流動注射化學(xué)發(fā)光新方法及應(yīng)用研究.pdf

1、流動注射分析（FIA）是指在熱力學(xué)非平衡條件下，在液流中重現(xiàn)處理試樣或試劑區(qū)帶的定量流動分析技術(shù)?；瘜W(xué)發(fā)光分析法具有靈敏度高、線性范圍寬、儀器設(shè)備簡單等優(yōu)點(diǎn)，將其與流動注射的快速分析和高精度相結(jié)合而形成的流動注射化學(xué)發(fā)光（FI－CL）分析法具有分析速度快、精度高、易于實現(xiàn)自動化等特點(diǎn)，其研究和應(yīng)用越來越廣泛?；谝陨蟽?yōu)點(diǎn)，本文的目的在于通過對流動注射化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行深入研究，擴(kuò)大該方法的應(yīng)用范圍，主要內(nèi)容如下：1）在本實驗室前期研究工作的

2、基礎(chǔ)上，考察了流動注射化學(xué)發(fā)光測定水體的化學(xué)需氧量（COD）的可行性，通過優(yōu)化條件，著重考察并解決了Ag+、Br－離子對在線COD分析測定產(chǎn)生嚴(yán)重影響的問題。試驗結(jié)果表明：本方法線性范圍寬（2.1－600mg/L；r2＝0.998）；靈敏度高，檢出限為2.1mg/L；結(jié)果準(zhǔn)確可靠，回收率在100±10﹪范圍內(nèi)；分別對COD為250mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液以及COD為356.2mg/L的垃圾滲透液進(jìn)行了6次平行實驗，測得其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.6

3、﹪和4.0﹪；與標(biāo)準(zhǔn)方法測定結(jié)果相一致；而且自動進(jìn)樣，易于實現(xiàn)儀器化。用于實際樣品測定，結(jié)果滿意。2）對4-(2-吡啶偶氮)-間苯二酚（PAR）-鐵氰化鉀－魯米諾化學(xué)發(fā)反應(yīng)條件進(jìn)行了重新優(yōu)化，利用PAR能夠與許多金屬離子產(chǎn)生絡(luò)合反應(yīng)的特性，采用該發(fā)光體系分析測定了Ni2+、Cr3+、Zn2+、Mn2+、Co2+金屬離子的線性范圍和檢測限，得到的檢測限分別1.0×10-9mol/L、5.0×10-9mol/L、5.0×10-8mol/L、

4、1.0×10-9mol/L和1.0×10-8mol/L。3）通過研究，首次發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)分子對Luminol-K3Fe(CN)6反應(yīng)有很強(qiáng)的催化效應(yīng)，并使該反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的信號顯著增強(qiáng)。據(jù)此，結(jié)合流動注射研究了幾種蛋白質(zhì)在Luminol-K3Fe(CN)6體系中的化學(xué)發(fā)光行為，并分別優(yōu)化了化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的條件。本法無需標(biāo)記且具有操作簡便，快速，所用儀器簡單，易實現(xiàn)程序化和自動化操作等特點(diǎn)。（1）牛血清白蛋白(BSA)線性范圍：1.5×10

5、-10mol/L－3.8×10-7mol/L；相關(guān)系數(shù)R2＝0.9988；檢出限（S/N＝3）為1.5×10-10mol/L；對于1.0×10-8mol/L牛血清白蛋白測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.0﹪(n=6)。（2）牛血紅蛋白(Hb)線性范圍：1.29×10-6mol/L－5.18×10-10mol/L，相關(guān)系數(shù)R2＝0.9985；檢出限（S/N＝3）為1.2×10-10mol/L；對于5.68×10-9mol/L牛血紅蛋白測定

6、的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)2.7﹪(n=6)。（3）溶菌酶(lysozyme)線性范圍為5.3×10-11mol/L－1.3×10-7mol/L，相關(guān)系數(shù)R2＝0.9943；檢出限（S/N＝3）為9.5×10-12mol/L；對于7.69×10-9mol/L的溶菌酶測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.3﹪（n＝6）。（4）人免疫球蛋白(HIgG)線性范圍為2.5×10-8mol/LL－5.0×10-12mol/L，相關(guān)系數(shù)R2＝0.9945