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1、電子顯微鏡技術(shù)方周溪潘亮亮胡萬(wàn)里透射電子顯微鏡掃描電子顯微鏡電子顯微鏡室溫州醫(yī)學(xué)院生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心第一章透射電子顯微鏡一、與透射電鏡有關(guān)的幾個(gè)基本概念1、光的衍射現(xiàn)象:由于光具有波動(dòng)性,當(dāng)光線(xiàn)通過(guò)小孔或小孔光源經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)成象會(huì)產(chǎn)生衍射。其圖案是:中央部分一個(gè)亮斑,在其周?chē)忻靼到惶娴膱@環(huán),即埃里(Airy)圓盤(pán)其中心亮斑的能量大約占入射光源能量的84%(如圖所示)。2、瑞利準(zhǔn)則光線(xiàn)通過(guò)二個(gè)比較靠近的小孔時(shí),這二個(gè)小孔的衍射圖會(huì)重疊在一
2、起。當(dāng)一個(gè)衍射圖的中央亮斑正好落在另一個(gè)衍射圖的第一暗環(huán)中心時(shí),這二個(gè)點(diǎn)剛可以分辯。這就是顯微鏡分辯本領(lǐng)的瑞利準(zhǔn)則。33、分辨率、分辨率、分辨率分辨率又稱(chēng)分辨本領(lǐng),它表示儀器的分辨能力足以分辨率又稱(chēng)分辨本領(lǐng),它表示儀器的分辨能力足以分辨率又稱(chēng)分辨本領(lǐng),它表示儀器的分辨能力足以清楚分開(kāi)的兩點(diǎn)或兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)圓心間最小距離的本領(lǐng)。它清楚分開(kāi)的兩點(diǎn)或兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)圓心間最小距離的本領(lǐng)。它清楚分開(kāi)的兩點(diǎn)或兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)圓心間最小距離的本領(lǐng)。它與光的性質(zhì),即衍射、
3、干涉及透鏡像差有關(guān)。與光的性質(zhì),即衍射、干涉及透鏡像差有關(guān)。與光的性質(zhì),即衍射、干涉及透鏡像差有關(guān)??梢赃@么說(shuō),顯微鏡分辯本領(lǐng)是由其產(chǎn)生的衍射圖可以這么說(shuō),顯微鏡分辯本領(lǐng)是由其產(chǎn)生的衍射圖可以這么說(shuō),顯微鏡分辯本領(lǐng)是由其產(chǎn)生的衍射圖中央亮斑半徑中央亮斑半徑中央亮斑半徑DD(分辨能力)的大小而定:(分辨能力)的大小而定:(分辨能力)的大小而定:光學(xué)顯微鏡的分辨力可以根據(jù)阿貝公式來(lái)計(jì)算,即光學(xué)顯微鏡的分辨力可以根據(jù)阿貝公式來(lái)計(jì)算,即光學(xué)顯微
4、鏡的分辨力可以根據(jù)阿貝公式來(lái)計(jì)算,即D=瑞利準(zhǔn)則圖示瑞利準(zhǔn)則圖示瑞利準(zhǔn)則圖示這里以油鏡為例推算其分辨本領(lǐng):這里以油鏡為例推算其分辨本領(lǐng):這里以油鏡為例推算其分辨本領(lǐng):光的平均波長(zhǎng)為光的平均波長(zhǎng)為光的平均波長(zhǎng)為λ=λ=λ=500nm500nm500nm==0.5μm0.5μm0.5μm油的介質(zhì)折射率或系數(shù)油的介質(zhì)折射率或系數(shù)油的介質(zhì)折射率或系數(shù)NN==1.51.51.5物體與物鏡所形成夾角的半數(shù)物體與物鏡所形成夾角的半數(shù)物體與物鏡所形成夾
5、角的半數(shù)α90α90α90則中央亮斑的半徑則中央亮斑的半徑則中央亮斑的半徑D≈200nmD≈200nmD≈200nm==0.2μm0.2μm0.2μm一般人眼在明視距離250mm處能分辨0.2mm的兩點(diǎn),油鏡最小能分辨0.2μm的兩點(diǎn),則油鏡理論最大放大能力為:0.2mm0.2μm=1034、電磁波長(zhǎng)真空中相對(duì)集中并高速運(yùn)動(dòng)著的電子流稱(chēng)為電子束。電子束具有粒子性和波動(dòng)性,它能產(chǎn)生一定波長(zhǎng)的電磁波,其所產(chǎn)生電磁波長(zhǎng)由下列公式表示,即:λ=
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