層析技術(shù)簡單介紹及其應(yīng)用

1、層析法的主要介紹及其應(yīng)用1.層析法的概念層析法的概念層析法又稱色譜法[1]色層法或?qū)与x法（Chromatography），是一種應(yīng)用很廣的分離分析方法。1903年，俄國的植物學(xué)家M，CUBeT在研究分離植物色素過程中，首先創(chuàng)造了色譜法，這是一種根據(jù)化合物的不同結(jié)構(gòu)和不同的物理，化學(xué)特性，從而具有不同吸附性能的原理，以分離混合物中的化學(xué)成分的一種物理化學(xué)分離方法，最初用于有色物質(zhì)，之后應(yīng)用于大量的無色物質(zhì)。色譜法的名稱雖然仍然沿用，但已失

2、去原來的含義。層析法和其他分離方法比較，具有分離效率高，操作又不太麻煩的優(yōu)點。因此，層析法的應(yīng)用越來越廣，對于近代化學(xué)科學(xué)的發(fā)展有巨大的影響。在制藥、化工、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)等方面都有著廣泛的應(yīng)用。2.層析法的歷史及原理層析法的歷史及原理層析法的歷史1903年3月21日俄國植物學(xué)家茨維特（MichaelTswett，18721919）在華沙自然科學(xué)學(xué)會生物學(xué)會議上發(fā)表了“一種新型吸附現(xiàn)象及其在生化分析上的應(yīng)用”研究論文，介紹了一種應(yīng)用吸附原理分

3、離植物色素的新方法，并首先認(rèn)識到這種層析現(xiàn)象在分離分析方面有重大價值。1906年他在德國植物學(xué)雜志發(fā)表文章，首次命名上述分離后色帶為色譜圖，稱此方法為色譜法（Chromatography）。1907年在德國生物學(xué)會年會上，展示過帶有色帶的分離柱管和純化過的植物色素溶液。茨維特被世人公認(rèn)為色譜創(chuàng)始人。德籍奧地利化學(xué)家R.Kuhn等利用他的方法在纖維狀氧化鋁和碳酸鈣的吸附柱上將過去一個世紀(jì)以來公認(rèn)為單一的結(jié)晶狀胡蘿卜素分離成a和b兩個同分異

4、構(gòu)體，并由所取得的純胡蘿卜素確定出了其分子式。Kuhn正是由于在維生素和胡蘿卜素的離析與結(jié)構(gòu)分析中取得了重大研究成果而獲得了1938年諾貝爾化學(xué)獎.1952年，Martin和James發(fā)表第一篇氣液色譜論文，首次用氣體作流動相，配合微量酸堿滴定，發(fā)明了氣相色譜，它給揮發(fā)性化合物的分離測定帶來了劃時代的革命。2.2層析法的原理層析法的原理層析Chromatography(色譜)利用混合物中各組分的物理化學(xué)性質(zhì)間的差異(溶解度、分子極性、分

5、子大小、分子形狀、吸附能力、分子親合力等)，使各組分在支持物上集中分布在不同區(qū)域，借此將各組分分離。層析法進行時有兩個相，一個相稱為固定相(Stationaryphase)，另一相稱為流動相(Mobilephase)。由于各組分所受固定相的阻力和流動相的推力影響不同，各組分移動速度也各異，從而使各組分得到分離。層析技術(shù)與待分離混合物中各組分的理化性質(zhì)(分子自然形狀、大小、獲電狀態(tài)、溶解度與選擇性吸附劑或載體物的吸附能力，分配系數(shù)、酸堿環(huán)

6、境(pH)、溫度、極性以及分子3tiqu：dchromotographY，CLC或GLC)。(二)按層析機制分類按層析機制分類1吸附層析(adsptionchromatography)這是利用吸附劑對不同組分有不同的吸附能力使之分離的一種層析方法。2分配層析(partitionchromatography)這是利用不同組分在流動相和固定相之間的分配系數(shù)不同的一種層析方法。3離子交換層析(ion—exchangechromatograph

7、y)這是利用不同組分對離子交換劑親和力的不同的一種層析方法。d凝膠層析(gelchromatography)這是一種利用凝膠對不同組分因分子大小不同而有不同阻滯作用的一種分離方法。名稱分離原理吸附層析法組份在吸附劑表面吸附固定相是固體吸附劑，各能力不同分配層析法各組份在流動相和靜止液相（固相）中的分配系數(shù)不同離子交換層析法固定相是離子交換劑，各組份與離子交換劑親和力不同凝膠層析法固定相是多孔凝膠，各組份的分子大小不同，因而在凝膠上受阻滯