a緒論和藥物鑒別

1、藥 物 分 析,質(zhì)量控制,方法,內(nèi)容,化 學(xué),物理化學(xué),生物化學(xué),,,,鑒 別,雜質(zhì)檢查,含量測(cè)定,,,,結(jié)構(gòu),,巴比妥類,芳酸及其酯類,胺 類,雜環(huán)類,生物堿類,維生素類,甾體激素類,抗生素類,Pharmaceutical analysis,Quality control,Method,Content,Chemical,Physical,Micro-biological,,,,Identification,Impurity tes

2、t,Assay,Structure,,Barbitals,Aromatic acid and its ester,Amines,Heterocyclic drugs,Alkaloids,Vitamins,Steroid hormone drugs,,,,Antibiotics,Fundamental Requirement,Understanding the characteristic

3、s, assignment and development of pharmaceutical analysis;Familiarizing with drugs analysis and the quality standard of pharmaceuticals;Understanding the general procedure of drug tests;Familiarizing with the scientifi

4、c management content of total quality control standard of pharmaceuticals;Understanding the character and main content of pharmaceutical analysis。,Characteristics and assignments,藥品(Drugs)：是用于預(yù)防、治療、診斷疾病、增強(qiáng)機(jī)體抵抗力的特殊商品。

5、 藥品質(zhì)量的全面控制( total quality control)是一個(gè)涉及多方面，多學(xué)科的綜合性工作。不是某一單位，某一部門的問(wèn)題，所涉及的整個(gè)內(nèi)容與問(wèn)題也不是某一學(xué)科可以單獨(dú)完成的，藥物分析只是其中一個(gè)重要方面。,基本任務(wù)(Basic assignments)： 1 運(yùn)用化學(xué)，物理化學(xué)或其它有關(guān)化學(xué)的方法和技術(shù)研究化學(xué)結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確的合成藥物或天然藥物及其制劑的質(zhì)量問(wèn)題。包括：藥物成品(原料/制劑)的化學(xué)檢

6、驗(yàn)工作；藥物生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制；藥物貯存過(guò)程的質(zhì)量考察。 2 臨床藥物分析工作，包括：運(yùn)用適當(dāng)?shù)姆蛛x分 析方法，測(cè)定藥物制劑生物利用度及動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)；研究藥物的作用特性和機(jī)制；分析藥物進(jìn)入體內(nèi)的吸收，分布，代謝，消除等動(dòng)力學(xué)過(guò)程。,目的(Purpose)： 為了保證人們的用藥安全，合理，有效，提高藥品質(zhì)量，促進(jìn)藥品生產(chǎn)的正?；?guī)范化，為合理使用國(guó)家資源做出貢獻(xiàn)。發(fā)展方向(Developing te

7、ndency) 藥物分析學(xué)科和藥物分析工作者面前的迫切任務(wù)，不再僅僅是靜態(tài)的常規(guī)檢驗(yàn)，而且要深入到工藝流程，反應(yīng)歷程，生物體內(nèi)代謝過(guò)程和綜合評(píng)價(jià)的動(dòng)態(tài)分析研究中。所采用的分析方法應(yīng)該更加靈敏，專屬，準(zhǔn)確和快速，力求向自動(dòng)化，最優(yōu)化和智能化方向發(fā)展。,Pharmacopoeia and drugs quality standard,藥典是記載藥品標(biāo)準(zhǔn)的法典，是國(guó)家管理藥品生產(chǎn)與質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。

8、內(nèi) 容(Content)： 藥典的內(nèi)容一般分為凡例，正文，附錄和索引四部分。凡例是為解釋和使用中國(guó)藥典，正確進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)提供指導(dǎo)原則。正文部分為所收載藥品或制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。內(nèi)涵包括：真?zhèn)?；純度；品質(zhì)優(yōu)良度。三者的集中表現(xiàn)即使用過(guò)程的有效性和安全性。附錄包括制劑通則和通用檢測(cè)方法。 中國(guó)藥典的沿革(Evolution)：,二 部（化學(xué)藥，生化藥，抗生素，放射性藥品，生物制品等967種）,一

9、 部 （中藥材等509種，成方等275種）,收載藥品1751種,1990年,第五版,二 部（化學(xué)藥，生化藥，抗生素，放射性藥品，生物制品等1455種）,一 部 （中藥材等522種，成方等398種）,收載藥品2375種,1995年,第六版,,化學(xué)藥215種，植物藥與油脂類65種，動(dòng)物藥13種，抗生素2種，生物制品25種等,收載藥品531種,1953年,第一版,,,2691 種. 增加和修訂品種最多的是抗生素類和生化及生測(cè)藥

10、品。二部附錄新增了毛細(xì)管電泳法，熱分析法，x–射線粉末衍射法，粒度測(cè)定法，滲透壓摩爾濃度測(cè)定法等,2000年,第七版,二 部（化學(xué)藥，生化藥，抗生素，放射性藥品，生物制品等776種）,一 部 （中藥材等506種，中藥成方207種）,收載藥品1489種,1985年,第四版,二 部（化學(xué)藥，生化藥，抗生素，放射性藥品，生物制品等773種,一 部 （中草藥材等882種，成方制劑270種）,收載藥品1952種,1977年

11、,第三版,二 部（化學(xué)藥品，生化藥品，抗生素，生物制劑等667種）,一 部 （中藥材446種，中藥成方制劑197）,收載藥 品1310種,1963年,第二版,,,,,,,,,,,,,,,外國(guó)藥典(Foreign pharmacopoeias) （1） 英國(guó)藥典 (British Pharmacopoeia, 縮寫 BP)目前版本為2000年版，縮寫為BP(2000)； （2） 美國(guó)藥典 (The Phar

12、macopoeia of the United States of America，簡(jiǎn)稱USP)最新的是第25版(即USP X X V )； （3）美國(guó)國(guó)家處方集（The National Formulary，縮寫 NF20版； （4）日本藥局方（簡(jiǎn)稱JP), 目前為14版，即JP(14) （5）歐洲藥典（European pharmacopoeia，縮寫Ph.Eup），目前版本為第四版；,General

13、 procedure of drugs examination (藥品檢驗(yàn)工作的基本程序),一· 一般原則(General principle) 工作時(shí)必須具備高度的責(zé)任感和嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的工作態(tài)度；必須具有熟練，正確的操作技能及良好的科學(xué)作風(fēng)，保證藥品檢驗(yàn)工作的公正性。二·藥品檢驗(yàn)的工作程序(Procedure) 一般為取樣，鑒別，檢查，含量測(cè)定，寫出報(bào)告。 （1）Sampli

14、ng：應(yīng)考慮取樣的科學(xué)性，真實(shí)性和代表性。取樣應(yīng)均勻，合理。 （2）Identification：依據(jù)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進(jìn)行某些化學(xué)反應(yīng)，測(cè)定某些理化常數(shù)或光譜特征，來(lái)判斷藥物及其制劑的真?zhèn)?。如官能團(tuán)反應(yīng)，焰色反應(yīng)等。,（3）Limit test：藥物在不影響療效及人體健康的原則下，允許生產(chǎn)和儲(chǔ)藏過(guò)程中引入的微量雜質(zhì)存在，通常進(jìn)行“限度檢查”（即純度檢查）。（4）Assay：測(cè)定藥物中的有效成分的含量。（5） Report：

15、須有完整的原始記錄，記錄的內(nèi)容應(yīng)包括供試品的名稱，批號(hào)，規(guī)格，數(shù)量，供試品來(lái)源，取樣方法，外觀性狀，包裝情況，檢驗(yàn)?zāi)康模瑱z驗(yàn)項(xiàng)目，檢驗(yàn)方法與依據(jù)，取樣日期和報(bào)告日期。復(fù)核后的記錄，屬內(nèi)容和計(jì)算錯(cuò)誤的，復(fù)核人要負(fù)責(zé)；屬檢驗(yàn)錯(cuò)誤的，復(fù)核人無(wú)責(zé)任。結(jié)果要由檢驗(yàn)人員，復(fù)核人員及有關(guān)負(fù)責(zé)人簽名或蓋章。,藥物分析課程的特點(diǎn)與主要內(nèi)容,主要內(nèi)容(Main content)： 1 藥物的鑒別，檢查和定量分析的基本規(guī)律與基本方法。

16、2 以八類典型藥物的分析為例，圍繞藥品質(zhì)量的全面 控制，討論如何從藥物的結(jié)構(gòu)出發(fā)，運(yùn)用化學(xué)的，物理化學(xué)的以及其它必要的技術(shù)與方法進(jìn)行質(zhì)量分析的基本的方法與原理。 3 制劑分析的特點(diǎn)及基本方法。 4 以代表性的生化藥物和中藥制劑為例，概論其質(zhì)量分析的特點(diǎn)與主要方法。 5 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的基本原則，內(nèi)容與方法。 6 藥品質(zhì)量控制中的新方法與新技術(shù)。,第一章 藥物的鑒別實(shí)驗(yàn)

17、 Identification Test,第一節(jié)·概述(Introduction) 一· 鑒別的項(xiàng)目(Items) 二·鑒別的實(shí)驗(yàn)條件(Conditions ) 三·鑒別實(shí)驗(yàn)的靈敏度(Sensitivity)第二節(jié)· 藥物的一般鑒別實(shí)驗(yàn) (General identification tes

18、t ) 一· 鑒別方法(Methods) 二· 鑒別實(shí)驗(yàn)與原理 (Identification test and principle),Fundamental Requirement,Understanding identification item content : property,general

19、identification tests and specific identification tests;Understanding identification conditions: concentration, temperature,acidity and basicity,existence of interference components and reaction time;Familiarizing with

20、the concepts of identification sensitivity and black test, and the methods to improve reaction sensitivity;Familiarizing with identification method: chemical methods, spectral and chromatographic methods.Understanding

21、the contents and principles of general identification tests.,第一節(jié) 概 述,鑒別試驗(yàn)用于鑒別藥物的真?zhèn)?藥物分析中屬首項(xiàng)工作。中國(guó)藥典和世界各國(guó)藥典所收載的藥物項(xiàng)下的鑒別實(shí)驗(yàn)方法，僅使用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物。這些實(shí)驗(yàn)方法雖有一定的專屬性，但未必具有足以確證的充分條件，因此不能賴以鑒別未知物。對(duì)于原料藥，

22、還應(yīng)結(jié)合性狀項(xiàng)下的外觀和物理常數(shù)進(jìn)行確證，作為鑒別實(shí)驗(yàn)的補(bǔ)充。,性狀(Character) 藥物的性狀反映藥物特有的物理性質(zhì)，一般包括外觀、嗅、味、溶解度以及物理常數(shù)等。 一般鑒別實(shí)驗(yàn)(General identification test) 是以藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其物理化學(xué)性質(zhì)為依據(jù)，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)來(lái)鑒別真?zhèn)蔚摹?通過(guò)一般鑒別實(shí)驗(yàn)只能證實(shí)是某一類藥物，而不能證實(shí)

23、是哪一種藥物，如鈉鹽試驗(yàn)。 專屬鑒別試驗(yàn)(Specific identification test) 是證實(shí)某一藥物的依據(jù)，它是根據(jù)每一種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性的不同，選用某些特有的靈敏反應(yīng)，來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)巍?一 Items of identification,小結(jié)(Summary),一般鑒別實(shí)驗(yàn)是以某些類別藥物的共同化學(xué)結(jié)構(gòu)為依據(jù)，根據(jù)其相同的物理或化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行藥物真?zhèn)蔚蔫b別，以區(qū)別

24、不同類別的藥物。專屬鑒別實(shí)驗(yàn)，則是在一般鑒別實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異，來(lái)鑒別藥物，以區(qū)別同類藥物或具有相同化學(xué)結(jié)構(gòu)部分的各個(gè)藥物單體，達(dá)到最終確定藥物真?zhèn)蔚哪康摹?二 鑒別實(shí)驗(yàn)條件(Conditions),（一）溶液的濃度(Concentration)（二）溶液的溫度(Temperature )（三）溶液的酸堿度(Acids and bases)（四）干擾成分的存在(Existence of interf

25、erence)（五）實(shí)驗(yàn)時(shí)間 (Time of reaction),三 Sensitivity of identification test,反應(yīng)靈敏度和空白試驗(yàn) (Sensitivity and blank test) 反應(yīng)的靈敏度(Sensitivity)：在一定的條件下，能在盡可能稀的溶液中觀測(cè)出盡可能少量的供試品，反應(yīng)對(duì)這一要求所能滿足的程度。它以最低檢出量和最低檢出濃度來(lái)表示。

26、 最低檢出量(Minimum detectable quantity) (以m表示）：應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定的條件下，能觀測(cè)出的供試品的最小量，其單位通常用微克（µg)表示。 最低檢出濃度(Minimum detectable concentration)：應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定的條件下，能觀測(cè)出的供試品的最低濃度，其中G（V）表示含有1g重某供試品的溶液的克（ml）數(shù) 。,Blan

27、k test： Where it is directed that ‘a(chǎn)ny necessary condition’ be made by a blank determination, the determination is to be conducted using the same quantities of the same reagents treated in the same manner as the solution

28、 or mixture containing the portion of the substance under assay or test, but with the substance itself omitted. The methods of improving sensitivity 1 加入與水互不相溶的有機(jī)溶劑 2 改進(jìn)觀測(cè)方法,,,,The relation between min

29、imum detectable quantity and minimum detectable concentration： v m = ×106 G,,第二節(jié) 藥物的一

30、般鑒別實(shí)驗(yàn) General identification tests,一 鑒別方法(Identification methods) （一）化學(xué)鑒別法(Chemical methods ) （二）光譜鑒別法(Spectrometry) （三）色譜鑒別法(Chromatography)二 鑒別試驗(yàn)與原理(Tests and principle) （一）有機(jī)氟化物(Organofluori

31、de) （二）有機(jī)酸鹽(Salt of organic acid) （三）無(wú)機(jī)金屬鹽(Inorganic metal salts),一 Identification test,（一）Chemical tests 1 Dry test (干法)：焰色反應(yīng)(flame reaction) 2 Moisture test (濕法)： （1）呈色反應(yīng)鑒別法(Color reaction )

32、 如三氯化鐵與酚羥基的反應(yīng)。 （2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法 (Precipitation reaction ) 如苯甲酸鈉與三氯化鐵的反應(yīng)。 （3）熒光反應(yīng)鑒別法(Fluorescent reaction) 如維生素B1的硫色素反應(yīng)。 （4）氣體生成反應(yīng)鑒別法(gas reaction) 如巴比妥類藥物的水解反應(yīng)。

33、,（二） Spectrometry(光譜鑒別法) 1 UV 常用方法：標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)的吸收度法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收度比值法。 2 IR 在用紅外光譜進(jìn)行鑒別實(shí)驗(yàn)時(shí)，中國(guó)藥典（2000年版）和BP（1998）一般均采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法，而USP（25）采用對(duì)照品法。（三） Chromatogr

34、aphy (色譜鑒別法) 常用方法有：TLC；HPLC；GC；PC.,（一）有機(jī)氟化物(Organic fluoride) 鑒別試驗(yàn) 取供試品約7mg，照氧瓶燃燒法進(jìn)行有機(jī)破壞，用水20ml與0.01mol/L氫氧化鈉溶液6.5ml為吸收液，待燃燒完全后，充分振搖；取吸收液 2ml，加茜素氟藍(lán)試液0.5ml,再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml,用水稀釋至4ml,加硝酸亞鈰試液0.5ml，即顯藍(lán)紫

35、色；同時(shí)做空白對(duì)照試驗(yàn)。,二 鑒別試驗(yàn)與原理 Identification tests & principles,2 實(shí)驗(yàn)原理(Principle): 有機(jī)氟化物經(jīng)氧瓶燃燒法破壞,為堿性溶液吸收成為無(wú)機(jī)氟化物后,其反應(yīng)式為:,,,,＋,＋ Ce3+,pH4.3,1.水楊酸鹽(Salicylate)鑒別實(shí)驗(yàn)一 取供試品的稀溶液,加三氯化鐵 試液一滴,即顯紫色。

36、 (原理) 鑒別實(shí)驗(yàn)二 取供試品溶液,加稀鹽酸,即析出白色水楊酸沉淀;分離沉淀在醋酸銨溶液中溶解。 (原理),(二) 有機(jī)酸鹽 Salt of organic acid,本品在中性或弱酸性條件下，和三氯化鐵生成配位化合物，在中性時(shí)成紅色，弱酸性時(shí)成紫色；若在強(qiáng)酸性中，配位化合物即行分解，生成游離水楊

37、酸。 本反應(yīng)極為靈敏，只需取稀溶液進(jìn)行試驗(yàn)，如取用量大，產(chǎn)生顏色過(guò)深時(shí)，可加水稀釋后觀察。水楊酸不溶于水(0℃時(shí)溶解度為1g/1500L)，故供試液加酸即生成游離水楊酸。由于水楊酸的酸性（Ka=1.06×10-3，25℃）大于醋酸（Ka=1.85×10-5，25℃），故能與醋酸銨作用釋出醋酸，而本身形成銨鹽溶解。析出的水楊酸亦可經(jīng)水洗滌、干燥后測(cè)定熔點(diǎn)（158～161℃）。,,2.苯甲酸鹽(

38、Benzoate )鑒別實(shí)驗(yàn)一 取供試品的中性溶液，加三氯化鐵溶液，即生成赭色沉淀；加稀鹽酸，變成白色沉淀。 (原理)鑒別實(shí)驗(yàn)二 取供試品于干燥試管中，加硫酸后，加熱，不炭化，但析出苯甲酸，在試管內(nèi)壁凝結(jié)成白色升華物 (mp 121-123)。 (原理)3.乳酸鹽(Lactate )鑒別實(shí)驗(yàn) 取供試品溶液5ml（約相當(dāng)于乳酸

39、5mg），置于試管中，加溴試液與稀鹽酸，置水浴上加熱，并用玻璃棒小心攪拌至褪色，加硫酸銨4g,混勻，沿管壁逐滴加入10％亞硝基鐵氰化鈉的稀硫酸溶液0.2ml和濃氨溶液1ml，使成兩液層；在放置30分鐘內(nèi)，兩液層的接界面出現(xiàn)一暗綠色的環(huán)。(原理),其反應(yīng)式為(Equation)：CH3CHOH +Br2+H+ CH3CHO+CO2 +2HBr COO- CH3CHO+[Fe(CN)5NO] 2-

40、+2OH- [Fe(CN)5ON=CHCHO]4- +2H2O,,,,,,本品在中性溶液中與三氯化鐵生成赭色沉淀，其主產(chǎn)物組成為： [( )6Fe3(OH)2] 加稀鹽酸，沉淀分解，生成游離的苯甲酸沉淀。本品在強(qiáng)酸作用下，析出游離水楊酸。加熱可升華并凝結(jié)于溫度較低的試管內(nèi)壁上。游離苯甲酸升華物可測(cè)定熔點(diǎn)（121～1

41、23℃）。,,4.枸櫞酸鹽(Citrate),鑒別實(shí)驗(yàn)一 取供試品溶液2ml（約相當(dāng)于枸櫞酸10mg），加稀硫酸數(shù)滴，加熱至沸，加高錳酸鉀試液數(shù)滴，振搖，紫色即消失；溶液分成兩份，一份中加硫酸汞試液1滴，另一份中逐滴加入溴試液，均生成白色沉淀。鑒別實(shí)驗(yàn)二 取供試品約5mg，加吡啶-醋酐（3:1)約5ml，振搖，即生成黃色到紅色或紫紅色溶液。,5.酒石酸鹽(Tartrate ),鑒別實(shí)驗(yàn)一 取供試品的中性溶液，至潔凈的試管中加

42、氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在管的內(nèi)壁成銀鏡。鑒別實(shí)驗(yàn)二 取供試品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亞鐵試液一滴和過(guò)氧化氫試液一滴，待溶液褪色后，用氫氧化鈉試液堿化，溶液即顯紫色。,6.醋酸鹽(Acetate),鑒別實(shí)驗(yàn) 取供試品，加硫酸和乙醇后加熱，即產(chǎn) 生醋酸乙酯的香氣。實(shí)驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： CH3COO-+CH3CH2OH+H+

43、 CH3COOC2H5+H2O,,,,,,(三）無(wú)機(jī)金屬鹽(Inorganic metal salts),1.鈉鹽(Sodium salt)鑒別實(shí)驗(yàn)一 取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。鑒別實(shí)驗(yàn)二 取供試品的中性溶液加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。,2.鉀鹽 (potassium salt),鑒別實(shí)驗(yàn)一 取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在火焰中燃燒，火焰即顯紫色，但有少量鈉鹽存在時(shí)

44、，須隔色玻璃透視，方可辨認(rèn)。鑒別實(shí)驗(yàn)二 取供試品，加熱熾灼，除去可能含有的銨鹽，放冷后，加水溶解，再加0.1％四苯硼鈉溶液與醋酸,即生成白色沉淀。注意： 若有銨離子存在，顯相同反應(yīng)，故必須預(yù)先加熱熾灼除去，以免干擾試驗(yàn)結(jié)果的辨認(rèn)。,3.銨鹽(Ammonium salt),鑒別實(shí)驗(yàn)一 取供試品，加過(guò)量氫氧化鈉試液后，加熱，即分解，發(fā)生氨臭；遇濕潤(rùn)的紅色石蕊試紙，能使之變藍(lán)，并能使硝酸亞汞試液濕潤(rùn)的濾紙顯黑色。鑒別實(shí)驗(yàn)二

45、 取供試品溶液，加堿性碘化汞鉀試液1滴，即生成紅棕色沉淀。,4.鈣鹽(Calcium salt),鑒別實(shí)驗(yàn)一 取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯磚紅色。 鑒別實(shí)驗(yàn)二 取供試品溶液（1 20），加甲基紅指示液2滴，用氨試液中和，再滴加鹽酸至呈酸性，加草酸銨試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀不溶于醋酸，但可溶于鹽酸。,,Editor: