嗜淀粉乳桿菌和糞腸球菌的分離鑒定及其在斷奶仔豬上的應(yīng)用效果的研究.pdf

1、本試驗(yàn)旨在從生長豬回腸、結(jié)腸、盲腸中分離共生及中間型菌種，進(jìn)行體外生理生化試驗(yàn)的研究，選擇氮利用高的菌種-嗜淀粉乳桿菌（Lactobacillus amylovorus，LA）和糞腸球菌（Enterococcus faecalis，EF），研究嗜淀粉乳桿菌和糞腸球菌對(duì)斷奶仔豬的生產(chǎn)性能、免疫功能、抗氧化功能及腸道微生物區(qū)系的影響。本論文包括以下兩部分研究內(nèi)容：
　　研究內(nèi)容一：試驗(yàn)選取60 d健康生長豬一頭，屠宰后無菌收集回腸、結(jié)

2、腸、盲腸內(nèi)容物進(jìn)行梯度稀釋。經(jīng)37℃厭氧培養(yǎng)24 h后，在顯微鏡下觀察形態(tài)，根據(jù)不同形態(tài)進(jìn)行標(biāo)記，提取菌種DNA，進(jìn)行16 sRNA測序。得到嗜淀粉乳桿菌（Lactobacillus amylovorus，LA）、羅伊氏乳桿菌（Lactobacillus reuteri）、糞腸球菌（Enterococcus faecalis，EF）和大腸桿菌（Escherichia coli）。對(duì)4種微生物進(jìn)行體外生理生化試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)嗜淀粉乳桿菌

3、（LA）和糞腸球菌（EF）具有耐酸、耐高溫、耐高銅、抑菌特性，同時(shí)兩種益生菌均具有降低脫羧酶的活性。
　　研究內(nèi)容二：基于研究內(nèi)容一的結(jié)果，進(jìn)一步研究LA和EF在斷奶仔豬上的應(yīng)用效果。試驗(yàn)選取胎次相近的健康三元雜交去勢28日齡斷奶仔豬（（榮昌豬）×長×大）40頭，按試驗(yàn)?zāi)康碾S機(jī)分為4個(gè)處理，每個(gè)處理10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬，單欄飼養(yǎng)。試驗(yàn)采用雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分為4個(gè)處理：對(duì)照（CON）組；嗜淀粉乳桿菌（LA）組（1×1010 C

4、FU，每天3次）；糞腸球菌（EF）組（1×1010 CFU，每天3次）；嗜淀粉乳桿菌+糞腸球菌（LA+EF）組（各1×1010 CFU，每天3次）。試驗(yàn)結(jié)果表明：口服嗜淀粉乳桿菌和糞腸球菌后，顯著提高了斷奶仔豬末重、平均日采食量、平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率（P＜0.05）；口服嗜淀粉乳桿菌顯著提高了胸腺指數(shù)、胰臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、淋巴結(jié)指數(shù)和空腸長度指數(shù)（P＜0.05）；斷奶仔豬口服嗜淀粉乳桿菌和糞腸球菌后，顯著提高了T-SOD、GSH-PX

5、的活力（P＜0.05），顯著降低了MDA的活力（P＞0.05）；嗜淀粉乳桿菌和糞腸球菌具有顯著降低仔豬尿的pH的作用（P＜0.05）。糞腸球菌和嗜淀粉乳桿菌在提高機(jī)體免疫功能方面作用顯著，顯著提高了β-defensin-2、TLR4的表達(dá)（P＜0.05），顯著降低了HSP90的表達(dá)（P＜0.05）；嗜淀粉乳桿菌和糞腸球菌對(duì)腸道微生物脫羧酶的影響上互作效應(yīng)顯著（P＜0.05），顯著降低了結(jié)腸微生物中賴氨酸脫羧酶、蛋氨酸脫羧酶、蘇氨酸脫羧酶

6、、色氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶和組氨酸脫羧酶的活性（P＜0.05）。兩種益生菌沒有改變結(jié)腸內(nèi)的優(yōu)勢菌群組成，但提高了盲腸微生物的相對(duì)豐度。嗜淀粉乳桿菌降低了盲腸中腸桿菌、梭狀芽孢桿菌的相對(duì)豐度，提高了乳酸菌、韋榮球菌、毛螺科菌屬的相對(duì)豐度。
　　綜上所述，嗜淀粉乳桿菌和糞腸球菌具有改善動(dòng)物生產(chǎn)性能、提高機(jī)體免疫力、保護(hù)肝臟的作用，在不改變腸道優(yōu)勢菌群組成的情況下，提高了盲腸中部分有益菌的豐度，降低了一些有害菌的豐度，起到了維持腸道微