抑癌蛋白UBIAD1在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上定位信號(hào)的研究.pdf

1、UBIAD1蛋白不僅在生理學(xué)包括維生素K和輔酶Q10的生物合成上發(fā)揮著重要作用,同樣在病理學(xué)上跟許多重大疾病有關(guān),包括角膜脂質(zhì)異常堆積引起的施耐德晶狀體角膜營(yíng)養(yǎng)不良癥,帕金森疾病,心血管疾病以及人類的多種癌癥。由于UBIAD1蛋白在不同的細(xì)胞類型中亞細(xì)胞定位不同,因而確切描述UBIAD1蛋白的亞細(xì)胞定位對(duì)理解人類疾病中UBIAD1蛋白的分子機(jī)制至關(guān)重要。UBIAD1能夠抑制膀胱癌,我們研究了其在膀胱癌細(xì)胞系T24中的亞細(xì)胞定位。由于UB

2、IAD1-EGFP融合蛋白在膀胱癌細(xì)胞系T24和人胚腎細(xì)胞系HEK293中的熒光圖像一致,我們便將HEK293細(xì)胞作為模式細(xì)胞來(lái)研究UBIAD1蛋白在膀胱癌細(xì)胞中的亞定位。聯(lián)合應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡和免疫組化以及蛋白質(zhì)印跡技術(shù),分析發(fā)現(xiàn)UBIAD1在T24和HEK293細(xì)胞系的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中均有積累。定點(diǎn)突變技術(shù)表明UBIAD1蛋白N端的LAY能作為其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)駐留信號(hào)。我們將UBIAD1蛋白的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)駐留信號(hào)LAY突變后,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析發(fā)現(xiàn)T2