2018屆世紀金榜教師用書配套課件生物選修1.2

1、第2課　微生物的培養(yǎng)與應用,考點一　微生物的實驗室培養(yǎng)核心知識回顧1.培養(yǎng)基：(1)概念：人們按照微生物對_________的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質。(2)種類：液體培養(yǎng)基和_____培養(yǎng)基，二者的區(qū)別是是否添加_______。,營養(yǎng)物質,固體,凝固劑,(3)營養(yǎng)成分：①確定原則：根據(jù)微生物的_____。②主要營養(yǎng)物質：_____、_____、水和無機鹽。③其他條件：pH、_________和氧氣。,

2、需要,碳源,氮源,特殊營養(yǎng),2.無菌技術：(1)目的：獲得_____________。(2)關鍵：防止_________的入侵。(3)常用方法：_____和_____。,純凈的培養(yǎng)物,外來雜菌,滅菌,消毒,(4)無菌技術的主要方法及適用對象(連一連)：,,,,,,,,,,,,,3.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：,一定體積,稱量紙,稱量紙,蛋白胨,瓊脂,pH,高壓蒸汽,121℃,15～30,50℃,4.純化大腸桿菌：(1)原理：在培

3、養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成_____細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細菌菌落。,單個,(2)主要方法及純化原理：,平板劃線,稀釋涂布平板,連續(xù)劃線,梯度稀釋,5.菌種的保藏方法：(1)臨時保藏法：對于_____使用的菌種，先接種到試管的_________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入__℃的冰箱中保藏。(2)甘油管藏法：對于需要_________的菌種，先將菌液轉入滅菌后的_____中，混勻后放在____℃冷凍箱中保存。

4、,頻繁,固體斜面,4,長期保存,甘油,-20,【教材易漏邊角知識】選修1 P18“旁欄小資料”微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法嗎？微生物接種的核心是什么？______________________________________________________________________________________________。,不是，微生物的接種技術還包括斜面接種、穿刺接種,等方法，其核心是防止雜菌

5、污染，保證培養(yǎng)物的純度,【特別提醒】微生物培養(yǎng)的“三個提醒”(1)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的確定方法。①自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質是無機物，碳源可來自大氣中的CO2，氮源可由含氮無機鹽提供。,②異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質主要是有機物，即碳源必須由含碳有機物提供，氮源也主要由有機物提供，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機氮源。(2)選擇無菌技術的原則。①考慮無菌技術的效果：滅菌的效果比消毒要好。②考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、

6、操作者的手等只能采用消毒，而不能滅菌。,(3)純化大腸桿菌的兩種方法的異同。①相同點：平板劃線法和稀釋涂布平板法都能獲得單細胞菌落。②不同點：平板劃線法不能對微生物計數(shù)，而稀釋涂布平板法能對微生物計數(shù)。,高考角度全練角度1　微生物的培養(yǎng)1.(2016·全國卷Ⅰ)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：,①配制培

7、養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作無菌平板；③設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。回答下列問題：　世紀金榜導學號77982217,回答下列問題：　世紀金榜導學號77982217(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于__________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是_________________________

8、______________。(2)步驟③中，實驗組的操作是_____________________________________________________。,(3)若在某次調查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結果說明在此次調查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36-6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________(填“正確”或“不正確”)。,【解

9、題指南】解答本題需要注意兩點：(1)明確培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的來源。(2)理解實驗目的與實驗操作的對應關系。,【解析】本題主要考查微生物培養(yǎng)。(1)微生物的生長需要碳源、氮源等營養(yǎng)物質，培養(yǎng)基中的牛肉膏、蛋白胨為微生物的生長既提供了碳源，也提供了氮源。微生物培養(yǎng)通常采用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，故題中X應是瓊脂，在培養(yǎng)基中起凝固劑的作用。,(2)本實驗的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況，應選擇在不同的高度放置平板，使之暴露在

10、空氣中一段時間，以利于空氣中微生物的沉降。,(3)空白對照實驗組不應出現(xiàn)菌落。產(chǎn)生了菌落說明在此次實驗中平板被污染。用實驗組獲取的菌落數(shù)的平均值減去污染產(chǎn)生的菌落數(shù)作為實驗的結果，這種做法不正確，應在防止污染的情況下重新實驗，以獲得較準確的數(shù)據(jù)。,答案：(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間(3)污染　不正確,【知識總結】培養(yǎng)基中的“碳源和氮源”比較,2.(2013·

11、全國卷Ⅱ)臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：　世紀金榜導學號77982218,(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用____________法或__________________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當稀釋，用__________法接種于固體培養(yǎng)基表面

12、，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長，布滿平板。,(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A______________；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B____________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A,的小，說明_____________________

13、____________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的____________________。(4)根據(jù)上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選用抗生素__________。,【解題指南】解答本題注意兩個方面：(1)分離微生物方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱。,【解析】本題考查微生物接種和抗生

14、素抗菌能力判斷。(1)在微生物的培養(yǎng)過程中，常用來分離微生物的方法是稀釋涂布(平板)法或平板劃線法。(2)為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布，一般用涂布法將微生物接種在培養(yǎng)基上。,(3)在抗藥性檢驗過程中，如果在抗生素周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細菌生長；透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱，據(jù)此可判斷A、B、C抗菌能力強弱依次是A、C、B；D的透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，說明該菌落對此種抗生素具有耐藥性。,(4)實驗

15、結果表明抗生素A對該致病菌的抗菌效果最好。答案：(1)平板劃線　稀釋涂布(平板)(或涂布)　(2)涂布(3)敏感　不敏感　該致病菌對C的敏感性比對A的弱　耐藥菌　(4)A,角度2　無菌技術3.(2017·臨川模擬)牛奶中富含蛋白質，長期飲用有助于增強體質，但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體。國家標準是每毫升牛奶中細菌數(shù)小于30 000個。以下是牛奶消毒及細菌檢測實驗。分析回答：,(1)圖中步驟①稱為________消毒法

16、。步驟②是______。,(2)培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供________。進行步驟③操作時，應選用下列中的哪種工具？__________________________。為了避免雜菌污染，此步驟應在________附近進行。,(3)為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作是否合格，應該______________________________________。,【解析】(1)題圖中步驟①對牛奶進行消毒采用了80℃、15 min恒溫水浴

17、加熱，這種消毒法稱為巴氏消毒法。根據(jù)題圖提供的信息可知，步驟②是系列稀釋或梯度稀釋。,(2)微生物的營養(yǎng)物質主要有碳源、氮源、水和無機鹽等，有的微生物還需要特殊的營養(yǎng)物質，如生長因子和維生素等，蛋白胨主要為微生物提供碳源、氮源和維生素。進行步驟③操作后需培養(yǎng)計數(shù)，因此該接種操作的方法是稀釋涂布平板法，應選用B(涂布器)作為接種工具。為了避免雜菌污染，步驟③應在酒精燈火焰附近進行。,(3)為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作是否合格，應該將一

18、個未接種的培養(yǎng)基作為對照組，與接種后的培養(yǎng)基共同培養(yǎng)。,答案：(1)巴氏　梯度稀釋　(2)碳源、氮源和維生素　B　酒精燈火焰　(3)將一個未接種的培養(yǎng)基與接種后的培養(yǎng)基共同培養(yǎng),【易錯提醒】平板劃線法和稀釋涂布平板法是微生物接種的常用方法，但是平板劃線法只能純化微生物，而不能進行微生物計數(shù)。,【加固訓練】1.(2017·西安模擬)某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落

19、觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關的問題。,(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細菌培養(yǎng)提供了碳源和氮源。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是__________和__________。(2)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設定在37℃。要使該實驗所得結果可靠，還應該同時在另一平板上接種__________作為對照實驗。,(3)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的__

20、_______，這說明湖水樣品中有多種細菌。一般來說，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越________(填“高”或“低”)。(4)某同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是________________，應當怎樣操作？_____________________________。,【解題指南】(1)題干關鍵詞：培養(yǎng)基的“基本成分”“形態(tài)和顏色”。(2)關鍵方法：接種無菌水的空白對照可以判斷培養(yǎng)基制作

21、是否合格。,【解析】(1)蛋白胨富含蛋白質，主要為微生物提供氮源；淀粉主要為微生物提供碳源，培養(yǎng)基中還應含有水和無機鹽。(2)微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進行。要使該實驗所得結果可靠，還應設置對照實驗，即同時在另一平板上接種無菌水作為對照實驗，以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。,(3)培養(yǎng)20小時后，不同微生物在平板培養(yǎng)基上會形成形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，說明湖水中的微生物數(shù)量越多，即湖水遭受細菌污染的程度越高。(4)培養(yǎng)基上的菌落

22、連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高或培養(yǎng)過程被雜菌污染，可以通過增大稀釋倍數(shù)或嚴格無菌操作解決。,答案：(1)無機鹽　水　(2)恒溫培養(yǎng)箱　無菌水(3)菌落　高(4)菌液濃度過高(或培養(yǎng)過程中被雜菌污染)　增大稀釋倍數(shù)(或嚴格無菌操作，原因與操作要對應),2.(2017·安慶模擬)據(jù)報道，從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標，“細菌門”事件引起公眾普遍關注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的

23、菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。某興趣小組欲檢測某果汁類食品中是否含有葡萄球菌，進行了如下實驗?；卮鹣铝袉栴}：,(1)配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調節(jié)pH，分裝到錐形瓶后進行____________，在無菌狀態(tài)下加入卵黃液搖勻后立即倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長和繁殖提供_________。葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl溶液，所以在配制培養(yǎng)基時加

24、入高濃度的NaCl溶液可以將它分離出來，此培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。,(2)接種：取待檢測果汁2.5 mL加入22.5 mL滅菌生理鹽水中，制成接種樣液。①實驗組：將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。,②對照組：將________________用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為______________對照。(3)培養(yǎng)：將上述接種后的培養(yǎng)皿同時放在36℃的恒溫箱中培養(yǎng)48 h。(

25、4)觀察：培養(yǎng)基表面__________________。,(5)結論。①若培養(yǎng)基上__________________，則該果汁類食品中含有葡萄球菌。②若培養(yǎng)基上__________________，則該果汁類食品中不含有葡萄球菌。,【解題指南】(1)關鍵信息：①葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。②接種樣液是用滅菌生理鹽水稀釋的。③對照組用平板劃線法接種無菌生理鹽水

26、。(2)必備知識：對照實驗除自變量不同，其他均相同。,【解析】(1)培養(yǎng)基的制備流程：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為葡萄球菌生長和繁殖提供氮源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨可以為葡萄球菌生長和繁殖提供碳源、氮源和維生素。加入高濃度的NaCl溶液的培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。,(2)比較實驗組和對照組可知，實驗的自變量為是否接種接種樣液。對照組接種無菌生理鹽水或不接種，為空白對照。

27、(4)根據(jù)題干關鍵信息“葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)”可知，觀察是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落可以判斷果汁中是否含有葡萄球菌。,(5)果汁中存在葡萄球菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落；果汁中不存在葡萄球菌時，培養(yǎng)基上不會出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落，因此可以根據(jù)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落判斷是否存在葡萄球菌。,答案：(1)滅菌(高壓蒸汽滅菌)　碳源、氮源、磷酸鹽和維生素　選擇

28、(2)②無菌生理鹽水　空白(4)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落(5)①出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落②不出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落,【方法技巧】判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合格的方法(1)從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2 d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。,(2)從接種操作是否符合無菌要求上判斷：①如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合接種菌菌落的特點，說明接種操

29、作是符合要求的；②如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達到要求，需要分析原因，重新操作。,考點二　土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)　核心知識回顧1.篩選菌株：(1)尋找目的菌株的原則：根據(jù)它對_________的要求，到相應的環(huán)境中去尋找。,生存環(huán)境,(2)實驗室篩選尿素分解菌的方法：使用以_____為唯一氮源的_____培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(3)選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許_________的微生

30、物生長，同時___________其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。2.微生物的計數(shù)：,尿素,選擇,特定種類,抑制或阻止,一個,細菌計數(shù)板,血細胞計數(shù)板,(C÷V)×M,小,大,3.實驗流程及注意事項：,表層,30～300,稀釋涂布平板,30～37,5～7,25～28,3～4,菌落,4.分解尿素的細菌的鑒別：(1)方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____指示劑培養(yǎng)分解尿素的細菌。(2)原理：,酚紅,脲酶,

31、2NH3,(3)實驗現(xiàn)象及結論：①培養(yǎng)基變紅：該種細菌___分解尿素。②培養(yǎng)基不變紅：該種細菌_____分解尿素。,能,不能,5.設置對照和重復：,非測試因素,偶然因素,制作是否合格,3,【教材易漏邊角知識】選修1P26“旁欄小資料”細菌數(shù)目的測定還有哪些方法？舉例說明。__________________________________________________。,濾膜法。測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以采用濾,膜法,【

32、思維診斷】(1)從有機廢水中分離分解有機物的微生物時，接種后的培養(yǎng)皿需要放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。　( )分析：分解有機物的微生物為異養(yǎng)型，不需要光照。,×,(2)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害?！? )分析：選擇無菌技術方法時，既要考慮消毒效果，又要考慮被操作對象的承受能力，不能傷害細胞。,√,(3)培養(yǎng)基中只要含有水、碳源、氮源和無機鹽四種成分就能滿足各種微生物的需要?！?

33、 )分析：微生物生長需要水、無機鹽、氮源、碳源和生長因子等。,×,(4)統(tǒng)計樣品中的活菌一般使用平板劃線法。( )分析：使用平板劃線法能分離微生物，但不能對微生物進行計數(shù)。,×,(5)利用稀釋涂布平板法對微生物計數(shù)時，只要得到一個菌落數(shù)在30～300的平板即可。　( )分析：只得到一個菌落數(shù)在30～300的平板是錯誤的，原因是不符合實驗的重復原則，易受到偶然因素的影響。,×,高考角度

34、全練角度1　微生物的計數(shù)1.(2016·四川高考)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉錄的mRNA部分序列。世紀金榜導學號77982219,(1)圖中選擇培養(yǎng)基應以____________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加____________作指示劑，產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成____________色。(2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶

35、液0.1 mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。,該過程采取的接種方法是____________，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為_________×108個；與血細胞計數(shù)板相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)目較________。,(3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉錄的mRNA在圖乙箭頭所示的位置增加了70個核苷酸，使圖乙序列出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UA

36、A)。突變基因轉錄的mRNA中，終止密碼為_______，突變基因表達的蛋白含____________個氨基酸。,【解題指南】(1)關鍵信息：“篩選產(chǎn)脲酶細菌”“接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液”，使“圖乙序列”出現(xiàn)終止密碼。(2)解題關鍵：區(qū)別選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基，掌握細菌計數(shù)的方法。,【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)與分離方法及基因表達。(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨，要從土壤中篩選出產(chǎn)脲酶的細菌，需用以尿素作為唯一氮源的選擇培

37、養(yǎng)基。由于尿素被分解成了氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高，使酚紅指示劑變紅色。,(2)將稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液接種在細菌培養(yǎng)基平板上，用于計數(shù)細菌菌落數(shù)的方法是稀釋涂布平板法。統(tǒng)計的菌落數(shù)應介于30～300，選擇細菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)，每克土壤樣品中細菌數(shù)量為(156+178+191)÷3÷0.1×105=1.75×108。由于兩個或多個細菌連接在一起時，往往統(tǒng)計

38、的是一個菌落，用此方法測得的細菌數(shù)目偏少。,(3)密碼子由3個相鄰的堿基組成，箭頭前面的堿基一共構成91個密碼子；插入的70個核苷酸和后面2個堿基一共構成24個密碼子，后面是UGA，是終止密碼，翻譯結束后，表達的蛋白質含有115個氨基酸。,答案：(1)尿素　酚紅　紅(2)稀釋涂布平板法　1.75　少　(3)UGA　115,角度2　微生物的選擇培養(yǎng)2.(2017·濟南模擬)在調查和分離湖水中耐鹽細菌的實驗中，先將10升湖水水

39、樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到多個培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請回答：(1)可以通過提高培養(yǎng)基中________的濃度，篩選被調查細菌，這種培養(yǎng)基被稱為________培養(yǎng)基。,(2)要提高實驗結果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應該設置的對照組是________。為檢驗(1)中篩選方法的效果，可以設置的對照組是________。(3)在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是________。為防止冷凝水影響

40、細菌的生長，需將培養(yǎng)皿________培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學中可以被稱為________。,【解析】(1)篩選耐鹽細菌，需在培養(yǎng)基中添加高濃度的NaCl，這種人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基被稱為選擇培養(yǎng)基。,(2)要提高實驗結果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應該設置未接種的培養(yǎng)基作為對照組，若對照組產(chǎn)生菌落，則培養(yǎng)基未徹底滅菌，反之，滅菌合格。為檢驗(1)中篩選方法的效

41、果，可以設置未加高濃度鹽的培養(yǎng)基作為對照組，若對照組上菌落比實驗組多，則培養(yǎng)基有選擇作用，反之沒有。,(3)在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。為防止冷凝水影響細菌的生長，需將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。一定區(qū)域內(nèi)同種生物的全部個體稱為一個種群。,答案：(1)鹽(或NaCl)　選擇　(2)未接種的培養(yǎng)基　未加高濃度鹽的培養(yǎng)基　(3)高壓蒸汽滅菌　倒置　種群,3.(2015·全國卷Ⅰ節(jié)選)已知微生物A可以產(chǎn)生

42、油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P問題：(1)顯微觀察時，微生物A菌體中的油脂通?？捎胈___________染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用____________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。,(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以____________為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。,(3)為了確定微

43、生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學測得相同時間內(nèi)，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg，則上述三個溫度中，________℃條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞________℃設計后續(xù)實驗。,【解析】(1)脂肪可被蘇丹Ⅲ(Ⅳ)染液染成橘黃色(紅色)，題干中說明微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，則可以采用萃取法提取微生物A中的油脂。(2)油脂為有機化合物，富含碳元素，

44、故為了從自然界獲得能夠分解油脂的單菌落，應以油脂為唯一碳源來配制培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上，能分解油脂的微生物可以正常生長，其他微生物不能正常生長。,(3)在45℃下，降解10 g油脂所需酶量最多，則該溫度下酶活性最低；由題干信息可知，40℃下降解10 g油脂所需的酶量最少。應圍繞40℃設置不同溫度梯度來探究酶的最適溫度。,答案：(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)　萃取法(2)油脂(其他合理答案也可)　(3)45　40,4.(2014·全國

45、卷Ⅱ)為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作。回答下列問題：,(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_____________；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為___

46、_____。,(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過__________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_____________________________。,(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。,(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比

47、靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中__________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。,【解題指南】(1)題干關鍵詞：“先行培養(yǎng)”“振蕩培養(yǎng)”。(2)隱含信息：A圖中菌落是采用平板劃線法接種培養(yǎng)的結果，B圖中菌落分布相對均勻，為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結果。(3)關鍵知識：稀釋涂布平板法檢測細菌含量、平板劃線法分離細菌。,【解析】本題考查微生物培養(yǎng)、細菌分離及計數(shù)等相關

48、知識。(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學實驗一般會設置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌數(shù)：,(2)接種時接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始，這樣做的目的是通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個菌落。,(3)根據(jù)示意圖A和B中生長的菌落形態(tài)，判定B圖為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結果

49、(菌落分布相對均勻)。(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量，促進好氧型微生物的生長；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率。,答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質,【易錯提醒】本題第(1)題第2空易錯答為3.8×104。出錯原因是忽視了單位，教材計算公式是每克樣品中的細菌數(shù)，而本題要

50、計算每升水樣中的活菌數(shù)，應再乘以103。,考點三　分解纖維素的微生物的分離核心知識回顧1.纖維素與纖維素酶：(1)纖維素：一種由_______首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的_____類物質。,葡萄糖,多糖,(2)纖維素酶：①組成：纖維素酶是一種_____酶，包括__酶、__酶和_________酶三種組分。②作用：,復合,C1,CX,葡萄糖苷,C1,CX,葡萄糖苷,2.纖維素分解菌的篩選：(1)方法：_

51、______染色法。(2)培養(yǎng)基：___________的選擇培養(yǎng)基。,剛果紅,富含纖維素,(3)篩選原理：(4)菌落的挑選：挑選產(chǎn)生_______的菌落。,紅色復合物,透明圈,透明圈,3.實驗流程及注意事項：,纖維素,富含纖維素,單個,透明圈,【思維診斷】(1)土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是必不可少的?！? )分析：土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是否需要，應根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的

52、多少來確定。,×,(2)在富含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色劑，若出現(xiàn)周圍存在透明圈的菌落，則說明篩選到了分解纖維素的微生物?！? )分析：剛果紅染色劑能與纖維素結合形成紅色復合物；分解纖維素的細菌產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素，在分解纖維素的細菌的周圍出現(xiàn)透明圈。,√,(3)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中只含有纖維素一種碳源。　( )分析：纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中富含纖維素，但不是只有纖維素一種碳源。,

53、15;,(4)在纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上生長的菌落都是纖維素分解菌?！? )分析：纖維素分解菌能在纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上成為優(yōu)勢種，由于培養(yǎng)基中并非只有纖維素一種碳源，不能保證其他雜菌不能生長。,×,(5)培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落一定是纖維素分解菌的菌落?！? )分析：剛果紅與多糖類化合物產(chǎn)生紅色復合物，若微生物能分解剛果紅，其周圍也會產(chǎn)生透明圈。,×,(6)剛果紅染色法只能在培養(yǎng)微生物時

54、加入剛果紅。( )分析：剛果紅染色法有兩種方法，一種是在配制培養(yǎng)基時就加入剛果紅，另一種是在培養(yǎng)微生物后再加入剛果紅。,×,高考角度全練角度1　纖維素分解菌的篩選1.(2014·全國卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將__________分解成__________。,(2)在含纖維素

55、的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成__________色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的____________。,(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：,注：“+”表示有，“-”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是______________

56、________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________________。,【解題指南】(1)題干關鍵詞：“纖維素酶”“剛果紅”。(2)隱含信息：兩種培養(yǎng)基中有瓊脂的為固體培養(yǎng)基，無瓊脂的為液體培養(yǎng)基；淀粉是微生物的碳源，不含纖維素粉不能作為分離和鑒別纖維素分解菌實驗的選擇培養(yǎng)基。,(3)關鍵知識：土壤中某些微生物的分解作用和篩選纖維素分解菌

57、的方法。,【解析】本題主要考查纖維素酶的作用、剛果紅染色法、分離和鑒別纖維素分解菌的方法。(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質。纖維素能被纖維素酶分解為葡萄糖，如圖：,(2)剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，且培養(yǎng)基中不能添加

58、淀粉。,答案：(1)纖維二糖　葡萄糖(2)紅　透明圈(3)不能　液體培養(yǎng)基不能分離單菌落　不能　培養(yǎng)基乙中沒有纖維素，不會形成CR-纖維素紅色復合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌,2.(2015·江蘇高考)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對其降解纖維素能力進行了研究。請回答下列問題：世紀金榜導學號7798222

59、0,(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項不需要的是__________(填序號)。①酒精燈　?、谂囵B(yǎng)皿　　③顯微鏡　?、軣o菌水(2)在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是___________________________________________________。,(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是_______________________

60、_____。,(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落(見下圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的________有關。圖中降解纖維素能力最強的菌株是__________(填圖中序號)。,(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵，測得發(fā)酵液中酶活性的結果見下圖，推測菌株___________

61、_更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是_________________________。,【解析】本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)。(1)樣品稀釋和涂布平板的操作過程不需要顯微鏡。(2)涂布平板時，若培養(yǎng)基表面的菌懸液過多會出現(xiàn)積液，造成菌體堆積，影響分離效果。(3)試管口粘附的培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈，避免培養(yǎng)基污染棉塞。(4)菌株產(chǎn)生的降解纖維素酶的量越多、活性越高，會使降解,圈越大。降解纖維素能力最強的菌株是①，因其菌株菌落

62、小，但降解圈大。(5)分析圖中曲線可知，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，而發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，所以J4菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。,答案：(1)③　(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞　(4)量與活性?、?5)J4　發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高,角度2　其他微生物的篩選3.(2016·全國卷Ⅲ)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗

63、材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用______對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是________。,(2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有______________和________________。分離純化時應挑選出____________的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在-20℃長期保存

64、時，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。,【解析】本題主要考查乳酸菌的分離純化和保存。(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水梯度稀釋泡菜濾液，這樣既可避免雜菌污染，又可保證將乳酸菌分散成單個細胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。,(2)乳酸的積累會使培養(yǎng)液pH降低，影響乳酸菌的增殖，加入碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝(無氧呼吸)過程中產(chǎn)生的乳酸，使碳酸鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的識別和分離。

65、(3)加入甘油可降低培養(yǎng)液的凝固點，使培養(yǎng)基在低溫下保持液體狀態(tài)。,答案：(1)無菌水　泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(2)鑒別乳酸菌　中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)　具有透明圈(3)甘油,【易錯提醒】(1)對細菌分離純化原理的理解不透，將第(1)題中“無菌水”答成“自來水”。(2)對降低培養(yǎng)液的凝固點的方法認識不足，將第(3)題答成“蒸餾水”或“碳酸鈣”。,4.(2017·福州模擬)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生

66、產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示：,(1)進行①過程的目的是________，②過程所使用的接種方法是________法。(2)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，配制時僅以________作為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應加入________作為凝固劑。,(3)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調節(jié)pH的先后順序是___

67、_____。(4)培養(yǎng)一段時間后，應從Ⅰ號培養(yǎng)基上挑出________的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上。,【解析】(1)分析題圖可知，①過程是梯度稀釋；②過程是用稀釋涂布平板法進行接種。(2)本題實驗的目的是篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基；本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應加入瓊脂作為凝固劑。,(3)培養(yǎng)基配制和滅菌時應先調節(jié)pH，然后再進行滅菌；如果先滅

68、菌再調節(jié)pH，容易污染培養(yǎng)基。(4)能分解淀粉的嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大，淀粉酶的活性越強，所以要從中挑出透明圈大的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上。,答案：(1)稀釋　稀釋涂布平板(2)選擇　淀粉　瓊脂(3)先調節(jié)pH，后滅菌(4)透明圈大,【加固訓練】臨床實驗表明，服用乳酸菌及其制品具有減少人體血清膽固醇含量、降低心腦血管發(fā)病率的功效。下面是從酸奶中篩選出高效降低

69、膽固醇的乳酸菌的實驗，請回答下列問題：,(1)制備固體培養(yǎng)基(MRS)：在普通的液體培養(yǎng)基中添加碳酸鈣和________，加熱使其熔化，然后轉移到錐形瓶中。經(jīng)滅菌處理后，待其冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近倒平板。,(2)將少量酸奶制成1∶10稀釋液，再將梯度稀釋到106倍的稀釋液涂布于添加了碳酸鈣的乳酸菌培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基)平板上，在________(填“有氧”或“無氧”)條件下37℃恒溫培養(yǎng)72 h。挑取________(填“有