高效液相常見問題及解決

1、高效液相色譜儀使用中常見問題及解決方法高效液相色譜儀使用中常見問題及解決方法?高效液相色譜儀系統(tǒng)高效液相色譜儀系統(tǒng)液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)而言，柱子、泵和檢測(cè)器是核心部件同時(shí)也是易出問題的主要部位。?常見問題及解決方法常見問題及解決方法高效液相作為一種高精密儀器，如果在使用過程中不按照正確操作的話，就容易導(dǎo)致一些問題。其中最常見的就是柱壓?jiǎn)栴}、漂移問題、峰型異常問題。1柱壓

2、問題柱壓?jiǎn)栴}柱壓?jiǎn)栴}是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值而是指壓力波動(dòng)范圍在345kPa以內(nèi)或在50PSI（針對(duì)Waters高效液相色譜儀）之間（在使用梯度洗脫時(shí)，柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的）。壓力過高、過低都屬于柱壓?jiǎn)栴}。1.1壓力過高壓力過高這是高效液相在使用中最常見的問題，指的是壓力突然升高，1、一般都是由于流路中有

3、堵塞的原因。此時(shí)，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。(1).首先斷開真空泵的入口處，此時(shí)PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過濾頭正常，在檢查；(2).打開Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過柱子，如果壓力沒有明顯下降，則是過濾白頭堵塞。處理方法：將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至

4、100PSI以下，過濾白頭正常，在檢查；(3).把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用流動(dòng)相沖洗柱子。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。問題無法解決可考慮

5、更換色譜柱。2、流速設(shè)定不正確：可重新設(shè)定正確流量。3、流動(dòng)相配比不正確：不同配比的流動(dòng)相其黏度系數(shù)不相同，較高黏度的流動(dòng)相相應(yīng)的系統(tǒng)壓力也大，如果可能可更換黏度較小的溶劑或重新設(shè)定配比。4、系統(tǒng)壓力零點(diǎn)漂移：調(diào)節(jié)壓力傳感器的零點(diǎn)。5、阻尼器堵塞：拆下后進(jìn)行超聲波清洗或更換新的阻尼器。6、進(jìn)樣器堵塞：參見說明書清洗。動(dòng)相。2.22.2基線噪音基線噪音對(duì)于紫外檢測(cè)器氘燈光源打開后要預(yù)熱30min以上基線才能穩(wěn)定。噪聲是指與被測(cè)物無關(guān)的檢測(cè)

6、器輸出信號(hào)的隨機(jī)擾動(dòng)變化分短期噪聲和長(zhǎng)期噪聲兩種。氘燈用的過久接近壽命期時(shí)(氘燈的壽命約1000h)會(huì)使基線噪音明顯增加應(yīng)及時(shí)更換氘燈。除光源外流路中的氣泡也會(huì)產(chǎn)生噪音。對(duì)于判斷基線噪聲增大是由于光源燈的老化還是來自流路中的氣泡的問題可將泵關(guān)上繼續(xù)走基線如果噪聲立即停止基線呈一條直線說明基線噪聲來自流動(dòng)相中的氣泡應(yīng)設(shè)法排氣若停泵后仍有噪音出現(xiàn)應(yīng)考慮是燈的問題。電化學(xué)檢測(cè)器中的工作電極(安培型)對(duì)氣泡十分敏感儀器的平衡時(shí)間較長(zhǎng)。流路中如果

7、有氣泡存在不僅基線會(huì)出現(xiàn)尖峰還會(huì)影響檢測(cè)。因此做電化學(xué)檢測(cè)時(shí)流動(dòng)相的配制要很嚴(yán)格水要超純、除還原物配好后一定要過濾脫氣還應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。如果泵系統(tǒng)不是PK材料即電化學(xué)分析專用儀器而是普通的高效液相色譜不銹鋼泵應(yīng)對(duì)系統(tǒng)中的不銹鋼材料的輸液泵、進(jìn)樣器和管道在分析前用6molL1硝酸溶液鈍化(注意斷開分離柱)可縮短基線平衡時(shí)間。還可在流動(dòng)相中加入EDTA離子隱蔽劑也是可以的。如果有較大的氣泡進(jìn)到檢測(cè)器中光靠泵沖可能太慢可暫時(shí)將泵停止關(guān)上電化學(xué)檢測(cè)

8、器拆下工作電極用超純水沖洗電極表面也很奏效的但對(duì)液相色譜技術(shù)不太熟練的技術(shù)員要小心操作不宜反復(fù)這樣拆卸。2.2.12.2.1基線噪音基線噪音(規(guī)則的規(guī)則的)產(chǎn)生基線噪音的原因有：在流動(dòng)相、檢測(cè)器或泵中有空氣；漏液；流動(dòng)相混合不完全；溫度影響(柱溫過高檢測(cè)器未加熱)；在同一條線上有其他電子設(shè)備；泵振動(dòng)。了避免基線噪音在正式進(jìn)樣之前需要對(duì)流動(dòng)相脫氣；沖洗系統(tǒng)以除去檢測(cè)器或泵中的空氣；檢查管路接頭是否松動(dòng)；泵是否漏液；是否有鹽析出和不正常的噪

9、音如有必要更換泵密封；用手搖動(dòng)使溶劑混合均勻或使用低粘度的溶劑減少差異或加上熱交換器；有其他電子設(shè)備時(shí)斷開LC、檢測(cè)器和記錄儀檢查干擾是否來自于外部加以更正；泵振動(dòng)時(shí)在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器。2.2.22.2.2基線噪音基線噪音(不規(guī)則的不規(guī)則的)(1)漏液：檢查接頭是否松動(dòng)泵是否漏液是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要更換密封檢查流通池是否漏液。(2)流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成：檢查流動(dòng)相的組成。(3)流動(dòng)相各溶劑不相溶：選擇互溶

10、的流動(dòng)相。(4)檢測(cè)器記錄儀電子元件的問題：斷開檢測(cè)器和記錄儀的電源檢查并更正。(5)系統(tǒng)內(nèi)有氣泡：用強(qiáng)極性溶液清洗系統(tǒng)；檢測(cè)器內(nèi)有氣泡清洗檢測(cè)器在檢測(cè)器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器。(6)流通池污染(即使是極少的污染物也會(huì)產(chǎn)生噪音):用硝酸清洗流通池(7)檢測(cè)器燈能量時(shí)不足更換燈(8)色譜柱填料流失或阻塞:更換色譜柱。(9)流動(dòng)相混合不均勻或混合器工作不正常:維修或更換混合器在流動(dòng)相不走梯度時(shí)不建議使用泵的混合裝置。3保留時(shí)間保留時(shí)間3.1