大連沿岸海域倒卵形鰭藻與美國(guó)漸尖鰭藻的比較研究.pdf

1、腹瀉性貝類毒素(DSP)主要包括大田軟海綿酸(OA)及其天然衍生物鰭藻毒素(DTXs)，大環(huán)聚醚內(nèi)酯蛤毒素( PTXs)及其衍生物。鰭藻(Dinophysis)是腹瀉性貝類毒素的主要產(chǎn)毒藻種，是世界廣布種，我國(guó)沿海也有分布，但在自然海域鰭藻數(shù)量一般狀況下很少。雖然現(xiàn)今我國(guó)尚未有DSP中毒事件的報(bào)道，但沿海貝類感染DSP的情況嚴(yán)重，有關(guān)部門需要引起重視。本文選取大連近海海域分離的一株鰭藻，通過(guò)光學(xué)顯微鏡對(duì)其形態(tài)學(xué)信息進(jìn)行描述，采取分子生物

2、學(xué)方法分析其序列信息；運(yùn)用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)對(duì)其產(chǎn)毒狀況及毒素組分進(jìn)行定性定量分析；并與美國(guó)株鰭藻進(jìn)行形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)及產(chǎn)毒的對(duì)比分析。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴從形態(tài)學(xué)分析上看，大連近海鰭藻細(xì)胞個(gè)體中等大小，長(zhǎng)約53.8±2.0μm，寬約39.3±2.1μm，外形卵圓形，后體部寬大，細(xì)胞表面有很多網(wǎng)眼結(jié)構(gòu)；美國(guó)鰭藻細(xì)胞呈橢圓形，長(zhǎng)約37.3±2.1μm，寬約24.8±2.1μm，下殼部漸尖，結(jié)合二者分子

3、生物學(xué)分析結(jié)果，鑒定大連近海鰭藻為倒卵形鰭藻(D.fortii)，美國(guó)鰭藻為漸尖鰭藻復(fù)合種(Dinophysis acuminata complex)。⑵通過(guò)溫度對(duì)大連近海倒卵形鰭藻生長(zhǎng)影響的試驗(yàn)及LC-MS毒素分析，在8℃條件下其生長(zhǎng)明顯受到抑制，在22℃條件下生長(zhǎng)率達(dá)到最大；檢測(cè)得到其毒素組分為 OA、DTX1和PTX2，OA的平均含量為10.38~35.58 pg/cell，DTX1的平均含量為8.49~43.56 pg/cell

4、， PTX2的平均含量為91.18~171.16 pg/cell，低溫條件下（8℃）倒卵形鰭藻產(chǎn)生OA、DTX1和PTX2的含量顯著高于相對(duì)較高的兩個(gè)溫度（15℃和22℃）條件下的產(chǎn)毒量，并且在各溫度條件下，PTX2的含量均高于其他兩種毒素。倒卵形鰭藻細(xì)胞的生長(zhǎng)對(duì)毒素的產(chǎn)生具有關(guān)鍵作用，其單位細(xì)胞各毒素組分含量隨細(xì)胞密度的降低而升高。⑶分別比較大連近海倒卵形鰭藻和美國(guó)漸尖鰭藻在三組溫度條件下的生長(zhǎng)變化、產(chǎn)毒種類和含量變化。大連近海倒卵形

5、鰭藻和美國(guó)漸尖鰭藻分別在22℃和15℃達(dá)到各自最大生長(zhǎng)率；兩種鰭藻的毒素組成相同，且大連近海倒卵形鰭藻各組分毒素含量均高于美國(guó)漸尖鰭藻。倒卵形鰭藻在8℃條件下各組分毒素含量明顯上升，22℃條件下美國(guó)漸尖鰭藻OA、DTX1毒素含量顯著升高。⑷大連近海海域倒卵形鰭藻可以產(chǎn)生OA、DTX1和PTX2毒素。溫度能夠影響大連近海倒卵形鰭藻的生長(zhǎng)及產(chǎn)毒，且不同種鰭藻對(duì)溫度的適應(yīng)范圍不同、產(chǎn)毒也存在差異。以上研究是國(guó)內(nèi)首次對(duì)大連近海海域倒卵形鰭藻的生