抑菌實(shí)驗(yàn)

1、于測(cè)定抗菌藥物體外抑制細(xì)菌生長(zhǎng)效力的試驗(yàn)稱為抑菌試驗(yàn)。通過(guò)抑菌實(shí)驗(yàn)，可以測(cè)定一個(gè)藥物的最低抑菌濃度，用以評(píng)價(jià)該藥物的抑菌性能，這是抗菌藥物的最基本的藥效學(xué)數(shù)據(jù)。主要方法有進(jìn)行定性測(cè)定的擴(kuò)散法（如抑菌斑試驗(yàn)）和進(jìn)行定量測(cè)定的稀釋法（如最低抑菌濃度實(shí)驗(yàn)）。[1]目錄1簡(jiǎn)介2常用方法?常量肉湯稀釋法?微量肉湯稀釋法?瓊脂稀釋法?紙片擴(kuò)散法?E試驗(yàn)1簡(jiǎn)介編輯用于測(cè)定抗菌藥物體外抑制細(xì)菌生長(zhǎng)效力的試驗(yàn)稱為抑菌試驗(yàn)。通過(guò)抑菌實(shí)驗(yàn)，可以測(cè)定一個(gè)藥物的

2、最低抑菌濃度，用以評(píng)價(jià)該藥物的抑菌性能，這是抗菌藥物的最基本的藥效學(xué)數(shù)據(jù)。主要方法有進(jìn)行定性測(cè)定的擴(kuò)散法（如抑菌斑試驗(yàn)）和進(jìn)行定量測(cè)定的稀釋法（如最低抑菌濃度實(shí)驗(yàn)）。[1]2常用方法編輯常量肉湯稀釋法A、抗菌藥物貯存液制備1.1.1.抗菌藥物貯存液制備抗菌藥物貯存液濃度不應(yīng)低于1000μgml(如1280μgml)或10倍于最高測(cè)定濃度。溶解度低的抗菌藥物可稍低于上述濃度?？咕幬镏苯淤?gòu)自廠商或相關(guān)機(jī)構(gòu)。所需抗菌藥物溶液量或粉劑量可公式

3、進(jìn)行計(jì)算。例如：需配制100ml濃度為1280μgml的抗生素貯存液，所用抗生素為粉劑，其藥物的有效力為750μgmg。用分析天平精確稱取抗生素粉劑的量為182.6mg。根據(jù)公式計(jì)算所需稀釋劑用量為：（182.6mg750μgml）1280μgml=107.0ml，然后將182.6mg抗生素粉劑溶解于107.0ml稀釋劑中。制備抗菌藥物貯存液所用的溶劑和稀釋劑見(jiàn)表5。配制好的抗菌藥物貯存液應(yīng)貯F、稀釋抗菌藥物的制備及菌液接種1.1.5.

4、稀釋抗菌藥物的制備及菌液接種取無(wú)菌試管（13100mm）13支，排成一排，除第1管加入1.6mlMH肉湯外，其余每管加入MH肉湯1ml，在第1管加入抗菌藥物原液（如1280μgml）0.4ml混勻，然后吸取1ml至第2管，混勻后再吸取1ml至第3管，如此連續(xù)倍比稀釋至第11管，并從第11管中吸取1ml棄去，第12管為不含藥物的生長(zhǎng)對(duì)照。此時(shí)各管藥物濃度依次為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μgml。然后

5、在每管內(nèi)加入上述制備好的接種物各1ml，使每管最終菌液濃度約為5105CFUml。第1管至第11管藥物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、05、0.25、0.125μgml。G、孵育1.1.6.孵育將接種好的稀釋管塞好塞子，置35℃普通空氣孵箱中孵育16~20h；嗜血桿菌和鏈球菌在普通空氣孵箱中孵育20~24h；對(duì)可能的耐甲氧西林葡萄球菌和耐萬(wàn)古霉素腸球菌應(yīng)持續(xù)孵育滿24h。H、結(jié)果判斷與解釋1.1.7.結(jié)果判斷與解釋在

6、讀取和報(bào)告所測(cè)試菌株的MIC前，應(yīng)檢查生長(zhǎng)對(duì)照管的細(xì)菌生長(zhǎng)情況是否良好，同時(shí)還應(yīng)檢查接種物的傳代培養(yǎng)情況以確定其是否污染，質(zhì)控菌株的MIC值是否處于質(zhì)控范圍。以肉眼觀察，藥物最低濃度管無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)者，即為受試菌的MIC。甲氧芐胺嘧啶或磺胺藥物的肉湯稀釋法終點(diǎn)判斷，與陽(yáng)性生長(zhǎng)對(duì)照管比較抑制80%細(xì)菌生長(zhǎng)管藥物濃度為受試菌MIC。根據(jù)NCCLS推薦的分界點(diǎn)值標(biāo)準(zhǔn)，判斷耐藥（resistantR）、敏感(susceptibleS)或中介（int

7、ermediateI）。S表示被測(cè)菌株所引起的感染可以用該抗菌藥物的常用劑量治療有效，禁忌癥除外。R指該菌不能被抗菌藥物的常用劑量在組織液內(nèi)或血液中所達(dá)到的濃度所抑制，或?qū)儆诰哂刑囟退帣C(jī)理（如β內(nèi)酰胺酶），所以臨床治療效果不佳。I是指MIC接近藥物的血液或組織液濃度，療效低于敏感菌。還表示被測(cè)菌株可以通過(guò)提高劑量（如β內(nèi)酰胺類藥物）被抑制，或在藥物生理性濃集的部位（如尿液）被抑制。另外，中介還作為“緩沖域”，以防止由微小的技術(shù)因素失控