亞油酸氧化反應(yīng)過程的拉曼光譜分析.pdf

1、脂質(zhì)是一種低溶于水而高溶于非極性溶劑的生物大分子。脂質(zhì)過氧化,作為機(jī)體損傷的一種特殊形式,被認(rèn)為是許多中毒過程的起點(diǎn),甚至可能是致癌、致畸乃至突變的重要環(huán)節(jié)之一。關(guān)于脂質(zhì)過氧化反應(yīng)研究的關(guān)鍵在于過氧化水平的檢測。目前關(guān)于脂質(zhì)過氧化反應(yīng)水平的檢測方法主要有碘量法、硫氰酸鐵法、TBA檢測法、熒光法、化學(xué)發(fā)光法、高效液相色譜法等。分別從底物的消耗、氧化產(chǎn)物的生成角度,間接反映脂質(zhì)過氧化的程度。目前沒有哪一種方法可以全面的對脂質(zhì)過氧化水平進(jìn)行檢

2、測,只能是根據(jù)研究者的實(shí)驗(yàn)條件和目的采用多種方法從多個(gè)角度對脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的程度進(jìn)行檢測。
　　 拉曼光譜分析技術(shù)提供了一種直接研究生物大分子的物理檢測手段。在結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究領(lǐng)域有著獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。拉曼光譜非常適合研究生物大分子,能夠?qū)Υ蠓肿訌?fù)合物中的重要位點(diǎn),提供非常豐富而精確的信息。
　　 亞油酸屬于不飽和脂肪酸,其成分單一,結(jié)構(gòu)簡單,非常適合研究氧化反應(yīng)過程中分子結(jié)構(gòu)的變化。因此本實(shí)驗(yàn)以亞油酸為材料,采用拉曼光譜分析技

3、術(shù)研究亞油酸過氧化反應(yīng)過程中分子結(jié)構(gòu)的變化,研究不飽和脂肪酸的氧化過程并進(jìn)一步研究了紫外輻射對亞油酸氧化過程的影響。本實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容:
　　 (1)亞油酸的拉曼光譜分析,對亞油酸的拉曼光譜進(jìn)行譜峰指認(rèn),并研究了不同波長激光光源對亞油酸拉曼光譜的影響和短時(shí)間352nm激光輻照對亞油酸拉曼光譜的影響。結(jié)果表明亞油酸的拉曼光譜主要由724 cm-1、838 cm-1、908cm-1、972 cm-1、1075 cm-1、1263 cm

4、-1、1439 cm-1、1657 cm-1、2729 cm-1、2854 cm-1、2903 cm-1、3014cm-1構(gòu)成,可以作為亞油酸的特征峰；通過選用不同波長激光光源對樣品檢測發(fā)現(xiàn),514nm的可見激光器作為光源檢測效果更好一些。短時(shí)間的紫外激光輻照處理發(fā)現(xiàn),在所研究的時(shí)間范圍內(nèi)325nm激光照射對亞油酸樣品的拉曼光譜沒有影響,說明拉曼檢測過程檢測激光對樣品的影響可以忽略。
　　 (2)從亞油酸自氧化反應(yīng)產(chǎn)物的生成和反

5、應(yīng)底物的結(jié)構(gòu)變化兩個(gè)角度出發(fā),分別采用TBA法和共軛二烯法與拉曼光譜分析方法監(jiān)測亞油酸自氧化反應(yīng)過程。結(jié)果表明:拉曼光譜技術(shù)能夠用來檢測生物大分子材料的結(jié)構(gòu)變化。隨著自氧化過程的展開,亞油酸的拉曼光譜從峰型和峰強(qiáng)兩方面均存在變化。拉曼光譜技術(shù)能夠彌補(bǔ)TBA法和共軛二烯法的不足,排除了共軛二烯和MDA來源的不確定性,能夠靈敏有效地對不飽和脂肪酸的氧化過程進(jìn)行檢測。
　　 (3)研究紫外輻照對亞油酸過氧化反應(yīng)的影響,結(jié)果表明:紫外輻

6、照加速了亞油酸的氧化,其中劑量為45J/cm2的紫外輻照效果最明顯。經(jīng)15J/cm2、45J/cm2、60J/cm2的紫外輻照使δ(=CH)形變振動(dòng)的標(biāo)志峰1266 cm-1峰的消失時(shí)間由未輻照的72h縮短為48h,經(jīng)劑量為30J/cm2紫外輻照的樣品在反應(yīng)至24h就已經(jīng)消失；v(C=C)和羧酸中C=O的標(biāo)志峰1658 cm-1強(qiáng)度增大時(shí)間提前；=CH中C-H振動(dòng)特征峰3014 cm-1的消失時(shí)間提前了24h,輻照后樣品841 cm-1