國(guó)產(chǎn)北加apoaⅰ,apob參考品的who-ifcc靶值轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)研究

1、國(guó)產(chǎn)北加國(guó)產(chǎn)北加ApoAⅠApoAⅠ、ApoBApoB參考品的參考品的WHOIFCCWHOIFCC靶值轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)研究靶值轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)研究陳銘生1，王勤富2，劉中令3（1.上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬仁濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海200001；2.上海利群醫(yī)院，上海200333；3.上海北加生化試劑有限公司，上海200060）摘要：目的摘要：目的載脂蛋白AⅠ、B（ApoAⅠ、ApoB）參考品與WHOIFCC國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品靶值轉(zhuǎn)移，制備定值可溯源國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的國(guó)產(chǎn)北加參考

2、品。方法方法檢測(cè)方法采用免疫透射比濁法（終點(diǎn)法）；靶值轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究方法按美國(guó)西北脂類研究實(shí)驗(yàn)室（NWLRL）制定的測(cè)試步驟進(jìn)行，用WHOIFCC的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)靶值轉(zhuǎn)移和靶值轉(zhuǎn)移后的測(cè)試系統(tǒng)準(zhǔn)確性和精密度的評(píng)估等三個(gè)步驟進(jìn)行。結(jié)果結(jié)果第一步驟測(cè)試系統(tǒng)評(píng)估符合要求，第二步驟的結(jié)果均≤2%期望值，第三步驟ApoAⅠ、ApoB偏差值≤1.8，CV≤0.9%。結(jié)論結(jié)論國(guó)產(chǎn)北加ApoAⅠ、ApoB參考品的定值與WHOIFCC國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品靶值轉(zhuǎn)移成功，獲

3、得NWLRL的WHOIFCCApoAⅠ、ApoB國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)靶值轉(zhuǎn)移合格證書。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：載脂蛋白AⅠ（ApoAⅠ）、載脂蛋白B（ApoB）參考品。載脂蛋白ApoAⅠ、ApoB免疫透射比濁法試劑盒，最近完成了醫(yī)療器械注冊(cè)，并獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督總局頒發(fā)的注冊(cè)文號(hào)。但一直困繞著我們一大問(wèn)題是參考品的定值。為了制備有溯源性的參考品我們與美國(guó)華盛頓大學(xué)西北脂類研究實(shí)驗(yàn)室（NWLRL）聯(lián)系，申請(qǐng)參加ApoAⅠ、ApoB參考品靶值轉(zhuǎn)移方案。通過(guò)NW

4、LRL靶值轉(zhuǎn)移工作三個(gè)步驟評(píng)估已獲得WHO載脂蛋白AⅠ、B（ApoAⅠ、ApoB）國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)靶值轉(zhuǎn)移合格證書?，F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告如下：材料與方法材料與方法1材料與方法1.1儀器1.1.1HITACHI7060C自動(dòng)生化分析儀1.1.2.實(shí)驗(yàn)參數(shù)(免疫透射比濁法終點(diǎn)法)溫度37℃，波長(zhǎng)700nm（副）340nm（主）1cm光徑，樣品3ul，R1250ul，R250ul，分析點(diǎn)16點(diǎn)31點(diǎn)。1.2試劑羊抗人抗血清：本公司自制，ApoAⅠ效價(jià)≥1

5、:32，ApoB效價(jià)≥512。試劑1(R1)：0.01mmolL磷酸鹽緩沖液加入聚乙二醇6000。試劑2(R2)：磷酸鹽緩沖液、抗體液。1.3ApoAⅠ、ApoB參考品：批號(hào)北加20030707取新鮮人血清，剔除脂血、溶血、黃疸血清，經(jīng)測(cè)HBsAg陰性，混合后加入適量防腐劑混勻分裝，70℃保存。將結(jié)果按要求填表寄回給NWLRL，要求白12、綠12、蘭12的測(cè)定結(jié)果的均值≤2%期望值。2.2.3結(jié)果用北加20030707定標(biāo)表2白12、綠

6、12、蘭12ApoAⅠ、ApoB測(cè)試結(jié)果(gL)NWLRL定值測(cè)定值SDCV%偏差%A1BA1BA1BA1BA1BSp1011501502.01.30.1Sp3071181181.21.00.1白1210670107702.61.42.42.00.60.2綠121721471721502.31.51.31.00.11.8蘭1213796136971.80.91.31.01.00.7平均1.31.30.60.9第二步驟符合要求，NWLRL

7、通知進(jìn)入第三步驟。2.3第三步驟2.3.1用北加20030707定標(biāo)測(cè)定NWLRL40份血清標(biāo)本ApoAⅠ、ApoB的值。2.3.2方法用2.2標(biāo)定的北加20030707參考品定標(biāo)，每次均作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定由NWLRL提供的40份冷凍血清的ApoAⅠ、ApoB的值。每天一批，每批重復(fù)測(cè)定二次，共測(cè)二天。在每批測(cè)定的前、中、后按NWLRL要求都跟測(cè)白12、綠12、蘭12質(zhì)控血清。將結(jié)果按要求填表，寄回給NWLARL，要求40份血清的標(biāo)本總的

8、精密度CV≤5%，40份血清標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果與NWLRL定值的平均偏差值為ApoAⅠ≤5%、ApoB≤6%。2.3.3結(jié)果用北加20030707定標(biāo)40份血清表3精密度與偏差值CV%偏差%NWLRL要求≤5ApoAⅠ≤5、ApoB≤6ApoAⅠ1.80.9ApoB1.70.9第三步驟又獲得通過(guò)。3討論3.1ApoAⅠ、ApoB測(cè)定，一般均采用免疫透射比濁法，我們雖有了較好的試劑和摸索了儀器的參數(shù)，但結(jié)果準(zhǔn)確性如何，關(guān)鍵是參考品的溯源。為此