聚乳酸降解菌的選育及其解聚酶的研究.pdf

1、人類發(fā)展到21世紀，生活質(zhì)量逐漸提高，石油化工產(chǎn)品越來越多的應(yīng)用于人類的日常生活中，塑料作為一種廣泛的金屬的代替品而深受人們的喜愛，其應(yīng)用廣泛，經(jīng)濟耐用，成本低，使用方便等特點使其生產(chǎn)規(guī)模逐年擴大，然而低成本的塑料制品又很少有回收的價值，因此而導(dǎo)致了令人頭疼的白色污染問題，為了解決白色污染，各國都在極力的尋找一種可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)塑料的材料，聚乳酸(PLA)作為一種可降解塑料的原材料，由于其特有的性能而受到越來越多的關(guān)注，聚乳酸是利用乳酸為原

2、料合成的聚酯材料，具有良好的微生物降解性，現(xiàn)已應(yīng)用到醫(yī)療衛(wèi)生，紡織，包裝，農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。
　　本論文重點在于證明聚乳酸魏生物降解可行性。篩選出一株具有降解聚乳酸能力并可分泌聚乳酸解聚酶的細菌，探究該菌株分泌聚乳酸水解酶的最佳條件，分離、純化出聚乳酸解聚酶，并對其酶學(xué)性質(zhì)進行初步研究。實驗結(jié)果如下:
　　1從撫順石油廠的活性污泥中篩選純化出菌株DS0701，經(jīng)過生理生化性能比對，以及16SrDNA鑒定，該菌系屬于纖維單胞菌屬(C

3、ellulomonas.sp.)，且該菌具有降解PLA能力。
　　2對菌株DS0701降解PLA的條件進行檢測，最終確定，最適培養(yǎng)溫度為37℃，最適培養(yǎng)pH為7.0。培養(yǎng)時間為72h，最佳搖床轉(zhuǎn)數(shù)為150r/ min。
　　3對DS0701菌株降解能力測定，檢測結(jié)果表明，菌株DS0701不僅能夠降解PLA，而且對其他的幾種可降解材料也有降解能力，如聚羥基丁酸酯(PHB)、3-羥基丁酸與3-羥基戊酸的共聚物(PHBV)，聚（3

4、-羥基丁酸酯-co-4-羥基丁酸酯）(P(3-4HB))等。
　　4進行酶的分離與純化，在對培養(yǎng)條件進行測定之后，對該菌株進行發(fā)酵產(chǎn)酶，通過離心，超濾，凍干，鹽析，層析等方式對PLA解聚酶進行分離與純化，進而研究其解聚酶的酶學(xué)性質(zhì)。
　　5.進行聚乳酸薄膜降解，降解時間為9天，降解后膜透明度明顯減弱，變?yōu)榘咨瑥姸却蟠蠼档?，膜的邊角明顯變圓，質(zhì)地變酥脆。從掃描電鏡照片上可以觀察到膜表面部分地方開始變化，聚乳酸膜逐步裂解，膜表