樹舌靈芝發(fā)酵特性的研究

1、2010N0111i0v130SerialNo223ChinaBrewingResearchReport樹舌靈芝發(fā)酵特性的研究劉中華，侯小歌，裴文亮，呂瑞峰，杜虎軍(周12師范學院生命科學系，河南周口466000)摘要：研究了樹舌靈芝搖瓶發(fā)酵過程中生物量、pH值、電導率、胞外粗多糖、纖維素酶活力的變化趨勢。結果表明，在樹舌靈芝發(fā)酵過程中，生物量和pH值均在5d后趨于穩(wěn)定，電導率先下降3d后逐步上升，胞外粗多糖、纖維素酶活力均在3d時達最

2、大值，此后逐漸下降，5d后基本趨于穩(wěn)定。關鍵詞：樹舌靈芝：搖瓶發(fā)酵；發(fā)酵特性中圖分類號：Q93335文獻標識碼：A文章編號：0254—5071(2010)10013003FermentationcharacteristicsofGanodcrmaapplanatumLIUZhonghua，HOUXiaoge，PEIWenliang，LVRuifeng，DUHujlln(DepamnentofLifeScienceZhoukouNorma

3、lUniversityZhoukou466000China)Abs舡act：Thechangetrendsofbiomass，pHvalue，electricalconductivity，extraeelluarpolysaccharideandcellulaseactivitywerestudiedduringshakeflaskcultivationofGanodermaapplanatumTheresultsshowedthatt

4、hebiomassandpHvaluebecamestableafter5d，theelectricalconductivitydeclinedfirstandthenincreasedgraduallyafter3d，andbothofextracelluarpolysaccharideandcellulaseactivityreachedthemaximumat3dthendeclinedgradually，andbecamesta

5、bleafter5dKeywords：Ganodermaapplanatum；shakeflaskfermentation；fermentationcharacteristics樹舌靈芝(Ganodermaapplanatum)又稱樹舌扁靈芝、平蓋靈芝等，屬真菌門(Eumycota)、擔子菌亞門(B邪idiomycotina)、層菌綱(Hymenomycetes)、非褶菌目(Aphyl—lophorales)、靈芝菌科(Ganoderm

6、ataceae)、靈芝屬(Ganoderma)，是我國傳統(tǒng)的天然藥物，藥用價值很高。樹舌具有抗癌、清熱、消毒、化痰、化積、止血、止痛的功效041。深層發(fā)酵是近代大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)食藥用真菌及代謝產(chǎn)物的主要方法，已發(fā)展成生物工程的一種新興產(chǎn)業(yè)。經(jīng)測定，靈芝深層培養(yǎng)液含有十分豐富的營養(yǎng)物質(zhì)及較高的藥用價值陽，用液體深層培養(yǎng)法生產(chǎn)的靈芝菌絲體及培養(yǎng)液經(jīng)加工提取，可制成食品添加劑和醫(yī)療保健食品。本實驗對樹舌靈芝的發(fā)酵特性進行了研究，以期為樹舌靈芝

7、的發(fā)酵過程控制提供理論依據(jù)，同時為進一步開發(fā)樹舌靈芝功能性食品提供基礎資料。1材料與方法11材料111菌株樹舌靈芝(Ganodermaapplanatum)：周口師范學院生命科學系菌種保藏中心提供。112培養(yǎng)基收稿日期：2010061I作者簡介：劉中華(1982)，女，河南許昌人，講師，主要從事食品與發(fā)酵工程的教學與研究工作。4O“0，添加比例為5：l～7：l。在單因素分析的基礎上，綜合考慮滅活溫度和pH值、酶的添加比例3個因素對出糖量

8、的影響，確定3因素的3個水平。根據(jù)BoxBehnken中心組合設計原理，共設計15個交互作用試驗點，采用響應面方法分析交互作用數(shù)據(jù)，得到三維曲面模型，模型顯著。在因素水平范圍內(nèi)，滅活溫度、pH值對出糖量影響顯著。并得出最優(yōu)條件為滅活溫度597℃，pH值為47，添加比例為604：1。驗證試驗得到最佳條件試驗值和預測值之間偏差為176％，非常接近，說明回歸方程能較真實地反映各篩選因素的影響。參考文獻：11]韓學鳳張鵬，易欣欣農(nóng)作物秸稈的綜合

9、利用【J】_北京農(nóng)學院學報，2003，18(3)：13【2】劉玲，劉長江農(nóng)作物秸稈的利用現(xiàn)狀及發(fā)展前景【J】農(nóng)業(yè)科技與裝備，2008，2：12【3】徐惠娟，王世鋒，龍敏南燃料酒精生產(chǎn)的研究進展【J】廈門大學學報：自然科學版，2006，45：56【41肖冬光。趙華。趙樹欣，等酒用酸性蛋白酶在酒精生產(chǎn)中應用技術的研究Ⅲ三角瓶發(fā)酵試驗明釀酒科技，2000，4：!2【5】肖冬光，趙華，趙樹欣，等灑用酸性蛋白酶在酒精生產(chǎn)中應用技術的研究Ⅱ一酒精生

10、產(chǎn)應用試驗【J】釀酒科技，2000，3：14【6】JRAGAUSKASA，WILLIAMSCK，DAVISONBH，cta1Thepathforwardforbiofuelsandbiomaterials[J]Sdenee2006，31l(3)：484489?！?】周恒剛酸性蛋向酶在釀酒上的功用【J】釀酒科技，1998，6：1IS】任天寶玉米秸稈發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇的試驗研究【D】鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學，2007【9】趙彩艷，蔡克周，陳麗娟，等

11、黑曲霉酸性蛋白酶酶學性質(zhì)的研究叨中國飼料，2006，10：14萬方數(shù)據(jù)2010No10v■v132SerialNo223ChinaBrewingResearchReport知，樹舌靈芝菌在發(fā)酵第3d時，發(fā)酵液中胞外粗多糖的量最多。與圖1相對照可以看出，發(fā)酵液中多糖含量的最大值與菌絲量最大值并不出現(xiàn)在同一時間，7d后菌絲量開始減少，多糖的含量卻略有上升，說明還有多糖在合成。oEU●i一褥劬刪發(fā)酵時間／d圖3樹舌靈芝菌培養(yǎng)液中電導率的變化F

12、叼ure3ChangesofelectricalconductivityofGanodermaapplanatumbroth發(fā)酵時間／d圖4樹舌靈芝菌培養(yǎng)液中胞外粗多糖含量的變化Figure4ChangesofextracelluarpolysaccharidecontentofGanodermaapplanatumbroth25樹舌靈芝菌發(fā)酵液中纖維素酶活力的變化發(fā)酵時問／d圖5樹舌靈芝菌培養(yǎng)液中纖維素酶活力的變化Figure5Cha

13、ngesofcellulaseactivityofGanodermaapplanatumbroth樹舌靈芝菌發(fā)酵液中纖維素酶活力的變化(圖5)可知，樹舌靈芝菌從培養(yǎng)開始到第3d發(fā)酵液中纖維素酶活力一直增加，到第3d時達到最大，這一階段也正是靈芝茵大量生長繁殖的階段，說明樹舌靈芝菌在生長過程中分泌了大量的纖維素酶；此后纖維素酶活力逐漸下降，至5d后趨于穩(wěn)定，這可能與靈芝菌生長處于穩(wěn)定期有關。3結論樹舌靈芝菌在發(fā)酵過程中，發(fā)酵液的生物量和p

14、H值均表現(xiàn)逐漸上升，發(fā)酵至5d時可達到最大值，以后趨近穩(wěn)定。電導率呈現(xiàn)先下降后逐步上升的變化趨勢；胞外粗多糖、纖維素酶活力變化趨勢類似，都是先上升后下降，3d時達到最大值；發(fā)酵第5d是樹舌靈芝菌發(fā)酵過程中最旺盛的時候，菌絲量最大。菌絲量達到最大值的時間滯后于胞外粗多糖含量達到最大值、纖維素酶活力達到最大值的時間，說明樹舌靈芝菌處于對數(shù)生長期時已經(jīng)開始大量產(chǎn)生胞外粗多糖和纖維素酶。參考文獻：【1】陳士瑜。陳惠菇菌栽培手冊嗍北京：科學技術文

15、獻出版社，2003【2】陳剛，李毅，董林樹舌研究應用概況【J】華西藥學雜志，1993，8(1)：4750【3】潘洪明，于英君樹舌多糖、豬苓多糖對小鼠HepA瘤細胞TNFCt表達的影響【J】中國基層醫(yī)藥，2002，9(6)：486487[4】于英君，劉麗波樹舌多糖GF免疫調(diào)節(jié)作用研究[J】中醫(yī)藥信息，1999，16(2)：6464【5】羅瑩，張志軍，李淑芳，等靈芝深層液體發(fā)酵過程研究fJ】農(nóng)產(chǎn)品加工，2007(10)：5052【6】高玉榮