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1、實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一觀察觀察DNA和RNA在真核細(xì)胞中的分布在真核細(xì)胞中的分布一、教學(xué)目標(biāo)一、教學(xué)目標(biāo)1、知識與技能:(1)學(xué)生分析說明DNA和RNA在結(jié)構(gòu)上的不同點(diǎn)(2)學(xué)生回顧顯微鏡的使用方法2、過程與方法:(1)學(xué)生掌握制作裝片的方法(2)使用試劑對材料進(jìn)行染色3、情感態(tài)度和價值觀:培養(yǎng)學(xué)生的動手能力,提升學(xué)生積極、樂觀的學(xué)習(xí)態(tài)度。二、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)二、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)1、教學(xué)重點(diǎn):實(shí)驗(yàn)原理、顯微鏡的使用2、教學(xué)難點(diǎn):甲基綠使DNA呈綠色,
2、吡羅紅使RNA呈紅色。三、實(shí)驗(yàn)原理與解析三、實(shí)驗(yàn)原理與解析(1)真核細(xì)胞的DNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi),RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。(2)甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強(qiáng),使DNA顯現(xiàn)出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強(qiáng),使RNA呈現(xiàn)出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細(xì)胞染色,可同時顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。(3)鹽酸的作用①鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運(yùn)輸;②鹽酸使染色體中
3、的DNA與蛋白質(zhì)分離,便于DNA與染色劑的結(jié)合。四、實(shí)驗(yàn)器材四、實(shí)驗(yàn)器材1材料人的口腔上皮細(xì)胞,洋蔥表皮細(xì)胞,根尖細(xì)胞,蛙或蟾蜍的血細(xì)胞,果肉細(xì)胞。2用具400mL燒杯,250mL燒杯,溫度計(jì),滴管,消毒牙簽,載玻片,蓋玻片,鐵架臺,石棉網(wǎng),火柴,酒精燈,吸水紙,顯微鏡。3試劑及配制方法(1)試劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為09%的NaCl溶液,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸,乙酸鈉,乙酸,蒸餾水,吡羅紅甲基綠混裝粉。如果化學(xué)試劑商店沒有吡羅紅甲基綠混裝粉,可以分
4、別購買甲基綠和吡羅紅G,然后按A液的第二種方法配制(見下文)。(2)染色劑的配制①低:在低倍物鏡下,尋找染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調(diào)節(jié)清晰;②高:轉(zhuǎn)到高倍物鏡,調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色情況。六、注意事項(xiàng)六、注意事項(xiàng)1.材料的選擇①選用的實(shí)驗(yàn)材料既要容易獲得,又要便于觀察;②常用的觀察材料由人的口腔上皮細(xì)胞、洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞(為避免原有顏色的干擾,不可使用紫色表皮細(xì)胞)2.取材要點(diǎn)①取口腔上皮細(xì)胞之前,
5、應(yīng)先漱口,以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì);②取洋蔥表皮細(xì)胞時,盡量避免材料上帶有葉肉組織細(xì)胞。3.沖洗載玻片時水的流速要盡量慢,切忌直接用水龍頭沖洗。4.安全要點(diǎn)①用酒精燈烘烤載玻片時,不要只集中于材料處,而應(yīng)將載玻片在火焰上來回移動,使載玻片均勻受熱,以免破裂;②烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。5.換用高倍鏡觀察材料時,只能用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行調(diào)焦,切不可動粗準(zhǔn)焦螺旋。七、實(shí)驗(yàn)相關(guān)知識1.加入8%鹽酸的目是
6、:改變細(xì)胞膜通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞;使染色劑中的DNA與蛋白質(zhì)分離;殺死細(xì)胞,有利于DNA與染色劑結(jié)合。2.為什么要進(jìn)行水解:甲基綠和吡羅紅不是活細(xì)胞所需要的物質(zhì),正常情況下,無法穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),因此實(shí)驗(yàn)中使用鹽酸破壞細(xì)胞膜,增加細(xì)胞膜的通透性,以方便染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時,鹽酸還能使細(xì)胞中染色體中的DNA和蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與甲基綠染色劑結(jié)合。3.將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放在盛有30℃溫水的大燒杯中保溫五分鐘。水浴加熱
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