新型含芘類非共價DNA熒光探針.pdf

1、DNA的識別和檢測對于由基因錯序?qū)е碌母鞣N疾病的診斷具有重要意義。熒光探針目前已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于分子生物學(xué)以及生物化學(xué)的研究。而傳統(tǒng)的DNA熒光探針，如DNA染色劑溴乙錠毒性太大。而新型熒光探針，釕的配合物、TOTO、YOYO等則具有價格昂貴，合成困難，靈敏度低等特點。此外，如何在細(xì)胞成像的過程中，避免生物體自發(fā)熒光的影響，也一直是科學(xué)家長久以來孜孜不倦研究的課題。 在前人的基礎(chǔ)上，為了更好的識別DNA，本論文設(shè)計合成了兩類DNA

2、探針——雙芘類比率型DNA熒光探針和長波長釕的配合物，具體如下： 以己二胺為柔性鏈，以芘及其衍生物為發(fā)色團(tuán)合成了探針Pyl-3，并通過熒光光譜，熒光紫外吸收光譜和黏度測試研究了探針與DNA的結(jié)合方式。發(fā)現(xiàn)探針Py-1，Py-3與DNA為插入結(jié)合，Py-2與DNA為溝槽結(jié)合。在DNA的定量檢測中，探針Py-3表現(xiàn)出較好的比率型效果(最低檢測線達(dá)到0.1μg/mL)。同時我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)增大芘的共軛體系，芘發(fā)色團(tuán)的熒光強(qiáng)度對氧氣敏感的性

3、質(zhì)受到抑制，可提高檢測的靈敏度。其中芘的IAr/IAir為8.1，而Py-3的IAr/IAir為2.2。 以“光開關(guān)”性質(zhì)為基礎(chǔ)，設(shè)計合成了不同配體的探針Rul-4。在DNA的定量檢測中，四種探針不同程度的表現(xiàn)出了“光開關(guān)”的性質(zhì)。其中Ru-1的“光開關(guān)”性質(zhì)最弱，熒光增強(qiáng)僅為1.23倍。而探針Ru-2的“光開關(guān)”性質(zhì)最強(qiáng)，熒光增強(qiáng)16.1倍。這主要是由于配體芘比蒽具有更好的芳香性和平面型，可以使探針Ru-2更好的與DNA結(jié)合，