麥系作物中尿囊素的提取與分析.pdf

1、本文首次對麥系作物中尿囊素進(jìn)行了研究,探索尿囊素提取、提純條件,確定測定尿囊素的方法,研究其羥基自由基的清除能力,并進(jìn)行手性對映體和同分異構(gòu)體的分離。
　　 采用回流法與超聲法進(jìn)行單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn),最佳提取條件為回流法提取試劑為60％的乙醇,料液比1:15,超聲溫度40℃,超聲時間20 min,提取兩次。用HPLC測定其含量、對羥基自由基清除率及手性對映體的拆分,含量與羥基自由基清除率以Kromasil C18為固定相柱,流

2、動相甲醇:水(5:95,V:V)；流速0.5 mL／mim柱溫35℃；手性拆分以卵類粘蛋白手性固定相,流動相甲醇-磷酸二氫鉀(0.01 mol／L)=15:85(V:V),pH4.00;流速0.5 mL／mim柱溫25℃。用自制柱層析裝置純化尿囊素提取液,洗脫劑為氯仿:甲醇(V:V)=1:3、流速2.0 mL／min、進(jìn)樣時間30 s。用紫外分光光度法對尿囊素同分異構(gòu)體進(jìn)行轉(zhuǎn)化。
　　 HPLC測定尿囊素含量變異系數(shù)小于1.1％

3、；回收率95.80％～105.4％；最低檢出限0.5μg／mL；尿囊素含量范圍是77.95～395.05μg／g,含量由高到低依次是遼寧麥麩、遼寧小麥、青稞麩、青稞、山東麥麩、山東小麥、大麥麩、大麥、燕麥麩、燕麥、苦蕎麩、苦蕎、四川麥麩、四川小麥、河套面粉香雪面粉,尿囊素清除羥基自由基清除能力與其含量高低成正比關(guān)系,經(jīng)提純尿囊素的純度80％以上,經(jīng)手性拆分尿囊素對映體完全實(shí)現(xiàn)拆分,分離度為2.750。UV檢測pH1.92～9.0尿囊素為