典型地域大氣細(xì)粒子對(duì)細(xì)胞毒性和氣道損傷的研究.pdf

1、我國(guó)經(jīng)濟(jì)欣欣向榮，工業(yè)化和城市化進(jìn)程越來(lái)越快，這給環(huán)境造成了嚴(yán)重的污染，其中，大氣污染更是嚴(yán)重影響著人們健康，應(yīng)引起我們的重視，已成為威脅人類健康的主要因素之一。大氣顆粒物對(duì)人體健康的影響非常重要，對(duì)人類健康構(gòu)成極大威脅，是近年來(lái)大氣污染研究關(guān)注的焦點(diǎn)。大氣細(xì)粒子(particulatematter)，特別是可入肺顆粒物（顆粒物直徑小于等于2.5微米，PM2.5），越來(lái)越成為研究顆粒物對(duì)人體健康影響的關(guān)鍵問(wèn)題。本研究主要探討大氣細(xì)粒子對(duì)

2、細(xì)胞毒性及氣道損傷的作用。
　　本研究用玻璃纖維濾膜采集了山東省濟(jì)南市的粒徑在2.5微米的大氣顆粒物，用超純水超聲法提取其全顆粒物并配制成不同濃度，以體外培養(yǎng)的人肺上皮細(xì)胞(Human lung epithelial cells)為研究對(duì)象進(jìn)行染毒處理，并探討不同濃度的顆粒物對(duì)人肺上皮細(xì)胞的毒性作用。采用MTT比色法測(cè)定細(xì)胞的存活率，比色法檢測(cè)細(xì)胞毒性時(shí)釋放的乳酸脫氫酶(LDH)活性;利用X-Gal染色檢測(cè)細(xì)胞的衰老，利用熒光探針

3、DCFH-DA進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)活性氧生成的檢測(cè)。動(dòng)物模型采用Wistar大鼠，隨機(jī)分為四組，每組6只，分別為對(duì)照組（生理鹽水）、低劑量組(2.5 mg/kg)、中劑量組(5.0mg/kg)和高劑量組(10.0mg/kg)，采用一次性氣管滴注染毒法對(duì)4組大鼠進(jìn)行不同濃度的PM2.5肺部染毒，以1 ml/kg作為滴注量標(biāo)準(zhǔn)，染毒結(jié)束24小時(shí)后處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取左肺組織，制作病理切片并觀察病理學(xué)改變，同時(shí)制備右肺的支氣管肺泡灌洗液(BALF)，對(duì)BA

4、LF中的免疫細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，同時(shí)以熒光顯微鏡檢測(cè)肺細(xì)胞活性氧(ROS)含量和線粒體膜電位(MMP)的變化，研究大氣細(xì)粒子對(duì)氣道急性損傷的作用。
　　結(jié)果顯示:(1)不同濃度PM2.5對(duì)人肺上皮細(xì)胞作用24h后，細(xì)胞增殖受到影響。PM2.5低濃度時(shí)促進(jìn)細(xì)胞增殖，而高濃度時(shí)抑制細(xì)胞增殖，當(dāng)PM2.5的濃度較高時(shí)，對(duì)細(xì)胞的毒性作用明顯;隨著PM2.5濃度的升高，細(xì)胞乳酸脫氫酶(LDH)的活性也呈上升趨勢(shì)，且具有明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系;另外，

5、高濃度的PM2.5對(duì)細(xì)胞衰老有促進(jìn)作用。(2)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平隨PM2.5濃度的升高呈持續(xù)上升趨勢(shì)，表明高濃度的PM2.5能誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激。(3)肺泡灌洗液中免疫細(xì)胞分類計(jì)數(shù)結(jié)果顯示中性粒細(xì)胞明顯增多，吞噬細(xì)胞數(shù)量下降，表明高濃度的PM2.5能引起機(jī)體的急性炎癥反應(yīng);大鼠肺細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示，活性氧含量隨PM2.5濃度的升高而明顯增加，線粒體膜電位呈降低趨勢(shì)。(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，染毒組部分動(dòng)物的肺組織肺間質(zhì)變寬變厚，肺間質(zhì)