選擇性培養(yǎng)基和電化學(xué)方法檢測(cè)大腸桿菌O157-H7及過氧化氫傳感器的制備.pdf

1、食品與環(huán)境中致病微生物是流行性疾病和威脅人類健康的主要根源之一。快速與高靈敏地檢測(cè)致病微生物成為科學(xué)家們研究的重點(diǎn)。在眾多的致病微生物中，大腸桿菌O157:H7是威脅人類健康的主要致病微生物之一，也是食品、環(huán)境檢測(cè)的主要指示細(xì)菌之一。因此大腸桿菌O157:H7的快速、高靈敏檢測(cè)具有重要的意義。
　　在本研究中，我們采用生物學(xué)和電化學(xué)方法設(shè)計(jì)了兩種不同的定性、定量檢測(cè)大腸桿菌O157:H7的實(shí)驗(yàn)方案。同時(shí)，我們還構(gòu)建了一種新穎的、基

2、于多壁碳納米管（MWCNTs）、納米金（AuNPs）和硫堇的檢測(cè)過氧化氫的酶生物傳感器。本論文研究?jī)?nèi)容主要包括以下三個(gè)方面：
　　1、設(shè)計(jì)了一種定性、定量檢測(cè)大腸桿菌O157:H7的選擇性培養(yǎng)基和定量檢測(cè)方法。該培養(yǎng)基的主要成分是乳糖，蛋白胨，牛膽鹽，羧甲基纖維素鈉，氯化鈉和磷酸氫二鉀。大腸桿菌O157:H7在無氧的條件下，能夠把乳糖分解成甲酸，乳酸等酸性產(chǎn)物使培養(yǎng)基的pH降低。通過檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來確定待檢測(cè)樣品中細(xì)菌的濃度

3、。該選擇性培養(yǎng)基被用到牛奶中大腸桿菌O157:H7的檢測(cè)。相比于其它傳統(tǒng)的檢測(cè)大腸桿菌O157:H7的方法，本檢測(cè)方法具有快速、準(zhǔn)確、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。檢測(cè)的細(xì)菌濃度范圍為1cfu/mL-10000cfu/mL。
　　2、生物傳感器因具有很多優(yōu)良的特性而被廣泛地應(yīng)用到食品安全和環(huán)境檢測(cè)中?；诰郾桨繁∧ず图{米金，我們?cè)O(shè)計(jì)了一種能夠特異性檢測(cè)大腸桿菌 O157:H7的免疫傳感器。聚苯胺薄膜通過電沉積的方式修飾到電極上。納米金通過化學(xué)合

4、成的方式合成出來。大腸桿菌O157:H7特異性抗體通過共價(jià)鍵被連接到納米金表面，大腸桿菌O157:H7與抗體結(jié)合到電極表面以后導(dǎo)致電極表面的電阻大大增加，通過檢測(cè)DPV曲線電流的減小間接檢測(cè)大腸桿菌O157:H7濃度。該免疫傳感器修飾步驟簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性和特異性強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，大腸桿菌O157:H7的檢測(cè)范圍是615cfu/mL-3342cfu/mL。
　　3、基于多壁碳納米管、納米金和硫堇構(gòu)建的過氧化氫傳感器。碳管經(jīng)過混酸處理而帶