2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、致病性嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)廣泛存在于水產養(yǎng)殖中,致病范圍廣,呈現(xiàn)出世界分布的趨勢。Ah引起的敗血癥、腸炎、皮膚潰爛等疾病給水產養(yǎng)殖帶來了極大的經濟損失,給我國乃至世界范圍內的養(yǎng)殖戶,帶來極大影響。Ah引起的疾病多采用抗生素進行治療,然而在實際生產中,對于發(fā)病后的檢測,目前還沒有一個比較健全的體制,因此也導致了抗生素濫用嚴重。由于大量抗生素被應用到環(huán)境中去,導致養(yǎng)殖水環(huán)境中抗生素殘留嚴重,Ah耐藥

2、性逐漸提高,給防治帶來了更大的困難。為探討Ah耐藥性機制,為實際生產提供理論基礎,本研究通過誘導Ah耐藥,采用基因組測序,比對分析的方法開展了以下工作:
  (1)為了解Ah全基因組信息的結構和功能,對AH10進行了全基因組測序。將提取的AH10全基因組DNA進行片段化、構建文庫后上機測序;基因組組裝后注釋和比較分析。結果顯示:AH10全基因組序列總長度為4.91Mb,GC含量為61.1%,共預測到4570個基因,3351個基因具

3、有明確的生物學功能。共找到2592個基因具有直系同源族(Cluster of orthologous groups,COG)分類,1281個與代謝通路有關的基因,基因組島31個。比較基因組學研究發(fā)現(xiàn):AH10比對到SNP位點102481個,與Aeromonas hydrophila YL17基因結構共線性最好,與美國來源的Ah標準菌株Aeromonas hydrophila ATCC7966具有較近的親緣關系,AH10的致病性與溶血素基

4、因hly(Hemolysin gene)、氣溶素基因aer(Aerolysin gene)、黏附素基因ahal(Major adhesion gene)、絲氨酸蛋白酶基因ahp(Serine protease gene)、細胞興奮性腸毒素基因alt(Cytotonic enterotoxin gene)密切相關。這些基因在Ah中同源性較高。存在自體誘導物信號分子-2(Autoinducer-2)與合成信號分子酶基因(Signal mol

5、ecule synthetase gene ahyI)和轉錄調節(jié)蛋白基因(transcriptional regular gene AhyR)群體感應(Quorum sensing QS)系統(tǒng),不存在III型分泌系統(tǒng)(type III secretion system TTSS)。
  (2)從五大類抗生素中各挑選出具有代表性的(一種或兩種)抗生素,在針對Ah菌株AH10(CCTCC保藏號:AB2014155)的防耐藥突變濃度(m

6、utant prevention concentration,MPC)的瓊脂平板上,分別篩選出五株耐藥菌株,并對篩選的耐藥菌株進行交叉耐藥性分析,制定出這些耐藥菌株對常用抗生素的最小抑菌濃度(minimal inhibitory concentrations,MIC)圖譜。結果顯示:分離的耐藥菌株對所使用抗生素的MIC均提高100倍以上。4℃劃線平板冰箱保存條件下,一個月內個別耐藥菌株耐藥性下降。在藥物篩選壓力下,菌株耐藥性隨著傳代次數(shù)

7、增多而表現(xiàn)出遞增的趨勢。同屬一類抗生素耐藥相關性較高;不同大類抗生素壓力下篩選出來的耐藥菌株表現(xiàn)出不同的交叉耐藥性。
  (3)對強力霉素誘導的5株耐藥菌株進行全基因組測序,并將基因組測序結果與原始菌株AH10和9株來自Genebank的Ah基因組信息進行比對,分析其差異性。結果顯示:在14株菌株序列中,共包含有4730個基因,其中3056個核心基因。與原始菌株AH10相比,單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide po

8、lymorphisms,SNP)和插入缺失標記(insertion-deletion,INDEL)較少,且這些SNPs和INDELs均不在編碼區(qū)。但是拷貝數(shù)變異(copy number variation,CNV)和結構變異(structure variation,SV)較多。對其耐藥基因檢測發(fā)現(xiàn):耐藥基因差異多樣性,bl1fox基因僅存在于4AK4中,5株耐藥菌中只有AH104具有tetl基因,此基因在原始菌株AH10中并不存在。

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