血漿中尼索地平和雷沙吉蘭定量分析方法研究和應(yīng)用.pdf

1、背景:尼索地平是第二代二氫吡啶類鈣拮抗劑，具有選擇性冠脈擴(kuò)張作用?？诜樟己?，但存在較明顯的肝臟首過(guò)效應(yīng)，故生物利用度很低（約為3.9％～8.4％）；雷沙吉蘭是第二代選擇性單胺氧化酶B抑制劑，臨床主要用于帕金森病的治療。口服后吸收迅速，易于通過(guò)血腦屏障，生物利用度偏低（約36％）。兩者的血藥濃度普遍較低，藥動(dòng)學(xué)研究難度較大。 目的:建立靈敏、專屬、快速的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜定量分析方法，測(cè)定血漿中尼索地平和雷沙吉蘭的濃度，分別用

2、于兩者低劑量制劑的臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究。 方法:測(cè)定人血漿中尼索地平濃度時(shí)，500μL血漿樣品經(jīng)正己烷-二氯甲烷-異丙醇（20：10：1，v/v/v）液-液萃取后，以乙腈-水-甲酸（90：10：0.1，v/v/v）為流動(dòng)相，采用Zorbax Eclipse XDB C8柱分離。采用API4000型三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀大氣壓化學(xué)電離源，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）方式進(jìn)行正離子檢測(cè)。用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z389.2→m/z31

3、5.2（尼索地平）和m/z419.2→m/z343.2（內(nèi)標(biāo)，尼莫地平）。 測(cè)定人血漿中雷沙吉蘭濃度時(shí)，500μL血漿樣品加磷酸鹽緩沖液（pH7）后，經(jīng)正己烷-二氯甲烷-異丙醇（20：10：1，v/v/v）液-液萃取，以乙腈-5 mM醋酸銨-乙酸（40：60：0.05，v/v/v）為流動(dòng)相，Zorbax Extend C18柱分離，通過(guò)API4000型三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀電噴霧電離源，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）方式進(jìn)行正離子檢測(cè)，用

4、于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z172.1→ m/z（117.1+115.1）（雷沙吉蘭）和m/z166.0→m/z148.0（內(nèi)標(biāo)，偽麻黃堿）。 結(jié)果:測(cè)定血漿中尼索地平的線性范圍為0.020～8.00 ng·mL-1，定量下限為0.020 ng·mL-1。日內(nèi)、日間精密度（RSD）均小于7.6％，準(zhǔn)確度（RE）在-3.8％～0.1％之間。單個(gè)樣品色譜分析時(shí)間為3.0 min，應(yīng)用此法每天可以測(cè)試150多個(gè)樣品。受試者單劑量口

5、服2片（相當(dāng)于尼索地平10 mg）尼索地平片后，受試制劑中，尼索地平AUC0-24 h的90％置信區(qū)間為參比制劑相應(yīng)參數(shù)的96.0％～115％，Cmax的90％置信區(qū)間為參比制劑相應(yīng)參數(shù)的71.0％～97.5％，Tmax的非參數(shù)檢驗(yàn)結(jié)果顯示兩制劑無(wú)顯著差異。根據(jù)以上結(jié)果，判定兩制劑具有生物等效性。 測(cè)定血漿中雷沙吉蘭的線性范圍為0.020～50.0 ng·mL-1，定量下限為0.020 ng·mL-1。日內(nèi)、日間精密度（RSD）

6、均小于11.2％，準(zhǔn)確度（RE）在0.1％～6.4％之間。單個(gè)樣品色譜分析時(shí)間為3.6 min，將此方法應(yīng)用于甲磺酸雷沙吉蘭片的藥代動(dòng)力學(xué)研究。結(jié)果表明，受試者口服不同劑量甲磺酸雷沙吉蘭片（以1 mg，2 mg和5 mg雷沙吉蘭計(jì)算）后，雷沙吉蘭的AUC和Cmax值隨劑量的增加成比例增加，基本符合線性藥動(dòng)學(xué)特征，且藥動(dòng)學(xué)行為個(gè)體差異較大。 結(jié)論:本文建立的兩種液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法靈敏，專屬、快速，可分別用于尼索地平和雷沙吉蘭血藥