2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、河北醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文PtdIns(4,5)P的動態(tài)觀察及膜脂質(zhì)環(huán)境對內(nèi)向整流性鉀離子通道Kir2.0亞家族功能調(diào)節(jié)的研究姓名:王川申請學(xué)位級別:博士專業(yè):藥理學(xué)指導(dǎo)教師:張海林20050401中 文 摘 要又 稱“ 脂 筏” ( l i p i d r a f t ) 的 觀 點, 脂 筏 特 指 膜 脂 質(zhì) 雙 層內(nèi) 含 有 特 殊 脂 質(zhì) 及蛋白的微區(qū), 許多信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白以 及通道蛋白 就定位在這些微區(qū)中, 無論是可興奮細胞或

2、非興奮細胞,都存在著脂筏。脂筏的主要成分是膽固醇( c h o l e s t e r a l ) 和 鞘 磷 脂 ( s p h i n g o l i p i d s ) , 而P I P : 和 花生四 烯 酸 ( 2 0 : 4 )( a r a c h i d o n i c a c i d , A A ) 是 脂筏中另 外兩種重 要的 脂質(zhì)成分。內(nèi) 向 整流性鉀離子通道( K i r ) 是一類在多種組織中廣泛分布的鉀

3、離子通道, 自1 9 9 3年克隆了第一個 K i r 通道至今,己經(jīng)發(fā)現(xiàn)有約 2 0 個成員,構(gòu)成了一個由七個亞家族 ( K i r l . x - K i r 7 . x ) 組成的超家族。 K i r 2 . x主要表達于心臟、骨骼肌和神經(jīng)系統(tǒng), 其電流表現(xiàn)很強的內(nèi)向整流特性, 它在維持心臟及腦組織的興奮性方面有重要的意義。 近年來, 許多實 驗顯示 P I P : 對 K i : 的 功能有重要的調(diào)節(jié)作用: 同時另有一些實驗資料

4、顯示膽固醇和A A對在體細胞的 K i r 有直接或間接的作用,但這種作用對不同通道亞型的 特異性如何?以 及這種特異性作用與 P I P : 有何關(guān)系?目 前未見 報道。 故本 研究的第三,四部分將分別以非洲爪蟾卵母細胞和中國倉鼠軟巢 ( C H O)細胞株為表達系統(tǒng), 表達不同 類型的K i r 2 . 0 亞家族鉀通道, 研究膽固醇和A A對這些通道的 特異性作用以 及P I P : 與這種作用關(guān)系。一、 動 態(tài) 觀 察 不同 的

5、 藥理 性阻 斷 劑 對膜 磷 脂 P t d l n s ( 4 , 5 ) P : 的 代謝 過 程的影響特征目的:時空觀察 G 蛋白偶聯(lián)受體 ( G P C R )和受體酪氨酸蛋白激酶( R T K ) 信 號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑引 起P I P , 在細胞內(nèi) 水 解及再合成的 動態(tài) 變化過 程,并比 較握 曼青霉素( w o r t m a n n i n ) . 氯化 鏗 ( L i C I ) . U 7 3 1 2 2和新霉 素四

6、種阻斷劑對P I P 2 代謝過程的影響。方法: 利用綠色熒光蛋白 ( G F P ) 與磷脂酶 C s , ( P L C 6 , ) P H 區(qū)( P L C s , P H ) 的融 合體( P L C S , P H - G F P ) 作為 標記P I P : 的 特異 性熒 光 探針,使用激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)動態(tài)觀察及測量 P I P : 代謝過程中位置的變化。結(jié)果: 在 C H O細胞或 C O S - 7 細胞

7、, 用 A T P 刺激內(nèi) 源性表 達的P 2 Y受體 或用胰島 素 刺激內(nèi) 源性表達R T K時, 可引 起P L C s , P H - G F P 熒光轉(zhuǎn) 位可 恢 復(fù) 性的 變 化; 握 曼 青 霉素 ( 1 0 } a M ) 和L i C I ( I O m M ) 不 影響A T P 引 起P L C激活所介導(dǎo)的P L C s , P H - G F P 熒光由 胞膜到胞漿的 轉(zhuǎn)位變化, 但可阻斷此轉(zhuǎn)位的 恢復(fù);

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