以環(huán)糊精為主體的多功能新型熒光探針的設(shè)計(jì)、合成及其生物應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、環(huán)糊精(Cyclodextrin)是由直鏈淀粉在葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(CGTase)的作用下生成的一系列環(huán)狀低聚糖的總稱(chēng),通常由α-1,4-糖苷鍵連接6-12個(gè)D-吡喃葡萄糖單元組成。其中研究較多的并且具有實(shí)際意義的是含有6、7、8個(gè)葡萄糖單元的分子,分別稱(chēng)為α、β、和γ-環(huán)糊精。
  環(huán)糊精具有疏水的空腔和親水的表面,可以在水溶液中選擇性結(jié)合各種具有適當(dāng)極性和尺寸的有機(jī)、無(wú)機(jī)以及生物分子形成主-客體或超分子配合物。這種特性使其在化學(xué)和生

2、物學(xué)的許多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,并能夠用于構(gòu)建多種功能性的分子模型以實(shí)現(xiàn)其識(shí)別作用。然而天然環(huán)糊精與模型底物的配位作用一般相對(duì)較弱,所以通過(guò)在其側(cè)臂上引入具有功能性的修飾基團(tuán)可以得到單體環(huán)糊精衍生物和橋連環(huán)糊精(環(huán)糊精二聚體),這些環(huán)糊精的衍生物可以大大提高分子識(shí)別與結(jié)合能力,從而拓展了其應(yīng)用范圍。同時(shí)由于單體環(huán)糊精衍生物以及橋連環(huán)糊精對(duì)某些熒光團(tuán)的熒光具有明顯的增敏作用,所以使其在熒光探針領(lǐng)域備受關(guān)注。
  基于β-環(huán)糊精獨(dú)特的結(jié)構(gòu)

3、和特性,本論文主要開(kāi)展了以下方面的研究:
  設(shè)計(jì)合成了一種新型的基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)原理的自組裝熒光納米探針:巰基乙胺修飾的金納米-賴(lài)氨酸-橋連(β-環(huán)糊精)-熒光素,實(shí)現(xiàn)了在生物體系內(nèi)胰蛋白酶的檢測(cè)。其中賴(lài)氨酸-橋連(β-環(huán)糊精)-熒光素作為能量供體,巰基乙胺(MEA)修飾的金納米(MGNPs)作為能量受體,這兩部分通過(guò)酰胺鍵組建成一個(gè)FRET納米探針,金納米有效地猝滅了熒光素的熒光。在胰蛋白酶存在的情況下,其能夠

4、專(zhuān)一性的水解賴(lài)氨酸與其他物質(zhì)形成的酰胺鍵,所以特異性的切斷了探針的酰胺鍵,從而導(dǎo)致了被猝滅的熒光素?zé)晒饣謴?fù)。探針熒光強(qiáng)度的增加程度與胰蛋白酶濃度的不斷升高成正比?;诖?,構(gòu)建了一種可以直接檢測(cè)并且區(qū)別正常成人血清和急性胰腺炎患者血清中胰蛋白酶含量的方法。而且該納米探針成功地實(shí)現(xiàn)了對(duì)人胰腺癌細(xì)胞中胰蛋白酶濃度變化情況的成像分析。實(shí)驗(yàn)證明探針具有高的靈敏度,好的專(zhuān)一性,對(duì)細(xì)胞的低毒性以及良好的膜穿透性。該檢測(cè)方法為臨床上研究胰腺疾病中胰蛋白

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