高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)在抗精神病類和抗組胺類藥物中的研究與應(yīng)用.pdf

1、高效液相色譜是現(xiàn)代儀器分析應(yīng)用最廣泛的一種分析方法，具有分離效能高、選擇性好的優(yōu)點(diǎn)。在高效液相色譜的裝置中，檢測(cè)器起著重要的作用，常用的檢測(cè)器主要有紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器等。
　　共振瑞利散射是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來(lái)的一種新的光譜分析方法。因其方法簡(jiǎn)便、分析速度快，最重要的是靈敏度極高，因而獲得科研工作者的廣泛關(guān)注。但是共振瑞利散射的選擇性不夠高，容易受復(fù)雜基質(zhì)的干擾，對(duì)于結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)很難進(jìn)行有效分析檢測(cè)。因此，

2、高效液相色譜與共振瑞利散射的聯(lián)用一方面可以利用高效液相色譜的分離效能高的優(yōu)勢(shì)彌補(bǔ)共振瑞利散射選擇性不足的缺點(diǎn)，同時(shí)發(fā)揮共振瑞利散射靈敏度高的優(yōu)勢(shì)。另一方面也可以促進(jìn)液相色譜的進(jìn)一步發(fā)展。本文的主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　1.高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)人體尿液中的六種抗精神病類藥物
　　本文建立了一個(gè)高靈敏度和高選擇性地檢測(cè)六種抗精神病類藥物的新方法-高效液相色譜聯(lián)用共振瑞利散射光譜法。六種藥物分別為鹽酸多塞平(Dox

3、epin hydrochloride)、鹽酸異丙嗪(Promethazine hydrochloride)、鹽酸阿米替林(Amitriptyline hydrochloride)、鹽酸丙咪嗪(Imipraine hydrochloride)、鹽酸氯丙嗪(Chlorpromazine hydrochloride)和鹽酸氯米帕明(Clomipramine hydrochloride)。實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相為乙腈：0.1％三乙胺(用磷酸調(diào)節(jié)pH為3.1

4、)=40:60，柱溫35℃，流速為0.4mL·min-1。六種藥物經(jīng)過(guò)高效液相色譜的分離后依次進(jìn)入柱后衍生裝置，然后在pH4.2的BR緩沖溶液中與赤蘚紅(Erythrosine)結(jié)合形成1:1離子締合物，從而導(dǎo)致共振瑞利散射信號(hào)顯著增強(qiáng)。本文對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了一系列優(yōu)化，包括檢測(cè)波長(zhǎng)、流速、反應(yīng)溫度、反應(yīng)管長(zhǎng)等。并且采用量子化學(xué)計(jì)算，掃描電鏡、吸收光譜等對(duì)反應(yīng)機(jī)理進(jìn)行了探討。在最優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，六種藥物的檢測(cè)限為0.42～21.05ng

5、·mL-1。線性相關(guān)系數(shù)均高于0.9916。該方法用于測(cè)定人體尿液中六種藥物的加標(biāo)回收率，結(jié)果令人滿意。最后，該方法成功的應(yīng)用于檢
　　測(cè)病人尿液中的鹽酸丙咪嗪的含量。
　　2.高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)人體尿液中的抗組胺類藥物
　　經(jīng)過(guò)高效液相色譜分離后的三種抗組胺藥菲尼拉敏(Pheniramine)、撲爾敏(Chlortrimeton)和苯海拉明(Diphenhydramine)依次進(jìn)入柱后衍生系統(tǒng)，在

6、pH4.0～4.6的BR緩沖溶液中，上述三種藥物與虎紅(Acid Red94)結(jié)合形成1:1的離子締合物，導(dǎo)致共振瑞利散射信號(hào)的顯著增強(qiáng)。基于此原理，我們建立了高效液相色譜法聯(lián)用共振瑞利散射光譜法檢測(cè)上述三種抗組胺藥的新方法。本實(shí)驗(yàn)采用菲羅門Luna C8色譜柱進(jìn)行分離，分離流速為0.4mL·min-1,柱溫35℃，進(jìn)樣量20μL。實(shí)驗(yàn)對(duì)柱后反應(yīng)條件包括BR緩沖溶液流速、虎紅溶液流速、檢測(cè)波長(zhǎng)、反應(yīng)酸度、反應(yīng)溫度等一系列反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)

7、化，采用摩爾比法和等摩爾連續(xù)變化法測(cè)定了締合物的組成比，探討了共振瑞利散射增強(qiáng)的原因。三種藥物在一定濃度范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系，在最佳的反應(yīng)條件下得出菲尼拉敏、撲爾敏、苯海拉明三種藥物的檢測(cè)限分別為29.71、8.49、36.75ng·mL-1。最后該方法成功的應(yīng)用于檢測(cè)人體尿液中三種藥物的含量并獲得了滿意的結(jié)果。
　　3.米托蒽醌與赤蘚紅相互作用的共振瑞利散射光譜、熒光光譜及其分析應(yīng)用
　　米托蒽醌(Mitoxantr

8、one)屬于蒽環(huán)類抗癌藥物，具有突出的療效和較低的心臟毒性，在臨床上應(yīng)用廣泛。米托蒽醌在2000年通過(guò)了美國(guó)食品和藥物管理局(FDA)的認(rèn)證。赤蘚紅有著微弱的共振瑞利散射信號(hào)和較強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，當(dāng)其與米托蒽醌結(jié)合形成離子締合物后，導(dǎo)致體系共振瑞利散射信號(hào)的顯著增強(qiáng)和熒光猝滅?；诖嗽?，我們建立了共振瑞利散射法和熒光猝滅法檢測(cè)米托蒽醌的新方法。相比于熒光猝滅法，共振瑞利散射法的靈敏度更高。因此，共振瑞利散射法更適于微量及痕量米托蒽醌濃度的

9、檢測(cè)。
　　本文對(duì)一些列反應(yīng)條件諸如酸度，赤蘚紅濃度，反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化。并且對(duì)赤蘚紅與米托蒽醌的結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)合方式進(jìn)行了探討，結(jié)果表明米托蒽醌通過(guò)靜電引力和疏水作用力與赤蘚紅結(jié)合而形成1:2的離子締合物。在最優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下得到共振瑞利散射法和熒光猝滅法的線性范圍分別為0.03～3.0μg·mL-1和0.1～1.5μg·mL-1,線性相關(guān)系數(shù)R分別為0.9991和0.9989。檢測(cè)限分別為2.1和15.0ng·mL-1。最后共振