運用光譜學及2D手段研究含有輔因子FMN的AzoR.pdf

1、印染廢水是當今主要水污染源之一，關(guān)于其中偶氮染料的處理是重點也是難點。除了通過的傳統(tǒng)的物理化學方法外，生物酶降解也是一種高效、無二次污染的方法。本論文關(guān)注的偶氮類還原酶就是一類含有FMN輔因子、廣泛存在于各種細菌、真菌，以及人體胃腸道菌群內(nèi)的酶，它能將偶氮染料還原成芳胺類化合物。目前，對于偶氮還原酶的研究主要集中在微生物篩選、結(jié)構(gòu)解析、催化機理研究以及蛋白質(zhì)工程改造等方面。本文選擇了來自大腸桿菌的偶氮還原酶 AzoR及其 R59G突變體

2、作為研究對象，它是一類含有FMN的同源二聚體。我們在原核表達獲得水溶性蛋白的基礎上，首先運用吸收、熒光光譜學手段、并結(jié)合二維（2D）處理方法研究了稀釋效應，發(fā)現(xiàn)稀釋并不會誘導二聚體解聚，但稀釋過程形成了一些中間體，各中間體中 FMN的微環(huán)境存在差異；其次，針對酶和底物結(jié)合的相關(guān)信息缺乏的狀況，我們借助熒光光譜學手段研究了AzoR與底物結(jié)合的結(jié)合常數(shù)等信息；同時，運用THz光譜學手段研究了酶和底物的相互作用，獲得了一些初步結(jié)果；此外，還運