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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文線紋芋螺O-超家族毒素S6.7、S6.9的結(jié)構(gòu)與功能初探姓名:周亮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物技術(shù)指導(dǎo)教師:任政華20100606濃度的變化,探討了芋螺毒素對(duì)P C I 2 細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)理。結(jié)果表明,s 6 .7 能顯著抑制P C I 2 細(xì)胞內(nèi)鈣離子的上調(diào),而S 6 .9 則作用不顯著。從細(xì)胞內(nèi)離子濃度水平闡述了S 6 .7 及S 6 .9 在抗傷害感受方面的作用。利用半定量P C R 技術(shù)探討了S
2、 6 .7 及S 6 .9 對(duì)疼痛相關(guān)標(biāo)志基因c - f o s 表達(dá)量的影響。結(jié)果顯示s 6 .7 能顯著抑制由0 .6 %醋酸誘導(dǎo)的, - f o s 的上調(diào)作用,而s 6 .9則作用不明顯。從基因水平闡述了S 6 .7 及S 6 .9 在抗傷害感受方面的作用。利用小鼠熱板及福爾馬林致痛等一系列動(dòng)物疼痛模型實(shí)驗(yàn)對(duì)S 6 .7 及S 6 .9 的鎮(zhèn)痛活性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。結(jié)果表明,S 6 .7 抗傷害感受方面具有一定的活性。而S 6 .
3、9 的鎮(zhèn)痛活性并不明顯。另外,斑馬魚神經(jīng)毒性實(shí)驗(yàn)表明S 6 .7 的神經(jīng)毒性較M V I I A 為低,S 6 .7 有望開發(fā)成為一種副作用較小的鎮(zhèn)痛新藥。綜上所述,本研究基于對(duì)兩種新發(fā)現(xiàn)的芋螺毒素結(jié)構(gòu)與功能的研究,建立了融合表達(dá)及純化工藝、三維模擬及圓二色譜預(yù)測(cè)鑒定結(jié)構(gòu)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、半定量P C R 檢測(cè)疼痛相關(guān)標(biāo)志基因等一系列研究芋螺毒素的方法,為本實(shí)驗(yàn)室同后快速研究芋螺毒素提供了平臺(tái),也為該類毒素藥用價(jià)值的開發(fā)
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