星耀梁軍20070701繼續(xù)進行干旱脅迫,研究了干旱與潰瘍病菌共同作用下,楊樹干部潰瘍病害發(fā)生及與樹皮超微結(jié)構(gòu)變化之間的關(guān)系特征。結(jié)果顯示1隨著干旱脅迫程度的增加,2種楊樹潰瘍病害發(fā)生漸趨嚴重;2干旱脅迫下,楊樹樹皮組織細胞發(fā)生質(zhì)壁分離,并隨脅追程度的增加而嚴重;3干旱脅迫下接種病原菌,2種楊樹細胞發(fā)生不同程度的損傷,主要表現(xiàn)為細胞器發(fā)生較大變化,如出現(xiàn)葉綠體腫脹變形、線粒體數(shù)量增多,質(zhì)膜模糊不清等現(xiàn)象;隨接種時間的延長,細胞器受到進一步損傷,葉綠體被膜折皺,嚴重時局部破裂,基質(zhì)外滲,并部分最終解體;4毛白楊中的菌絲主要在細胞間隙中穿行,而北京楊的菌絲除在細胞間隙中生長之外,侵入細胞內(nèi)部也較多,直接導(dǎo)致細胞的解體;5干旱脅迫下細胞的損傷促進了病原菌的侵染,干旱和病原菌的雙重脅迫加劇了病害的發(fā)生程度,并且病原菌侵染對細胞的破壞程度大于水分脅迫。干旱和潰瘍病菌共同作用對于寄主有促進病害發(fā)生和加重病情的作用。3.對過氧化物酶的細胞定位研究發(fā)現(xiàn),無論抗病楊樹還是感病楊樹,接種后均發(fā)現(xiàn)細胞中有過氧化物酶反應(yīng)產(chǎn)物,通過分析發(fā)現(xiàn),毛白楊過氧化物酶的活性不僅明顯高于未接種的對照,也明顯高于接種處理后的北京楊,并且定位更廣泛,在細胞壁、細胞間隙、葉綠體膜、線粒體膜及液泡膜上均有大量定位,而北京楊酶反應(yīng)產(chǎn)物主要分布于細胞壁上,在細胞膜、核膜局部有少量定位,定位范圍及強度均小于毛白楊。毛白楊過氧化物酶產(chǎn)生早,積累量大,北京楊過氧化物酶的積累量明顯低于毛白楊。4.測定了接種潰瘍病菌BOTRYOSPHAERIADOTHIDEA后2種楊樹POPULUSSPP.樹皮中O。.2、H202、超氧化物歧化酶SOD、過氧化物酶POD、過氧化氫酶CAT、抗壞血酸過氧化物酶APX及膜脂過氧化產(chǎn)物丙二醛MDA含量的動態(tài)變化,分析了楊樹與潰瘍病菌互作中活性氧REACTIVEOXYGENSPECIES,ROS的產(chǎn)生、抗氧化酶活性及膜脂過氧化水平的變化規(guī)律及與楊樹抗病性的關(guān)系。結(jié)果顯示,隨接種時間的延長,2種楊樹O。2產(chǎn)生速率和H202含量均有上升趨勢,毛白楊出現(xiàn)了較明顯的“氧化爆發(fā)”,北京楊則不明顯;POD活性持續(xù)上升,毛白楊上升幅度大于北京楊;SOD、CAT活性先上升后下降,北京楊2種酶活性在后期受到的抑制更明顯;APX活性則在2種楊樹中變化較大,毛白楊明顯比北京楊變幅大;MDA含量增加,表明“氧化爆發(fā)”啟動了膜脂過氧化,北京楊在后期MDA含量大幅上升,并且MDA含量與O2產(chǎn)生速率呈顯著正相關(guān)。5.對潰瘍病菌侵染后不同時間的楊樹愈傷組織進行DAPI特異性染色,在熒光顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)接菌后24H,毛白楊部分細胞核表現(xiàn)染色質(zhì)的不均一,核質(zhì)濃縮并“趨邊化”,呈棒形或彎月形,但大多數(shù)細胞核仍為近圓形;接菌48H后,大多數(shù)細胞核形狀Ⅱ
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簡介:南京師范大學(xué)碩士學(xué)位論文兩優(yōu)培九劍葉葉綠體衰退進程中的細胞生物學(xué)特性初探姓名雷華申請學(xué)位級別碩士專業(yè)植物學(xué)植物生理生化指導(dǎo)教師陳國祥20080401摘要均可以觀察到葉綠體中淀粉粒的存在,葉綠體衰退早期淀粉粒的數(shù)目少,且個體較小,到葉綠體衰退中后期淀粉粒數(shù)目增多,體積變大,導(dǎo)致淀粉粒擴展,基粒類囊體膜散亂。本部分觀察結(jié)果表明,兩優(yōu)培九在光合能力上有一定的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢;可能是其高產(chǎn)的生理原因之一。一方面,它細胞內(nèi)葉綠體數(shù)目較多,基粒緊密,片層數(shù)目多;另一方面,其細胞核結(jié)構(gòu)在整個劍葉衰老過程中都相對完整,核出現(xiàn)衰老特征變化比較晚,意味著兩優(yōu)培九可以有較長的光合同化時間。關(guān)鍵詞兩優(yōu)培九;衰老葉綠體;抗氧化系統(tǒng);超微結(jié)構(gòu)Ⅱ
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簡介:CONSTRUCTIONPARTIALBIOLOGICALACTERISTICSOFNCRNARLI60DELETIONSTRAINOFLISTERIAMONOCYTOGENESADISSERTATIONSUBMITTEDTOSHIHEZIUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFTHEDEGREEOFMASTEROFAGRICULTUREBYPENGYELONGPREVENTIVEVETERINARYMEDICINEDISSERTATIONSUPERVISPROFQIAOJUNJUNE2015
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簡介:揚州大學(xué)碩士學(xué)位論文豆科山羊豆屬牧草的細胞生物學(xué)特性研究姓名張新宇申請學(xué)位級別碩士專業(yè)動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)指導(dǎo)教師高洪文劉大林20080601II一揚州大學(xué)碩士學(xué)位論文方山羊豆的大小為赤道軸極軸143135~15O126121~137岬,山羊豆的大小為赤道軸極軸137123~148124106~130岬?;ǚ勰讣毎麥p數(shù)分裂為同時型胞質(zhì)分裂,終變期染色體構(gòu)型為8Ⅱ,沒有出現(xiàn)落后染色體及微核現(xiàn)象。小孢子四分體為四面體型。減數(shù)分裂過程有一定規(guī)律,與花蕾大小,顏色有密切關(guān)系。減數(shù)分裂進程存在一定差異,同一個花蕾中的不同花藥花粉母細胞分裂速度基本相同,所處的時期及觀察的分裂相一致,在同一個花藥中的不同花粉母細胞中,可見各種不同時期的細胞。關(guān)鍵詞山羊豆屬;核型;帶型;花粉母細胞;減數(shù)分裂;花粉形態(tài);孢粉學(xué)
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簡介:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文貓泛白細胞減少癥病毒XJ株的分離及生物學(xué)特性研究姓名蘇潔申請學(xué)位級別碩士專業(yè)動物醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師曲連東20080620ABSTRACTRESEARCHONTHEISOLATIONANDBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFFELINEPANLEUKOPENIAVIRUSXJSTRAINABSTRACTINTHISSTUDYTHEVIRUSINTHEFECESSPECIMENSFROMTHEINTESTINEOFTHECATINXINJIANGPROVINCEWERECOLLECTEDANDPROLIFERATEDONCRFKTHETITEROFTISSUECULTUREINFECTIVEDOSETCIDSOOFTHETHIRDGENERATIONCELLCULTURESWAS10421THETYPICALAPPEARANCEOFPARVOVIMSWITHTHEREALANDAIRCOREDPARTICLESWASOBERSEVEDUNDERELECTRONMICROSCOPETHEDISTINCTIVEFLUORESCENCEWASFOUNDAFTERTHECULTURINGMEDIUMWASRECOGNIZEDBYTHEMCABMONOCLONALANTIBODYOFFPLVTHECATSOFTWOMONTHSOLDWEREINFECTEDANDDIEDINTHESEVENTHDAYAFTERINOCULATEDTHECULTURINGMEDIUMTHEINOCULATEDCATSAPPEAREDTHESPECIFICPATHOLOGICALSYMPTOMSOFINFECTIONBYFPLL譏THEVP2GENEOFTHEVIRUSWASAMPLIFYIEDBYPCRANDWASCONSISTENTWITHFPLVTHEISOLATEDVIRUSWASNAMEDFPLVXJUNDERTHECONDITIONOF4℃,THECULTURINGMEDIUMCANAGGLUTINATETHEREDBLOODOFPIGSANDTHEAGGLUTINATIONWASINHIBITIEDBYTHEFPLVMCABTHETITEROFHEMAGGLUTINATIONOFFPLVXJWAS512WHILE,THECULTURINGMEDIUMCANNOTAGGLUTINATETHEREDBLOODOFRABBITS,CHOOKS,DOGSANDKUNMINGMICETHEFPLVXJPROLIFERATEDINTHEMDCK,BUTNOTINHEMVERO,DF1ANDPK一15THECULTIVATIONCHARACTERISTICOFTHEVIRUSPROLIFERATEDINTHECRFKOBERSEVEDBYIFA24HOURSINTERVALWASTHATTHEVIRUSWASRELEASEDFROMCRFKINTHE6THDAYAFTERQUICKLYMULTIPLICATIEDFOR5DAYSBYSYNCHRONALINOCULATIONTHEPCRPRODUCTSOFVP2ANDNS1GENEWEREAMPLIFYIEDANDSEQUENCEDTHERESULTSHOWSTHATTHEFULLLENGTHVP2GENECONTAINED1755BPWHICHENCODES584AMINOACIDSTHENUCLEOTIDEIDENTITYOFVP2GENESBETWEENTHEFPLVXJSTRAINAND4CPVSTRAINSAND5STRAINSFPLVINTHEGENBANKWASMORETHAN99%BYTHESEQUENCINGANALYSISCORRESPONDINGLY,THEAMINOACIDIDENTITYWAS985%~997%VP2GENEOFTHEFPLVXJSTRAINSDIDIN’TCHANGEREMARKABLYFORNS1GENE,ITCONTAINED2007BPWHICHENCODES668AMINOACIDSHOMOLOGIESOFNUCLEOTIDEANDAMINOACIDSSEQUENCESOFTHENS1GENEBETWEENFPLVXJAND5CPVSTRAINSAND6FPLVSTRAINSWAS987%一993%AND985%993%PHYLOGENETICANALYSISOFNSIGENESHOWTHATTHERELATIONBETWEENTHEFPLVXJSTRAINANDCPVBWASCLOSERTHERESULBIII
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