順序注射-在線固相萃取分離富集蛋白質(zhì).pdf

1、蛋白質(zhì)是生命的載體。在生命科學(xué)研究中常常需要將微量的蛋白質(zhì)從復(fù)雜基體中分離出來。本實驗從蛋白質(zhì)的分離富集著手,以建立簡便、快速的分離分析方法。
　　 論文第一章主要介紹了與蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)相關(guān)的基本理論以及固相萃取技術(shù)。
　　 第二章以多壁碳納米管為分離富集材料,建立了順序注射-在線分離富集紫外可見分光光度法測定血紅蛋白的方法。實驗中在多壁碳納米管的表面,通過螯合劑吡咯烷二硫代氨基甲酸銨(APDC)與金屬Cd(Ⅱ)連接

2、,處理后的多壁碳納米管柱實現(xiàn)了對血紅蛋白的富集分離。標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白在水溶液中可以完全富集,然后用pH為8的由0.5 mol L-1NaCl和60 mmol L-1咪唑溶液組成的磷酸鹽緩沖溶液即可洗脫,與紫外可見分光光度計聯(lián)用,在波長410 nm處檢測。在最佳實驗條件下,血紅蛋白的富集倍率為10,方法精密度為3.0％(5μg mL-1,n=7),檢出限為0.32μgmL-1,線性范圍為1-10μg mL-1。利用十二烷基硫酸鈉(SDS)-聚

3、丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行檢驗,通過電泳圖得知,血紅蛋白被多壁碳納米管很好的保留并洗脫下來,達(dá)到了預(yù)期的目的。
　　 第三章以蠶絲蛋白為固定相,建立了順序注射-紫外可見分光光度計聯(lián)用在線分離富集細(xì)胞色素C的研究。細(xì)胞色素C在水溶液中即可完全保留在蠶絲蛋白的表面,用1mol L-1 NaCl可以完全洗脫,然后與紫外可見分光光度計聯(lián)用,在波長410nm處檢測。在最佳實驗條件下,細(xì)胞色素C的富集倍率為10,方法精密度為2.5％(5μg m