基層醫(yī)院尿液檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

1、基層醫(yī)院尿液檢驗(yàn)的質(zhì)量控制許穎,,開展尿液檢驗(yàn)的意義,尿液分析必要性,診斷及鑒別泌尿系統(tǒng)疾病及鄰近的生殖系統(tǒng)疾?。鈧⒀装Y、結(jié)石、腫瘤、畸形、血管病變等協(xié)助了解其他系統(tǒng)疾病－心、腦、血管病、代謝性疾病（高血壓、糖尿病腎損害，自身免疫疾病如狼瘡性腎損害及變態(tài)反應(yīng)病腎損害，寄生蟲如滴蟲?。┫嚓P(guān)疾病腎損害：多發(fā)性骨髓瘤、乙肝安全用藥監(jiān)護(hù)－抗生素招致腎損害職業(yè)病防護(hù)－鉛、汞、鎘、鉍等腎損害健康人群保健體檢遺傳代謝病篩查－新生

2、兒苯丙酮酸尿癥等腎上腺疾病等—兒茶酚胺等,腎病發(fā)病狀況,目前, 腎臟病已成為危害全世界人民健康的主要疾病，全球有200萬以上中末期腎病患者,而且腎病患者的數(shù)量還在以每年10%的速度增長。中國的腎病患者約占全球的1/10。而且隨著高血壓、糖尿病等疾病的發(fā)病率的上升，所導(dǎo)致的腎病患者也日益增多。早期腎病往往沒有癥狀和體征，很多患者就診時(shí)已經(jīng)到達(dá)終末期腎病，失去治療機(jī)會(huì)。因而，早期診斷對于延長患者生命、提高生存質(zhì)量至關(guān)重要。,尿液（常規(guī)

3、）分析內(nèi)涵 尿液分析（Urinalysis）是尿液（Urina）和分析（Analysis）二詞 組合，相當(dāng)于我國沿用的尿常規(guī)（Urine Routine）檢驗(yàn)。臨床工作中相當(dāng)于尿干化學(xué)加尿沉渣檢驗(yàn)。,,物理檢查 化學(xué)成分粗篩有形成分細(xì)篩 脫落細(xì)胞學(xué)生化、免疫學(xué) 微生物,,目視或自動(dòng)分析外觀,顏色,濁度 折射率儀,滲透壓儀

4、,尿干化學(xué)分析儀(手工,半自動(dòng)或全自動(dòng)),尿流式、層流式分析儀、計(jì)數(shù)板、顯微鏡檢查和染色技術(shù)指標(biāo)多樣性，數(shù)據(jù)可靠，敏感性特異性高質(zhì)譜分析、色譜分析等,,,,,尿液系列分析,,尿液分析系列檢驗(yàn)主要解決問題,一、尿液分析要解決尿蛋白定量和性質(zhì)二、尿液分析要解RBC數(shù)量和來源三、腎功能損傷的評價(jià)四、健康體檢重要指標(biāo)五、白細(xì)胞、細(xì)菌數(shù)與微生物培養(yǎng)聯(lián)合六、尿膽紅素、尿膽原分析、追蹤黃疸性質(zhì)七、尿糖篩檢追蹤八、比重、滲透壓評價(jià)腎

5、濃縮稀釋功能九、化學(xué)分析、免疫經(jīng)驗(yàn)、粒子計(jì)數(shù)等聯(lián)合檢驗(yàn)， 為臨床提供科學(xué)診斷數(shù)據(jù)十、解決良惡性細(xì)胞診斷問題等,干化學(xué)試帶法尿液檢查,UA系列檢驗(yàn)項(xiàng)目：可檢測11/12/14項(xiàng),白細(xì)胞（LEU，leukocyte）尿膽原（URO，urobilinogen）蛋白質(zhì)（PRO，protein）膽紅素（BIL，bilirubin）葡萄糖（GLU，gluco

6、se）維生素C（VitC，vitamin C，抗壞血酸）比重（SG，specific gravity）酮體（KET，ketones）亞硝酸鹽（NIT，nitrite）酸堿度（pH，power of hydrogen，pH值）紅細(xì)胞（BLD，erythrocyte，潛血、隱血）微量白蛋白（MCA，micro albumin）肌酐（CRE，creatinine）鈣離子（CA，calcium，尿鈣）,9,,,試帶反應(yīng)原理與臨

7、床應(yīng)用注意點(diǎn),（1）酸堿度（pH）：采用pH指示劑法。用甲基紅（pH4.6～6.2）和溴麝香草酚藍(lán)（pH6.0～7.8）兩種指示劑適量組合成為復(fù)合pH試劑模塊，其呈色范圍為pH4.5～9.0，顏色發(fā)生橙紅、黃綠及藍(lán)色變化。 注意點(diǎn)：pH﹥7.5時(shí)，以導(dǎo)致蛋白假陽性,,（2）尿蛋白（PRO）：采用 pH指示劑蛋白誤差法。試劑模塊中主要含有酸堿指示劑溴酚藍(lán)、枸櫞酸緩沖系統(tǒng)和表面活性劑。在pH3.2時(shí)，溴酚藍(lán)電離、帶負(fù)電荷并釋放H＋

8、，帶負(fù)電荷的溴酚藍(lán)與此時(shí)帶正電荷的蛋白質(zhì)（白蛋白）生成復(fù)合物，導(dǎo)致溴酚藍(lán)進(jìn)一步電離產(chǎn)生更多的H＋，當(dāng)超過緩沖范圍時(shí)，指示劑發(fā)生顏色改變（黃、綠及藍(lán)），變色程度與蛋白質(zhì)含量成正比。 注意點(diǎn)：蛋白誤差法主要檢測白蛋白,(3)尿葡萄糖（GLU）：采用葡萄糖氧化酶法。尿液中葡萄糖在試帶中葡萄糖氧化酶的催化下，生成葡萄糖酸內(nèi)酯和過氧化氫。在有過氧化物酶的情況下，以過氧化氫為電子受體使色素原（鄰甲聯(lián)苯胺、碘化鉀等）氧化而呈色。色素原不同，呈色可

9、為藍(lán)色、紅褐色或紅色。 注意點(diǎn)：與半乳糖不反應(yīng)，班氏試劑糾正,（4）尿亞硝酸鹽（NIT）：采用偶氮法。尿液中含有來自食物或蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的硝酸鹽，如尿液中含有大腸埃希菌等具硝酸鹽還原酶的細(xì)菌時(shí)，可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與芳香胺的重氮化反應(yīng)形成重氮鹽，隨后發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)，形成紅色重氮色素。 注意點(diǎn)：大腸埃希菌等硝酸鹽還原酶,,（5）尿白細(xì)胞（LEU）：采用中性粒細(xì)胞酯酶法。中性粒細(xì)胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚

10、酚和有機(jī)酸，吲哚酚可進(jìn)一步氧化形成靛藍(lán)，或吲哚酚和重氮鹽反應(yīng)生成紫色重氮色素。注意點(diǎn)：檢測中性粒細(xì)胞酯酶,（1）尿液干化學(xué)測定結(jié)果與傳統(tǒng)濕化學(xué)法存在差異。 （2）必要時(shí)，試帶法干化學(xué)檢測尿液結(jié)果應(yīng)做確證試驗(yàn)。 （3）尿液干化學(xué)試帶檢查僅是一個(gè)過篩手段，蛋白質(zhì)、白細(xì)胞、紅細(xì)胞、亞硝酸鹽中任一項(xiàng)陽性，必須進(jìn)行人工鏡檢。 （4）尿液干化學(xué)測試結(jié)果應(yīng)與理學(xué)、顯微鏡檢查結(jié)果相結(jié)合，互相印證才能為臨床提供有價(jià)值的信息。,尿液干化學(xué)

11、測定結(jié)果分析注意事項(xiàng),尿液干化學(xué)測定結(jié)果分析注意事項(xiàng) （5）腎移植病人發(fā)生免疫排斥時(shí)尿液中出現(xiàn)大量淋巴細(xì)胞，但由于其胞質(zhì)無中性粒細(xì)胞酯酶，干化學(xué)試帶法檢測白細(xì)胞陰性。 （6）白細(xì)胞檢測時(shí)出現(xiàn)干化學(xué)試帶法“陽性”而鏡檢“陰性”的結(jié)果，可能與尿液在膀胱貯存時(shí)間過長、中性粒細(xì)胞中被破壞后其酯酶釋放到尿液中有（7）紅細(xì)胞出現(xiàn)此類結(jié)果可能是因?yàn)榧t細(xì)胞在尿液中被破壞，無完整紅細(xì)胞（血紅蛋白釋放），或尿液中含高活性不耐熱的觸酶。對于后者，

12、可將尿液煮沸冷卻后再測試，驗(yàn)證和排除“假陽性”結(jié)果。,確證實(shí)驗(yàn) 干化學(xué)法定位于“過篩試驗(yàn)”。按NCCLS Literation GP16-A規(guī)定： 1.尿蛋白用磺基水楊酸法確證； 2.尿葡萄糖用葡萄糖氧化酶定量法確證； 3.尿膽紅素用哈里遜（Harrison）法確證； 4.尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞用顯微鏡確證。,,尿干化學(xué)的質(zhì)量控制,,標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程質(zhì)控物（市售）質(zhì)控的方法,,作法：,,1。尿液分析儀，要有國

13、家的生產(chǎn)批準(zhǔn)文號，有準(zhǔn)入資質(zhì)。安裝地點(diǎn)合乎規(guī)范要求。（略）2。尿液分析儀用的耗材要有批準(zhǔn)文號并在有效期內(nèi)使用（試條等）。（略）3。統(tǒng)一的操作方法和報(bào)告模式。4。根據(jù)自已的條件作好質(zhì)量控制工作。,,定期將蒸餾水，標(biāo)準(zhǔn)色板，質(zhì)控品，當(dāng)作三份樣本進(jìn)行測定，將結(jié)果記錄設(shè)定靶值和標(biāo)準(zhǔn)差制作質(zhì)控圖分析失控原因和糾正失控。,失控的分析和糾正：,1。蒸餾水和標(biāo)準(zhǔn)色板的測定結(jié)果必須在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，否則與工程師聯(lián)系，是不是燈泡老化，儀器故障

14、？（保證了設(shè)備的正常運(yùn)行）2。失控的原因分析 與糾正質(zhì)控品的失效 紙條的失效 質(zhì)控品的失效3。更換試條測試，更換質(zhì)控品測試。,有形成分分析實(shí)驗(yàn)方法,傳統(tǒng)離心法不離心直接用血球計(jì)數(shù)池滴量尿定量計(jì)數(shù)法標(biāo)準(zhǔn)鏡檢法尿沉渣工作站尿沉渣流式分析儀圖像分析系統(tǒng),1 傳統(tǒng)離心法,方法優(yōu)點(diǎn) 簡單,容易普及缺點(diǎn)不講究留尿方式不注明留尿時(shí)間離心，棄去上清液,離心條件不一致主觀判別,不標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告方式用

15、+,++,+++，結(jié)果不統(tǒng)一無可比性為缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的方法應(yīng)該淘汰,2 不離心直接用血球計(jì)數(shù)池滴量尿定量計(jì)數(shù)法,方法 ：用Fuchs Rosenthal’s板,深度0.2 毫米不離心，計(jì)數(shù)板上直接計(jì)數(shù),換算成每微升的細(xì)胞個(gè)數(shù)優(yōu)點(diǎn):簡易,便于病程觀察缺點(diǎn)不適合過篩不適合于膿尿,血尿的治療后觀察難以普及,3 標(biāo)準(zhǔn)鏡檢法,方法 現(xiàn)行全國尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)CCCLS10ml.400g離心，5min,取0.2ml,KOVA

16、板和專用離心管人工報(bào)告 XX個(gè)/μL優(yōu)點(diǎn):基層也可以開展缺點(diǎn)速度慢主觀識(shí)別需豐富經(jīng)驗(yàn)，影響因素多計(jì)數(shù)和結(jié)果均受主觀因素影響,4 尿沉渣工作站,方法:顯微鏡,計(jì)數(shù)板,電腦優(yōu)點(diǎn) 發(fā)出人工判讀的定量報(bào)告缺點(diǎn)速度慢管道易堵塞,清洗困難產(chǎn)品差異大,方法和結(jié)果不統(tǒng)一主觀判斷結(jié)果的所有影響因素都存在,5.尿沉渣流式分析儀6.圖像分析系統(tǒng),當(dāng)尿液中出現(xiàn)病理管型時(shí)，腎病已經(jīng)達(dá)到了一定的程度。在治療中只能延緩病情的發(fā)展，

17、不易治愈了。且由于全人工操作存在一定的漏檢。不能用于慢性腎病早期篩查。,鏡檢及報(bào)告 沉渣液混勻后，灌入標(biāo)準(zhǔn)尿沉渣計(jì)數(shù)板里（按說明書操作），先用低倍鏡觀察，后用高倍鏡。計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)或管型，按XX/μl報(bào)告。尿結(jié)晶、細(xì)菌、真菌、寄生蟲等以+、++、+++、++++或者1+、2+、3+、4+形式報(bào)告。,,尿沉渣成分的質(zhì)量控制方法1 請教高年資老師2 用簡單的理化方法區(qū)分如：區(qū)分紅細(xì)胞與白細(xì)胞 紅細(xì)胞與 酵母菌等,,謝