載多柔比星聚肽自組裝體的構(gòu)建及其體外抗腫瘤研究.pdf

1、癌癥與心血管疾病和糖尿病并稱嚴重危害人類健康的三大殺手。單獨使用化療藥物或與手術(shù)或放療聯(lián)用，目前依舊是臨床上腫瘤常規(guī)療法。但是，化療藥物應(yīng)用于臨床面臨諸多困難與挑戰(zhàn)，例如溶解度低，在肝臟中快速降解或在腎臟中快速排泄，在腫瘤部位達不到有效治療血藥濃度導(dǎo)致生物利用度低;藥物缺乏選擇性和使用各種賦形劑和溶劑引起嚴重的毒副反應(yīng)，在一定程度上制約了化療藥物的在臨床上應(yīng)用。解決方案之一即將藥物做成納米制劑。納米制劑具備較好的物理化學(xué)性能和體內(nèi)緩控釋

2、特性;避免藥物在體內(nèi)循環(huán)降解失活;通過實體瘤的高通透性和滯留效應(yīng)（EPR效應(yīng)）達到被動靶向作用等優(yōu)點。
　　自組裝嵌段在眾多藥用材料中作為藥物傳遞系統(tǒng)越來越引起研究者的興趣。一般而言，兩親性聚肽由親水性聚乙二醇嵌段(PEG)和疏水聚氨基酸(PAA)嵌段構(gòu)成，在水溶液可自發(fā)聚集。聚合作用合成的聚肽與天然蛋白質(zhì)具有相似的化學(xué)性質(zhì)，具備良好的生物相容性和生物可降解性。疏水性藥物可以通過物理包埋在疏水內(nèi)核中或者通過化學(xué)鍵與嵌段絡(luò)合形成載藥

3、納米制劑。除此之外，研究者發(fā)現(xiàn)，帶有電荷的一些化合物(DNA、質(zhì)粒、順鉑)可以荷相反電荷的兩親性聚肽通過靜電作用絡(luò)合，自組裝形成核-殼式納米結(jié)構(gòu)。
　　基于以上研究，我們實驗室研究了一種新型的陰離子兩親性聚肽聚乙二醇-聚谷氨酸mPEG-PGA為納米載體，mPEG-PGA是一種人工全合成的、生物可降解、生物相容性良好的兩親性聚肽。此外，聚谷氨酸作為陰離子聚合物其側(cè)鏈含有含有游離的羧基?？梢酝ㄟ^靜電作用或者螯合作用與荷正電的藥物聚合。

4、因此，為荷正電的抗癌藥物提出了一種理想的載藥策略，載藥過程簡單，避免了有機試劑的引入，確保病人用藥安全。
　　鹽酸多柔比星屬于蒽環(huán)類抗生素細胞毒藥物，可用來治療多種癌癥。但是，嚴重的心臟毒性、骨髓抑制、腎毒性和多藥耐藥嚴重的限制了鹽酸多柔比星在臨床上的應(yīng)用。鹽酸多柔比星為兩親性弱堿(pKa=8.3)，既可以以質(zhì)子化形式存在也可以去質(zhì)子化形式存在，調(diào)節(jié)外環(huán)境pH值，鹽酸多柔比星親疏水性變化且?guī)в胁煌姾伞?br>　　因此，本課題提出

5、一種基于靜電作用的藥物傳遞系統(tǒng)，由荷負電的兩親性聚肽mPEG-PGA和荷正電的鹽酸多柔比星為研究對象。兩親性聚肽mPEG-PGA通過開環(huán)聚合反應(yīng)由實驗室自主合成，其中，mPEG可延長藥物體內(nèi)循環(huán)時間，PGA側(cè)鏈游離羧基顯負電，通過正負電荷相互吸附，荷正電藥物DOX·HC1與mPEG-PGA生成高分子離子交聯(lián)聚合物mPEG-PGA-DOX，通過靜電作用和疏水間分子作用力在水溶液自發(fā)聚集形成長約300nm左右，Zeta電勢為-15.9 mV

6、的納米棒，載藥納米棒具備較高的載藥量(50.8％)和包封率(90.2％);體外釋放實驗表明，與鹽酸多柔比星原料藥相比，載藥納米棒釋放緩慢并且具備pH敏感性，載藥納米棒在酸性環(huán)境下釋放較快;人乳腺癌細胞MCF-7和人肺癌細胞A549體外細胞毒性實驗表明，載藥納米棒抗腫瘤活性優(yōu)于原料藥;細胞攝取實驗表明載藥納米棒均可以被MCF-7和A549細胞攝取入胞，尤其在A549細胞系中，載藥納米棒更易被A549腫瘤細胞攝取入胞;溶血實驗表明人工合成的