量子點標記納米微球金黃色葡萄球菌快速檢測方法.pdf

1、近年來，金黃色葡萄球菌引起的中毒事件頻頻發(fā)生，傳統(tǒng)的金黃色葡萄球菌檢測基于微生物培養(yǎng)，雖然相對準確，但是耗時費力，因而急需一種可以靈敏、快速、可靠的檢測金黃色葡萄球菌的方法。現(xiàn)代快速檢測方法中，化學儀器檢測能夠快速、直觀、靈敏的反映檢測結果，實現(xiàn)快速檢測，但是，如何將微生物信號轉變?yōu)榭蓹z測的化學信號就成為檢測過程中相當重要的一步。量子點具有良好的光譜特性和自身優(yōu)點，使其可以替代傳統(tǒng)熒光染料，作為生物熒光探針，本論文使用量子點標記IsdA

2、兔抗抗體，采用注射器與濾膜組合的方式檢測金黃色葡萄球菌，為生物信號的富集提供了一種方法，有助于快速檢測。
　　以巰基乙酸為穩(wěn)定劑，對比一步法和兩步法合成CdTe量子點，一步法明顯優(yōu)于兩步法，最終使用谷胱甘肽為穩(wěn)定劑，一步法合成了熒光強度較佳的CdTe量子點，并進行了紅外表征，紅外吸收圖譜顯示，GSH-CdTe量子點含有羧基及氨基功能基團，可進行下一步的生物應用。
　　重組表達IsdA蛋白，純化，免疫兔子和小鼠，制備多克隆抗體

3、，但是抗血清及抗體效價都不佳。0.1 mM IPTG誘導對數(shù)期的大腸桿菌BL21(DE3)-pET26b-IsdA，成功地表達了IsdA重組蛋白，且為可溶性表達;純化IsdA重組蛋白;免疫兔子和小鼠，制備出多克隆抗體;谷胱甘肽免疫量子點紫外全波長掃描圖顯示，量子點與抗體連接后，量子點的熒光強度增強，表明量子點與抗體連接成功。
　　初步建立了量子點標記IsdA兔抗抗體免疫檢測金黃色葡萄球菌的方法，該法對金黃色葡萄球菌有明顯的特異性吸