L-脯氨酸配體交換色譜和四唑基親合色譜固定相的制備及色譜性能.pdf

1、溶質在液相色譜中的分離是在色譜柱中實現(xiàn)進行的，其分離效果與固定相的性能和流動相的性質密切相關。因而，關于固定相的制備，溶質、固定相和流動相相互作用機理的研究一直是色譜領域的熱點研究問題。本論文在對國內外有關配體交換色譜和親合色譜研究成果分析的基礎上，試圖對配體交換色譜的手性拆分進行新的理論探索，并設計合成出一類新型四唑基固定相。全文包括以下三個方面的研究工作： 1．研究了α-氨基酸對映體在L-脯氨酸配體交換色譜固定相上的分離，考

2、察了流動相pH值、鹽濃度、金屬離子濃度及溫度對溶質保留和分離選擇性的影響；并應用計量置換保留模型對配體交換色譜流動相中鹽濃度對溶質保留的影響進行了新的探討。 2．以Fmoc保護的亮氨酸、纈氨酸、丙氨酸、異亮氨酸和苯丙氨酸為原料合成了五種新型的四唑類化合物；將苯丙基四唑脫保護后，鍵合于硅膠表面，合成出了一種新型四唑配體固定相，并螯合上Zn<'2+>，初步研究了該固定相對蛋白質的分離性能和pH值對蛋白質保留的影響。結果表明，該固定相

3、對蛋白質具有一定的分離能力。 3．采用固相合成方法，在硅膠表面上直接生成四唑配體，建立了一種新的合成四唑基固定相的方法。與先合成四唑化合物，再將其鍵合于硅膠表面的合成路線相比，該方法具有操作簡單、省時等優(yōu)點。研究了蛋白質在固定相上的色譜行為和pH值對蛋白質保留的影響。結果表明，在螯合和未螯合Zn<'2+>的四唑固定相上，4種標準蛋白混合物均能得到良好分離，且質量回收率大于93％；蛋白質在這兩種情況下的分離分別屬于螯合色譜和親合色