三丁基錫(TBT)對(duì)奧利亞羅非魚精巢細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf

1、三丁基錫(TBT)是有機(jī)錫化合物中的重要種類,在所有的有機(jī)錫種類中,毒性最大,應(yīng)用最廣,也是迄今為止大量進(jìn)入海水環(huán)境的最毒的化學(xué)品之一。其主要的應(yīng)用是船舶防污涂料,農(nóng)用殺蟲劑和PVC穩(wěn)定劑等。廣泛的應(yīng)用范圍使得其進(jìn)入水環(huán)境的可能性非常大,已有學(xué)者(楊瑞強(qiáng),2006)在太湖梅梁灣和東太湖水域的魚體中檢測(cè)到了比較高的三丁基錫殘留,并在多個(gè)水域的水體里面檢測(cè)到了相當(dāng)水平的三丁基錫的存在。這就提示我們要對(duì)三丁基錫的毒性特征具有足夠的了解,對(duì)其對(duì)

2、水生生物資源、水產(chǎn)品安全以及對(duì)人的生命安全的危險(xiǎn)具有清醒的認(rèn)識(shí)。目前已有研究表明三丁基錫(TBT)具備的毒性特征有可以使水生軟體動(dòng)物發(fā)生性畸變；可以對(duì)水生軟體動(dòng)物和魚類基因組DNA造成損傷；也可以對(duì)水生軟體動(dòng)物和魚類機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)造成傷害；甚至?xí)沟靡恍┎溉閯?dòng)物的一些細(xì)胞類型發(fā)生凋亡等。在這些細(xì)胞類型中對(duì)生殖細(xì)胞凋亡、尤其是對(duì)重要水生生物資源的細(xì)胞凋亡研究還未見報(bào)道。
　　 本試驗(yàn)以?shī)W利亞羅非魚為研究對(duì)象,在注射染毒和接觸染

3、毒兩種染毒方式下,分別采用原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)研究了三丁基錫(TBT)對(duì)魚類精巢細(xì)胞凋亡的影響；采用試劑盒法對(duì)魚類肝臟和精巢抗氧化防御系統(tǒng)的影響,以及對(duì)精巢細(xì)胞Ca2+-ATP酶活性的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,TBT可以引起雄性?shī)W利亞羅非魚精巢細(xì)胞凋亡,在注射劑量分別為0,1、3、5、10μg.kg-1體重范圍內(nèi),染毒時(shí)間為24h和48h時(shí),細(xì)胞凋亡率先升高后降低,在5μg.kg-1體重時(shí)達(dá)到最高,在0～5μg.kg-1體重范圍內(nèi)

4、具有較好的劑量效應(yīng)關(guān)系。染毒時(shí)間為96h時(shí),細(xì)胞凋亡率先降低后升高,在5μg.kg-1體重時(shí)達(dá)最低。在相同的染毒時(shí)間下,細(xì)胞凋亡率隨著注射劑量的增加先升高后降低。在接觸染毒的情況下,在相同染毒時(shí)間的情況下,在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)(0、1、3、5、10μg.L-1),隨著染毒濃度的升高奧利亞羅非魚精巢細(xì)胞凋亡率逐漸升高。且具有較好的劑量效應(yīng)關(guān)系。在注射染毒和接觸染毒條件下,在相同的試驗(yàn)劑量/濃度范圍內(nèi),在相同的染毒時(shí)間內(nèi),奧利亞羅非魚精巢細(xì)胞C

5、a2+-ATP酶活性均隨著注射劑量的升高而升高。在相同的注射劑量下,隨著染毒時(shí)間的增加,Ca2+-ATP酶活性逐漸降低。注射染毒TBT條件下,奧利亞羅非魚精巢細(xì)胞凋亡凋亡率與精巢細(xì)胞Ca2+-ATP酶活性在24h和48h具有協(xié)同性,在染毒時(shí)間為96h時(shí),在0～5μg.kg-1體重時(shí)協(xié)同,然后相背離?？赡鼙砻?奧利亞羅非魚精巢細(xì)胞精巢細(xì)胞凋亡與Ca2+-ATP酶活性的變化有的關(guān)系,Ca2+-ATP酶活性升高,細(xì)胞凋亡率增加,這可能與細(xì)胞凋

6、亡過程中伴隨的胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高有關(guān)。在96h表現(xiàn)的兩者相背離的情況可能是因?yàn)樵诟邉┝块L(zhǎng)時(shí)間的TBT刺激下,Ca2+-ATP酶活性進(jìn)一步升高,Ca2+濃度進(jìn)一步升高,但此時(shí),執(zhí)行細(xì)胞凋亡的相關(guān)基因或蛋白已經(jīng)破壞,機(jī)體無(wú)法啟動(dòng)凋亡清除機(jī)制,細(xì)胞凋亡率反而下降。另外,TBT可以對(duì)機(jī)體的抗氧化防御系統(tǒng)產(chǎn)生作用。由于已有研究表明抗氧化防御系統(tǒng)與細(xì)胞凋亡之間存在著一定的的關(guān)系。為了更好的解釋一些試驗(yàn)現(xiàn)象,課題組研究了在注射染毒條件下,奧利亞羅