尿液檢驗節(jié)

1、www.themegallery.com,尿液檢驗,福建醫(yī)科大學(xué)省立臨床醫(yī)學(xué)院 臨床檢驗基礎(chǔ)教研室 陳金花,第五章 尿液一般檢驗,尿液分析的組成,第三節(jié)、尿液分析儀檢查,,一 、 尿干化學(xué)分析儀,尿干化學(xué)分析儀又稱尿液分析儀，是用干化學(xué)方法檢測尿中某些成分，有半自動和全自動兩類，“浸入即讀”，操作方便、測定快速、結(jié)果準(zhǔn)確、目測自動化兼宜。,尿中化學(xué)成分使試劑膜塊顏色變化，在比色槽中受光源照射后產(chǎn)生反射光，該原

2、理的本質(zhì)為光的吸收和反射。,(一) 酸堿度pH,酸堿指示劑法，檢測范圍為pH4.5-9.0 1.了解體內(nèi)酸堿平衡情況，監(jiān)測泌尿系統(tǒng)患者臨床用藥情況。2.了解尿pH變化對試帶上其它膜塊區(qū)反應(yīng)的干擾作用。,(二)比密：,多聚電解質(zhì)離子解離法 1.了解尿液中固體物質(zhì)的濃度，估計腎臟的濃縮功能。2.pH≥7.0，結(jié)果應(yīng)增加0.005。3.蛋白或糖濃度增加使結(jié)果增加,尿素＞10g/L或pH＜6.5使結(jié)果減低,(三) 尿糖：,葡萄

3、糖氧化酶-過氧化物酶法 1.只與葡萄糖起反應(yīng)2.假陽性： 被過氧化物、次氯酸鹽、強氧化性清潔劑污染3.假陰性：Vit C＞500mg/L、 酮體＞0.4g/L、 尿比重過高.,(四)蛋白質(zhì),pH指標(biāo)劑蛋白質(zhì)誤差法 1.僅對清蛋白敏感，對球蛋白不敏感（1/50~100），本周蛋白假陰性2.pH>9可假陽性，pH<3可假陰性。3.青霉素會引起假陰性,(五)酮體,

4、亞硝基鐵氰化鈉法1.靈敏度： 乙酰乙酸＞丙酮，β-羥丁酸不反應(yīng)2.丙酮和乙酰乙酸都具揮發(fā)性，應(yīng)用新鮮標(biāo)本。3.試劑受潮可使結(jié)果呈假陰性,(六) 膽紅素與尿膽原：,偶氮反應(yīng)法 ，醛反應(yīng)法或重氮反應(yīng)法 1.陽光致膽紅素→膽綠素、 尿膽原→尿膽素 應(yīng)用新鮮標(biāo)本。2.膽紅素假陰性：高濃度Vit C、,(七)隱血,血紅蛋白:類過氧化物酶法1.假陽性： 尿液中含肌紅蛋白、對熱不穩(wěn)定酶、氧化劑或菌尿。2

5、.假陰性： 尿液中含大量Vit C,蛋白質(zhì),糖尿,(八)亞硝酸鹽,亞硝酸鹽還原法1.尿亞硝酸鹽試驗是細(xì)菌感染指標(biāo)2.假陽性： 標(biāo)本放置時間過久、尿液被亞硝酸鹽 或偶氮劑污染3.假陰性： 尿液中含尿膽原、Vit C、pH＜6.0、尿量過多,(九)白細(xì)胞,白細(xì)胞酯酶1.只對粒細(xì)胞敏感，因單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞無酯酶。2.假陽性：高濃度的膽紅素3.假陰性： 尿中含Vit C、大量先鋒霉素Ⅳ、慶大霉素、尿蛋白＞5g/L,

6、葡萄糖,(十)Vit C,還原法1.只能測定還原型Vit C。2.Vit C含量對血紅蛋白、膽紅素、葡萄糖及亞硝酸鹽可產(chǎn)生負(fù)干擾4.檢測的作用：提示其它項目檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，防止假陰性,尿試帶的確證試驗,蛋白--------------磺基水楊酸法葡萄糖------------葡萄糖氧化酶定量法白細(xì)胞 ,紅細(xì)胞----尿沉渣顯微鏡檢查比重--------------折射計法膽紅素------------Harrison法,

7、干化學(xué)與顯微鏡的方法學(xué)評價,你們檢驗科 報告弄錯了，鏡檢跟干化學(xué)不符,鏡下確實看到了??！,出現(xiàn)不符的原因：,顯微鏡檢的優(yōu)缺點,優(yōu)點:方便開展是目前沉渣檢查的金標(biāo)準(zhǔn),,,缺點標(biāo)準(zhǔn)不夠統(tǒng)一，速度慢人為主觀因素對結(jié)果的影響大檢查個體差異大，CV>40%,二 流式尿有形成分分析,尿有形成分分析儀能解決的問題1、快速篩選2、熒光染色能檢出破碎、變形細(xì)胞，3、可以質(zhì)控4、定量準(zhǔn)確5、新參數(shù),22,UF-100/UF-50檢

8、測原理,23,脈沖信號處理過程,24,測量信號,測量參數(shù),UF-100檢測流程,25,流式細(xì)胞術(shù)分析,前向散射光由共振發(fā)出的二次光波組成與顆粒直徑和入射光波長有關(guān)前向散射光強度Fsc細(xì)胞膜橫切面大小前向散射光脈沖寬度Fscw細(xì)胞長度,前向熒光與細(xì)胞膜、核膜、線粒體、DNA有關(guān)前向熒光強度FL細(xì)胞染色程度前向熒光脈沖寬度Flw細(xì)胞染色部分長度,26,9-氮雜菲（Phenanthridine）（菲啶）染色DNA

9、和RNA發(fā)射熒光為: 橙色對死細(xì)胞胞膜穿透性強羧花青（Carbocyanine）細(xì)胞膜、核膜以及線粒體等膜性物質(zhì)被染色發(fā)射熒光為：綠色,UF-100/UF-50 檢測原理,SYSMEX,27,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,SYSMEX,28,,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,SYSMEX,29,,,,LASER,,,Fl

10、owcell,,,Intensity of signal,,,,,SYSMEX,30,,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,,,,,SYSMEX,31,,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,,,,,,,SYSMEX,32,,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,,,,,,,,,SYSMEX,

11、33,,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,,,,,,,,,,,SYSMEX,34,,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,,,,,,,,,,,,,SYSMEX,35,,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,,,,,,,,,,,,,,,SYSMEX,36,,,,LASER,,,Flowcell

12、,,,Intensity of signal,,,,,,,,,,,,,,,,,,,SYSMEX,37,,,LASER,,,Flowcell,,,Intensity of signal,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,SYSMEX,38,,,,Intensity of signal,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,FL,Fsc,FL:Intensity of stainFLW : Length of stain

13、ed part,FSC:Size of particleFSCW : Length of particle,,,SYSMEX,39,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,信號分析,Fsc,FL,,,,,,,,,FLLW2,FLLW,Path.CAST 病理管型的檢測,40,分析流程,1. 尿中顆粒分成2類： 紅細(xì)胞、白細(xì)胞＋細(xì)菌分布在Fsc和FL的散點圖上 管型和上皮細(xì)胞分布在Fscw和Flw的散點圖上2. 顯

14、示屏上顯示2幅散點圖和5種有形成分計數(shù)結(jié)果，以定量和定性方式報告結(jié)果,41,分析參數(shù),紅細(xì)胞紅細(xì)胞沒有核，所以熒光染色很弱分布在散點圖上的低熒光區(qū)域分析血尿來源,,42,43,紅細(xì)胞信息 — RBC- Information,形態(tài)均一性紅細(xì)胞,Isomorphic,44,紅細(xì)胞信息 — RBC- Information,形態(tài)非均一性紅細(xì)胞,Dysmorphic,2009-4-16,Sysmex Corporation

15、 (IHQ),紅細(xì)胞信息 提示的產(chǎn)生過程,RBC-P70 Fsc: 反映紅細(xì)胞大小,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),紅細(xì)胞信息 提示的產(chǎn)生過程,RBC-Fsc DW: 反映紅細(xì)胞大小變化,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),信息提示分析圖,,,小細(xì)胞,正常大小細(xì)胞,紅細(xì)胞信息 提示的產(chǎn)生過程,2009-4-16,Sysmex Corpora

16、tion (IHQ),正常紅細(xì)胞?,亮視野顯微鏡法,Fsc/Fl散點圖,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),正常紅細(xì)胞?,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),小紅細(xì)胞?,Fsc/Fl 散點圖,暗視野顯微鏡法,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),小紅細(xì)胞?,RBC Fsc 直方圖,2009-4-16,Sysmex Corporation

17、(IHQ),未分類？,Fsc/Fl 散點圖,暗視野顯微鏡法,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),未分類？,RBC P70 Fsc,紅細(xì)胞信息判斷,用于鑒別血尿來源,Dysmorphic？非均一型小紅細(xì)胞,紅細(xì)胞形態(tài)信息對腎內(nèi)科診斷很有價值,Dysmorphic？非均一型小紅細(xì)胞,分析參數(shù),白細(xì)胞 白細(xì)胞形態(tài)變化很大，所以Fsc和FL分布變化很大。 活的白細(xì)胞，染色淡，體積和密度比

18、較恒定，分布在散點圖高Fsc和低FL區(qū)域 受損的或死亡的白細(xì)胞，染色深，分布在散點圖低Fsc和高FL區(qū)域,,FL2,Fsc,,WBC,,分析參數(shù),細(xì)菌(BACT) 細(xì)菌體積小，染色性強，分布在散點圖低Fsc和高FL區(qū)域。 死細(xì)菌的染色性較強，熒光較強體積小細(xì)菌（球菌）由H-BACT參數(shù)表示,Fsc,分析參數(shù),管型 透明管型(CAST)內(nèi)含物很少，熒光染色很弱。 病理性管型（Path.CA

19、ST）：含上皮細(xì)胞、白細(xì)胞、顆?；蚱渌鼉?nèi)含物管型和蠟樣管型，染色力較強，分布在散點圖高Fscw和高Flw區(qū)域。,Fscw,Flw,Path.CAST,,CAST,,,,,分析參數(shù),上皮細(xì)胞（EC）1.鱗狀上皮細(xì)胞體積大，核密度和白細(xì)胞類似，分布在散點圖低Fscw和高Flw區(qū)域2.移行上皮細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞一樣，分布在低Fscw和高Flw區(qū)域3.腎小管上皮細(xì)胞或小圓上皮細(xì)胞，與白細(xì)胞類似，部分分布在低Fscw和高Flw區(qū)域,Fscw

20、,Flw,分析參數(shù),結(jié)晶（XTAL）結(jié)晶分布在比紅細(xì)胞更低Fsc和低FL區(qū)域草酸鈣結(jié)晶，分布在散點圖低Fsc和低FL區(qū)域3.尿酸結(jié)晶比草酸鈣結(jié)晶大，分布在較高Fsc區(qū)域,Fsc,分析參數(shù),酵母樣菌和精子（YLC、SPERM)1.酵母樣菌分布在散點圖紅細(xì)胞和白細(xì)胞區(qū)域之間2.精子染色性和酵母菌類似，分布區(qū)域類似，但Fsc比酵母樣菌小，F(xiàn)scw比酵母樣菌大,Fsc,（YLC/SPERM）,WBC,RBC,BACT,CAST,(Pa