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1、重組生產(chǎn)膠原蛋白的研究進(jìn)展重組生產(chǎn)膠原蛋白的研究進(jìn)展穩(wěn)定的[4]。所以生產(chǎn)熱穩(wěn)定性的重組膠原蛋白需要高水平的表達(dá)膠原蛋白并且有足夠的P4H活性來催化其羥基化。重組膠原蛋白已經(jīng)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞[510]、昆蟲細(xì)胞[1115]、酵母[1621]、大腸桿菌[22]、轉(zhuǎn)基因煙草[2326]、小鼠[2728]和蠶[29]中得到表達(dá)。在各種重組表達(dá)系統(tǒng)中,只有哺乳動(dòng)物細(xì)胞在轉(zhuǎn)染膠原蛋白基因而不轉(zhuǎn)染P4H基因的情況下,可以表達(dá)充分羥基化的膠原蛋白[11
2、15]。膠原蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)水平從0.6到20mgl不等,在昆蟲細(xì)胞中最高可以達(dá)到40mgl。然而這種表達(dá)水平對大規(guī)模的商業(yè)化生產(chǎn)來說太低,而且細(xì)胞培養(yǎng)過程中的費(fèi)用是其他細(xì)胞類型(如酵母和大腸桿菌)發(fā)酵培養(yǎng)過程花費(fèi)的510倍。而在其它的重組表達(dá)系統(tǒng)中遇到的一個(gè)普遍問題是宿主細(xì)胞不能提供足夠的P4H活性來充分羥基化膠原蛋白。一種多基因表達(dá)技術(shù)已經(jīng)用來共表達(dá)膠原蛋白和P4H,并且已有利用多基因表達(dá)技術(shù)以畢赤酵母為宿主細(xì)胞表達(dá)膠原蛋
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