gb 13087-1991 飼料中異硫氰酸酯的測定方法

1、中 華 人 民 共 和 國 國 家 標 準飼料中異硫氮酸醋的測定方法 G B 1 3 0 8 7 一 9 1Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f i s o t h i o c y a n a t e si n f e e d s， 主 題 內(nèi) 容 與 適用 范 困本標準規(guī)定了配合飼料和菜籽餅粕中 異硫氰酸醋的測定方法。本標準適用于配合飼料( 包括混合飼料) 和菜籽取油后

2、的 餅粕中異硫氰酸醋的測定 。第一篇 氣相色譜法2 原理配合飼料中存在的硫葡萄搪昔， 在芥子酶作用下生成相應(yīng)的異硫氰酸酷， 用二氯甲 烷提取后再用氣相色譜進行測定。3 試劑和溶液除特殊規(guī)定外， 本標準所用試劑均為分析純， 水為蒸餾水或相應(yīng)純度的水。3 . 1 二氯甲 烷或氯仿( G B 6 8 2 ) .3 . 2 丙酮( G B 6 8 6 ) ,3 . 3 p H 7 緩沖液: 市 售或按下法 配制。 量取3 5 . 3

3、m L O . 1 m o l / L 檸檬酸( C 6 H e 0 c “ H 2 0 ) 溶液， 置入2 0 0 m L定容瓶中， 用0 . 2 m o l / L 磷酸氫二鈉( N a 2 H P O , “ 1 2 H 2 0 , G B 1 2 6 3 ) 稀釋至刻度， 配制后檢查p H值。3 . 4 無水硫酸鈉。15 酶制劑: 將白芥( S i n a p i s a l b a L . ) 種子( 7 2

4、 h內(nèi)發(fā)芽率必須大于8 5 ， 保存期不超過兩年) 粉碎后， 稱取1 0 0 g ， 用3 0 0 m L 丙酮( 3 . 2 ) 分1 0 次脫脂， 濾紙過濾， 真空干燥脫脂白 芥子粉， 然后用4 0 0 m L 水分兩次 提取脫脂粉中的 芥子酶， 離心， 取 上層混懸 液體， 合并， 于合并 混懸液中 加入4 0 0 m L 丙酮( 3 . 2 ) 沉淀芥子酶， 棄去上清液， 用丙酮( 3 . 2 ) 洗沉淀5 次， 離心

5、， 真空干燥下層沉淀物， 研磨成粉狀， 裝入密閉容器中， 低溫保存?zhèn)溆茫?此制劑應(yīng)不含異硫氰酸醋。3 . 6 丁基異硫氰酸酷內(nèi) 標溶液: 配制0 . 1 0 0 m g / m L丁基異硫氰酸酷C C H , ( C H 2 ) , N C S 〕 二氯甲 烷或氯仿( 3 . 1 ) 溶液， 貯于4 ' C ， 如 試樣中異 硫氰酸酷含量較低， 可將上述溶液稀釋， 使內(nèi) 標丁基異硫氰酸醋峰面積和試樣中異硫氰酸酷峰面積相接

6、近。4 儀器、 設(shè)備氣相色譜儀: 具有氫焰檢測器。氮氣 鋼瓶: 其中 氮氣純度為9 9 . 9 9 0 0 0微量注射器: 5 p L , 分析天平: 感量 。 . 0 0 0 1 g .4 14 24 . 34國家技術(shù)監(jiān)督局 1 9 9 1 一 0 7 門 6 批準 1 9 9 2 一 0 4 一 0 1 實施G B 1 3 0 8 7 一 9 1了 . 3 重復(fù)性同一分析者對同一試樣同時或快速連續(xù)地進行兩次測定， 所得結(jié)果之

7、間的差值;在異硫 氰酸酷含量小 于或等于1 0 0 m g / k g 時， 不 超過平均值的1 5 0 0在異硫氰酸酷含量大于1 0 0 m g / k g 時， 不超 過平 均值的1 0 0 0 0第二篇 銀t法8 原理菜 籽餅粕中 存在的 硫葡萄 糖昔， 在芥子酶作用 下可生 成相應(yīng)的異 硫氰酸醋。 用 水氣蒸出 后再用硝 酸銀一 氫氧化鐵溶液吸收而生成相應(yīng)的衍生硫脈。 過量的硝酸銀在酸性條件下以硫酸鐵按為指示劑用硫氰酸鐵回滴

8、， 再計算出異硫氰酸醋的含量。9 試荊和溶液除特殊規(guī)定外， 本標準所用試劑均為分析純， 水為蒸餾水或相應(yīng)純度的水。9 . 1 乙醉( G B 6 7 9 ) : 9 5 %( V / V) 。9 . 2 去泡 劑: 正辛醉( C s H , 7 0 H ) , 9 . 3 6 m o l / L 硝酸溶液: 量取1 9 5 m L 濃 硝酸( G B 6 2 6 ) ， 加 水稀釋 至5 0 0 m L o9 . 4 1 0

9、 0 o 氫氧化按溶液: 取氨水( 3 0 0 o , G B 6 3 1 ) 1 0 0 m L ， 加 2 0 0 m L 水混勻。 9 . 5 硫 酸鐵按溶 液: 稱 取1 0 0 g 硫酸 鐵按( N H , F e ( S O , ) Z “ 1 2 H , O , G B 1 2 7 9 ) , 溶于 5 0 0 m L 水中。 9 . 6 0 . 1 m o l / L ' 硝酸銀標準溶液: 準確

10、稱取在硫酸干燥器中 干燥至恒重的基準硝酸銀1 6 . 9 8 7 g ， 用水溶解后加水定容至1 0 0 0 m L , 置棕色瓶中 避光保存。9 . 7 0 . 1 m o l / L 硫氰酸按標準貯備液: 稱取7 . 6 g 硫氰酸 按( N H , C N S , G B 6 6 0 ) , 溶于1 0 0 0 m l水中。按下法標定: 準確量取1 0 . 0 0 m L o . 1 m o l / L

11、硝酸銀標準溶液( 9 . 6 ) ， 加1 m L硫酸鐵按( 9 - 5 ) 指示劑和2 . 5m L 6 m o l / L 硝酸( 9 . 3 ) ， 搖動下用0 . 1 m o l / L 硫氰酸按標準貯備液滴定， 終點前搖動溶液至完全清亮 后， 繼續(xù)滴定至 溶液所呈淡棕 色保 持3 0 : .硫氰酸按標準貯備液的摩爾濃度按式( 2 ) 計算:N_N , “ V , . . . . . . . . . ? ? 。

12、二。 ? 。 。 . 。 . · · · · · ? ? (2)式中: N— 硫氰酸錢標準貯備液摩爾濃度， m o l / L ;N, — 硝酸銀標準溶液摩爾濃度， m o l / L ;V ， 一一 硝酸銀標準溶液的用量， m L ;V— 消耗硫氰酸錢標準貯備液的體積， m L ,9 . 8 0 . 0 1 m o t / L硫氰酸錢標準工作液: 臨用前將。1 m o l / L

13、硫氰酸按標準貯備液( 9 - 7 ) 用水稀釋1 0倍， 搖勻9 . 9 p H 4 緩沖液: 稱取4 2 g 檸檬酸( C s H , O , “ H } O ) , 溶于1 L 水中， 用濃氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)p H至4 ,9 . 1 0 粗酶制劑: 取白芥( S i n a p i s a l b a L) 種子( 7 2 h內(nèi) 發(fā)芽率必須大于8 5 0 o ， 保存期不得超過兩年) ，粉碎后用冷石油醚( 沸程4 0 -6