一、家庭裝潢有害氣體致F-,1-代小鼠ESTR遺傳突變研究二、JWA調節(jié)MIP-1α誘導的MCF-7細胞遷移的研究.pdf

1、室內空氣質量對人體健康的影響是不容忽視的問題。目前我國市場上出售的裝飾材料中，合成材料和化學產品占了很大一部分，因而在許多現代的建筑物中，揮發(fā)性有機物(VOCS)等的濃度不斷升高。而包括甲醛在內的VOCS等不僅僅污染了室內的空氣，它們還在毫無察覺下危害住戶和裝修工人的健康。嚙齒類擴展串聯重復序列(ESTR)DNA是一種包括了4-6個堿基的重復單位的長的串聯序列。它們在種系中是不穩(wěn)定的，會由于插入或缺失了若干個重復單位而產生突變。ESTR

2、為在更小樣本量的實驗小鼠，暴露于更低劑量的誘變劑而進行的誘導突變的檢測提供了有效的遺傳學檢測手段。本研究的目的在于利用ICR實驗小鼠亞慢性暴露于新裝修居室的空氣中以及甲醛的急性吸入染毒模型，研究這些因素對小鼠ESTR位點遺傳穩(wěn)定性的影響。 暴露首日的檢測中發(fā)現，新裝修居室中TVOC、甲醛、苯、氨的濃度分別是對照地的12、3、3.6、3.18倍和IAQ的3.6、22、6.75、1.75倍。對照地的甲醛濃度在10周暴露期間始終低于0

3、.08 mg/m<'3>的空氣質量標準。而新裝修居室中的甲醛濃度一直隨時間而下降，從起始的0.22 mg/m<'3>到10周后的0.084 mg/m<'3>。各組小鼠從首日至16周后交配這段時間體重和身體條件無明顯差異。亞慢性暴露組、急性吸入染毒組小鼠的產仔率和產仔數分別與對照組相比無顯著差別。 通過對親本和子代DNA的SOUthem雜交實驗發(fā)現，與對照組相比，亞慢性暴露與急性甲醛吸入染毒都會提高F<,1>代小鼠Ms6-hm位點

4、的遺傳突變率。通過比對southern雜交實驗結果中子代相比較親代偏移的條帶的來源發(fā)現，亞慢性暴露組和急性吸入染毒組的子代遺傳于父本的條帶的突變率相比較于對照組則分別都有顯著的變化。相反對母本卻沒有影響。 綜上所述，本研究初步探討了新裝修居室中甲醛等揮發(fā)性有機物對ICR小鼠ESTR位點的遺傳突變率的影響。結果表明新裝修的居室中許多空氣質量指標都超過對照和空氣質量標準，而亞慢性空氣暴露和急性的甲醛吸入對小鼠的體重、身體狀況、產仔數

5、和產仔率的都沒有明顯的影響，但顯著增加F<,1>代小鼠ESTR位點的遺傳突變率，并且父本的減數分裂前的生殖細胞是最為敏感的。進一步對污染空氣誘導的ESTR突變的機制的研究，一方面將會進一步完善ESTR這一遺傳學工具的原理，另一方面可以為我們制定更有效和合理的空氣質量標準，保護人體健康提供科學依據。 一些腫瘤細胞表達趨化因子受體，其重要的特性可能與腫瘤細胞的遷移和轉移能力有關。趨化因子及其受體在廣泛的急、慢性炎癥反應、血管生成、免

6、疫調節(jié)、造血祖細胞的增殖調節(jié)、抗腫瘤以及抗HIV-1感染中發(fā)揮重要作用。最近的研究發(fā)現，JM4可以與CCR5共沉淀，同時還對CCR5受體的運輸和膜定位起作用。JM4作為一種廣泛表達的蛋白，與JWA(GenBank：AF070523，1998)有62％序列的同源性。絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)家族與細胞增殖、分化、凋亡和遷移的進程有關。研究發(fā)現JWA可能是一種新的MAPK

7、家族成員，我們先前的研究證實了JWA蛋白是一種新的微管相關蛋白(MAPs)，它與α-和β-微管蛋白結合并共定位。由于MIP-α可以誘導MCF-7細胞的遷移，所以本實驗的主要目的在于研究JWA在MIP-1α可以誘導MCF-7細胞的遷移中的作用以及其中相關的機制。 實驗發(fā)現JWA和CCR5在內源性表達這兩種蛋白的MCF-7細胞內有交互作用，而且JWA和CCR5在細胞內的分布比較類似，并在細胞膜附近共定位。同時實驗還發(fā)現MIP-1α的

8、刺激會使JWA蛋白和CCR5受體的表達上調。24孔的趨化小室用于對不同時間和不同劑量的MIP-1α誘導MCF-7細胞遷移的研究發(fā)現，100 ng/ml的MIP-1α經過24 h能夠最大程度上誘導MCF-7細胞遷移。通過熱變性的MIP-1α和CCR5抗體中和實驗，證實MIP-1α誘導MCF-7細胞的特異性以及MIP-1α誘導遷移主要是通過CCR5受體的。 MIP-1α誘導MCF-7細胞的遷移主要是通過激活MEK-ERK1/2磷酸化級聯的信

9、號通路的。當關閉了JWA的表達后，MIP-1α無法激活MEK-ERK1/2，同時也不能在正常幅度下誘導MCF-7細胞的遷移。而用回復模型發(fā)現，恢復JWA缺陷的MCF-7細胞株的JWA表達以后，MIP-1α又能正常發(fā)揮激活信號通路以及誘導遷移的功能，但如果用JWA磷酸化位點突變的載體做回復模型，依舊不能恢復MIP-1α的相應功能。提示JWA蛋白在該過程中所起的重要作用主要是依賴于其自身的磷酸化位點能正常發(fā)揮作用。 對JWA和CCR