2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文氧應(yīng)激狀態(tài)與心房kv1.5通道表達(dá)及功能改變在心房顫動發(fā)生機(jī)制中的作用姓名:王春申請學(xué)位級別:博士專業(yè):外科學(xué)指導(dǎo)教師:谷天祥20061001材料和方法一、研究對象本實驗標(biāo)本取自風(fēng)濕性心臟病接受心臟瓣膜置換手術(shù)患者的右心耳組織,根據(jù)患者基本心律將標(biāo)本分為心房顫動組和竇性心律組。二、研究方法1 、R T - P C R 研究k v l .5 通道和氧化還原酶在心房肌細(xì)胞的表達(dá)情況采用T r i z o l 法提取心

2、肌組織標(biāo)本的總R N A ,二步法R T - P C R 試劑盒首先逆轉(zhuǎn)錄合成c D N A ,再進(jìn)行k v l .5 通道、含黃素單加氧酶一1 ( f l a v i n c o n t a i n i n gm o n o o x y g e n a s e .1 ,F(xiàn) M O 一1 ) 、單胺氧化酶.B ( m o n o a m i n e o x i d a s e B ,M A O - B ) 、谷胱甘肽過氧化物酶一1 (

3、g l u t a t h i o n ep e r o x i d a s e .1 ,G P X 一1 ) 和血紅素加氧酶- 2 ( h e m eo x y g e n a s e 一2 ,H O .2 ) 的擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物在1 .5 %瓊脂糖上電泳,以G A P D H 作為內(nèi)參照,圖像掃描儀測定電泳條帶的光密度值,計算目的基因的相對表達(dá)量。2 、W e s t e r n B l o t 檢測k v l .5 通道蛋白的表達(dá)提

4、取右心耳組織總蛋白,采用考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白濃度。電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、加用k v l .5 和G A P D H 一抗、二抗、E C L 發(fā)光顯色、掃描計算k v l .5 的相對表達(dá)量。3 、膜片鉗技術(shù)研究氧自由基對k v l .5 通道的影響( 1 ) 人心房肌細(xì)胞的分離體外循環(huán)插管前取右心房組織O .5 c m 3 ,將組織塊用預(yù)先充氧的無鈣液反復(fù)沖洗后,洗去血液和C a 2 + 后,組織塊放入含1 5 0 U /m 1 V 型膠原

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