電子自旋標(biāo)記方法對天青蛋白特征分析.pdf

1、天青蛋白azurin是假單胞桿菌分泌的一種細(xì)胞蛋白，屬于低分子量的蛋白，在生物體內(nèi)起到氧化還原和電子傳遞的作用。以前的研究多局限于其分子構(gòu)象，內(nèi)部結(jié)構(gòu)等方面。最近研究發(fā)現(xiàn)，azurin能夠與腫瘤抑制蛋白p53相復(fù)合，形成的復(fù)合物對腫瘤細(xì)胞的凋亡起到促進(jìn)作用。這一研究發(fā)現(xiàn)使人們對復(fù)合物產(chǎn)生興趣，著手于研究二者復(fù)合之后的理化性質(zhì)和作用機制以及其它方面。但是由于儀器條件所限，一直沒有得到喜人的成果。 我們采用新的方法-電子順磁共振方法

2、對azurin進(jìn)行內(nèi)部構(gòu)象的探索，用自旋標(biāo)記物與天青蛋白進(jìn)行特異性標(biāo)記，在ESR波譜上通過標(biāo)記物的旋轉(zhuǎn)相關(guān)時間τc的變化來體現(xiàn)蛋白內(nèi)部構(gòu)象的變化。從而希望能夠摸索出此儀器對蛋白內(nèi)部研究獨特的優(yōu)越性，進(jìn)而能夠采用此儀器對azurin與p53形成的復(fù)合物進(jìn)行作用機制的研究以及化學(xué)性質(zhì)的探索。實驗證明，在不同的溶劑相中，自旋標(biāo)記的τc不同。在甘油梯度中，隨著甘油梯度的增加，自旋標(biāo)記物的τc也增加。溫度降低，分子內(nèi)部馳豫行為降低。在用鹽酸胍變性